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第2年
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胎牛血清挑選標(biāo)準(zhǔn) 胎牛血清挑選標(biāo)準(zhǔn):1.看產(chǎn)地不同產(chǎn)地的胎牛血清,品質(zhì)也是相差甚遠(yuǎn)。值得注意的是,胎牛血清是動(dòng)物源生物制品,我國(guó)對(duì)于動(dòng)物源制品的進(jìn)口一直有很嚴(yán)格的規(guī)定,目前我國(guó)批準(zhǔn)進(jìn)口的胎牛血清來(lái)源是澳大利亞、新西蘭和烏拉圭(劃重點(diǎn)?。?,合法正規(guī)途徑進(jìn)口的胎牛血清必須在產(chǎn)品包裝上標(biāo)注血源地。這意味著,其他血源地的胎牛血清在我國(guó)是不允許進(jìn)口的,在選購(gòu)進(jìn)口產(chǎn)品時(shí),要規(guī)避選取來(lái)源為禁止輸入國(guó)家的相關(guān)產(chǎn)品。 2.看資質(zhì)合法發(fā)布時(shí)間:2024-06-03 14:37 點(diǎn)擊次數(shù):187 次
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細(xì)胞復(fù)蘇與凍存 1、細(xì)胞復(fù)蘇:①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。②在000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。2、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種1、棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗-2次,加入mL0.25%(T25瓶)2、-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,發(fā)布時(shí)間:2024-05-23 11:38 點(diǎn)擊次數(shù):187 次
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細(xì)胞凍存原理 當(dāng)細(xì)胞所處溫度低于0°C時(shí),細(xì)胞脫水,細(xì)胞中可溶性物質(zhì)濃度升高,并在細(xì)胞內(nèi)形成冰晶,冰晶的大小對(duì)細(xì)胞的影響是不同的,大冰晶容易造成細(xì)胞膜、細(xì)胞器的損傷和破裂,故造成復(fù)蘇出來(lái)的細(xì)胞存活率、狀態(tài)等與凍存前的狀態(tài)相差甚遠(yuǎn)。因此,我們?cè)趦龃婕?xì)胞的時(shí)候會(huì)采取兩個(gè)措施,一加入低溫保護(hù)劑,二慢凍細(xì)胞。凍存時(shí)機(jī):細(xì)胞應(yīng)在生長(zhǎng)良好、密度約為80-90%、數(shù)目一般為106-107/ml,活力差的細(xì)胞在凍存后的成活率很發(fā)布時(shí)間:2024-05-14 16:10 點(diǎn)擊次數(shù):215 次
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抗體穩(wěn)定性良好理由小結(jié) 抗體穩(wěn)定性良好理由小結(jié):1.抗體的穩(wěn)定性是自然界長(zhǎng)期進(jìn)化的結(jié)果抗體是**系統(tǒng)中重要的分子之一,其穩(wěn)定性是自然進(jìn)化篩選的結(jié)果。在眾多物種中,抗體分子形成了保守而穩(wěn)定的結(jié)構(gòu),分子中70%氨基酸殘基(**球蛋白結(jié)構(gòu)域)以bet**層(beta-sheet)形式堆疊,形成緊密并能耐受蛋白酶作用的“三明治”結(jié)構(gòu),輕鏈和重鏈通過(guò)保守的二硫鍵形成具有三個(gè)結(jié)構(gòu)域的**球蛋白,大大提高了分子本身的穩(wěn)定性。2.抗體濃發(fā)布時(shí)間:2024-05-09 10:17 點(diǎn)擊次數(shù):156 次
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Elisa測(cè)定實(shí)操要點(diǎn)總匯 Elisa方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定.在Elisa測(cè)定中影響因素較多,在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。1.樣品稀釋一般產(chǎn)品的樣品稀釋倍數(shù)均通過(guò)大量試驗(yàn)確定,以保證試驗(yàn)的靈敏度和特異性.酶聯(lián)**反應(yīng)是一種敏感性很高的反應(yīng),如果血清不稀釋,不可避免會(huì)產(chǎn)生很強(qiáng)的非特異性反應(yīng),出現(xiàn)假陽(yáng)性.2.試劑盒平衡Elisa中所有試劑和板條均應(yīng)在試驗(yàn)前平衡至室溫(約25℃),一般需在室溫放發(fā)布時(shí)間:2024-04-26 10:26 點(diǎn)擊次數(shù):172 次
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基礎(chǔ)培養(yǎng)基組成及作用 基礎(chǔ)培養(yǎng)基組成及作用:氨基酸:組成蛋白質(zhì)的基本單位。不同的細(xì)胞對(duì)氨基酸的需求各異,但幾種必需氨基酸細(xì)胞自身不能合成,必須依靠培養(yǎng)液提供,如組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、蘇氨酸、色氨酸、纈氨酸、半胱氨酸、酪氨酸等。其余非必需氨基酸,細(xì)胞可以自己合成,或通過(guò)轉(zhuǎn)氨作用由其他物質(zhì)轉(zhuǎn)化而來(lái)。絕大部分細(xì)胞對(duì)谷氨酰胺有較高的要求,因?yàn)楣劝滨0肥亲鳛槟茉醇疤荚次镔|(zhì)同時(shí)被細(xì)胞利用,是是細(xì)胞合成發(fā)布時(shí)間:2024-04-17 16:13 點(diǎn)擊次數(shù):219 次
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小鼠ELISA試劑盒雙抗體夾心法流程 小鼠ELISA試劑盒雙抗體夾心法流程:1、用緩沖液將抗體稀釋至1-1a0ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過(guò)夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。3、發(fā)布時(shí)間:2024-04-11 11:16 點(diǎn)擊次數(shù):148 次
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細(xì)胞衰老檢測(cè)方法與步驟 細(xì)胞衰老檢測(cè)方法與步驟:(1)細(xì)胞接種前在6孔培養(yǎng)板中預(yù)先放置**的細(xì)胞片,每孔加入1×10E5個(gè)細(xì)胞,37℃5%CO2條件下培養(yǎng)過(guò)夜,使細(xì)胞在細(xì)胞片上生長(zhǎng)。(2)在超凈工作臺(tái)中吸棄6孔培養(yǎng)板中的培養(yǎng)液,加入×1PBS,洗滌細(xì)胞1次,隨后加入2%甲醛/0.2%戊二醛固定液,室溫條件下固定3~5分鐘。(3)吸棄2%甲醛/0.2%戊二醛固定液,加入×1PBS,洗滌細(xì)胞3次,每次3分鐘。(4)吸棄×1P發(fā)布時(shí)間:2024-04-02 14:30 點(diǎn)擊次數(shù):162 次
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PCR反應(yīng)溫度循環(huán)參數(shù) PCR反應(yīng)溫度循環(huán)參數(shù):1.變性溫度與時(shí)間PCR反應(yīng)中模板DNA的變性十分重要。只有完全性的模板DNA和PCR產(chǎn)物雙鏈完全解開(kāi),才能有效的和引物結(jié)合。這種結(jié)合是PCR擴(kuò)增的基礎(chǔ)。變性溫度越高,時(shí)間越長(zhǎng)變性就越充分。但溫度過(guò)高、時(shí)間過(guò)長(zhǎng)又會(huì)影響TaqDNA聚合酶的活性,所以通常選用變性溫度為95℃30s為宜。在PCR反應(yīng)中第2個(gè)循環(huán)變性重要,需時(shí)間較長(zhǎng),因模板DNA的鏈比較長(zhǎng)。2.復(fù)性溫度與時(shí)間變性發(fā)布時(shí)間:2024-03-29 16:46 點(diǎn)擊次數(shù):1049 次
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HRP底物氯萘酚操作步驟 氯萘酚可以形成一種藍(lán)黑色產(chǎn)物。敏感性低于DAB,且產(chǎn)物可溶于醇中。它適用于當(dāng)DAB反應(yīng)形成較高背景或要求改變產(chǎn)物的顏色。1、需要的溶液和特殊設(shè)備0.03%氯萘酚,用無(wú)水乙醇溶解(貯存在-20℃),0.05mol/LTris(pH7.6),過(guò)氧化氫,Gelvatol或者M(jìn)owiol,光學(xué)顯微鏡(通常帶有照相機(jī)以便于記錄結(jié)果)。2、操作步驟(1)氯萘酚貯存液的準(zhǔn)備:用10mL無(wú)水乙醇溶解0.3g氯萘酚發(fā)布時(shí)間:2024-03-21 09:59 點(diǎn)擊次數(shù):183 次
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細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程溫馨提示 細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程溫馨提示:1.收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。2.仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。3.用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形發(fā)布時(shí)間:2024-03-12 10:54 點(diǎn)擊次數(shù):126 次
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細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng) 傷口**試驗(yàn),也通常稱為“劃痕試驗(yàn)”,是一種廣泛建立的研究體外集體細(xì)胞遷移的技術(shù)。細(xì)胞劃痕(WoundHealing)是一種操作簡(jiǎn)單,經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的研究細(xì)胞遷移/腫瘤侵襲的體外試驗(yàn)方法。其實(shí)驗(yàn)原理是,當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)到融合成單層狀態(tài)時(shí),在融合的單層細(xì)胞上人為一個(gè)空白區(qū)域,稱為“劃痕”。劃痕邊緣的細(xì)胞會(huì)逐漸進(jìn)入空白區(qū)域使“劃痕”**。劃痕實(shí)驗(yàn)需要注意事項(xiàng):1.細(xì)胞的密度;劃痕實(shí)驗(yàn)一般是幾種細(xì)胞的結(jié)合,但是每種發(fā)布時(shí)間:2024-03-05 10:42 點(diǎn)擊次數(shù):319 次
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PCR儀特性匯總 PCR儀是通過(guò)PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù),對(duì)特定DNA進(jìn)行擴(kuò)增的儀器。PCR儀就是利用DNA聚合酶對(duì)特定基因做體外或試管內(nèi)InVitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶進(jìn)行專一性的連鎖復(fù)制。目前常用的技術(shù),可以將一段基因復(fù)制為原來(lái)的一百億至一千億倍。PCR儀特點(diǎn):1、半導(dǎo)體技術(shù)、新一代半導(dǎo)體(Peltier)技術(shù)。2、方便靈活的模塊更換裝置,輕松更換所需模塊。3、可實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)程故障判斷。發(fā)布時(shí)間:2024-02-27 14:00 點(diǎn)擊次數(shù):215 次
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ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作中的原則歸納 ELISA試劑盒恢復(fù)至室溫后,取出要使用的酶標(biāo)板孔,未使用的酶標(biāo)板孔應(yīng)及時(shí)放回鋁箔袋,加入干燥劑,封緊封口,冷藏保存。切忌將未完全平衡至室溫的酶標(biāo)板放回鋁箔袋,因?yàn)榇藭r(shí)由于溫度差,酶標(biāo)板上會(huì)有水汽,不利于穩(wěn)定保存。ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作中的原則:一、隨機(jī)原則:即運(yùn)用“隨機(jī)數(shù)字表"實(shí)現(xiàn)隨機(jī)化;運(yùn)用“隨機(jī)排列表"實(shí)現(xiàn)隨機(jī)化;運(yùn)用計(jì)算機(jī)產(chǎn)生“偽隨機(jī)數(shù)"實(shí)現(xiàn)隨機(jī)化。盡量運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)知識(shí)來(lái)設(shè)計(jì)自己的發(fā)布時(shí)間:2024-02-19 13:59 點(diǎn)擊次數(shù):215 次
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小鼠ELISA檢測(cè)試劑盒試驗(yàn)產(chǎn)生氣泡解讀 通常氣泡都是聚集在酶標(biāo)板的孔周圍,導(dǎo)致孔中液體不能與孔壁有效接觸,使孔內(nèi)反應(yīng)不均一。在做實(shí)驗(yàn)的過(guò)程中,有時(shí)為了打干凈槍頭里面的液體,很容易產(chǎn)生氣泡。 1.通常氣泡都是聚集在酶標(biāo)板的孔周圍,導(dǎo)致孔中液體不能與孔壁有效接觸。 2.孔內(nèi)反應(yīng)不均一。 3.包被時(shí)有氣泡的話,將導(dǎo)致包被不完全實(shí)際包被量下降--弱陽(yáng)性甚至假陰性。 4.封閉時(shí)有氣泡的話,將導(dǎo)致大量未結(jié)合位點(diǎn)的存在,引起非特異性結(jié)合-發(fā)布時(shí)間:2024-02-04 13:17 點(diǎn)擊次數(shù):182 次