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第2年
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抗體驗證的八種方法介紹 抗體驗證的八種方法：1.省略一抗這是測試由二級試劑引起的潛在背景的有用且重要的控制。然而，這個實驗沒有提供關于一抗質量的信息。2.抗體信號與文獻數(shù)據(jù)一致WB中觀察到的分子量、組織分布和染色模式與文獻一致。這種驗證方法很容易執(zhí)行，但也有一些限制；例如，WB中條帶的正確分子量并不一定會告訴您該條帶是所需的目標蛋白質。在WB中很容易有數(shù)百種蛋白發(fā)布時間：2024-10-09 13:55 點擊次數(shù)：356 次
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ELISA試劑盒檢測未知抗原的雙抗體夾心法過程 這種形式需要使用特定于該抗原不同表位的兩種不同抗體。這兩種抗體通常被稱為匹配抗體對。其中一種抗體包被于多孔板表面上并用作捕獲抗體以促進抗原的固定，另一種抗體被酶偶聯(lián)并促進抗原的檢測。ELISA試劑盒檢測未知抗原的雙抗體夾心法過程：1、包被：用包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1～10μg/mL。向每個Elisa板孔中加入0.1mL，4℃過夜孵育。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3發(fā)布時間：2024-10-05 13:43 點擊次數(shù)：289 次
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PCR反應擴增產物出現(xiàn)多條帶分析 擴增產物出現(xiàn)多條帶（1）引物用量偏大，引物的特異性不高。應調換引物或降低引物的使用量。（2）循環(huán)的次數(shù)過多。適當增加模板的量，減少循環(huán)次數(shù)。（3）酶的用量偏高或酶的質量不好，應降低酶量或調換另一來源的酶。（4）退火溫度偏低，退火及延伸時間偏長。應提高退火溫度，減少變性與延伸時間，也可采用二種溫度的PCR擴增。（5）樣品處理不當。（6）Mg2+濃度偏高，因適當調整Mg2+使用濃度。（7）若為PCR試發(fā)布時間：2024-09-27 14:19 點擊次數(shù)：415 次
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影響抗原抗體反應的兩大因素 抗原與抗體發(fā)生特異性結合后，雖由親水膠體變?yōu)槭杷z體，若溶液中無電解質參加，仍不出現(xiàn)可見反應。為了促使沉淀物或凝集物的形成，常用0.85％氯化鈉或各種緩沖液作為抗原及抗體的稀釋液。由于氯化鈉在水溶液中解離成Na+和C1－，可分別中和膠體粒子上的電荷，使膠體粒子的電勢下降。當電勢降至臨界電勢（12～15mV）以下時，則能促使抗原抗體復合物從溶液中析出，形成可見的沉淀物或凝集物。一、溫度在一定范圍內，發(fā)布時間：2024-09-18 15:15 點擊次數(shù)：309 次
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試劑盒選購的注意事項 試劑盒選購的注意事項：1．要仔細閱讀試劑盒的說明書，對試劑盒選用方法有所了解，科學研究工作時應選擇參考方法試劑盒，醫(yī)療預防工作應選擇推薦的常規(guī)方法試劑盒，或選擇公認的測定方法試劑盒。此外，對試劑盒的組成、方法性能指標加以分析，是用于手工操作，還是用于自動分析儀。屬于后者，其實驗參數(shù)是否與本單位自動分析儀的實驗參數(shù)相符。2．有無衛(wèi)生部的批準文號。凡已列入衛(wèi)生部臨床檢驗體外診斷試劑審批管理范圍的試劑盒發(fā)布時間：2024-09-10 10:45 點擊次數(shù)：174 次
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PCR反應主要成份Taq DNA聚合酶分析 一般TaqDNA聚合酶活性半衰期為92.5℃130min，95℃40min，97℃5min?，F(xiàn)在人們又發(fā)現(xiàn)許多新的耐熱的DNA聚合酶，這些酶的活性在高溫下活性可維持更長時間。TaqDNA聚合酶的酶活性單位定義為74℃下，30min，摻入10nmol/LdNTP到核酸中所需的酶量。TaqDNA聚合酶的一個致命弱點是它的出錯率，一般PCR中出錯率為2×10-4核苷酸/每輪循環(huán)，在利用PCR克隆和進行序發(fā)布時間：2024-08-29 16:53 點擊次數(shù)：238 次
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?影響蛋白質鹽析因素分析 蛋白質通過鹽析的辦法沉淀的原理是降低蛋白質的溶解度，使蛋白質凝聚而從溶液中析出。影響鹽析的若干因素如下：1．蛋白質濃度高濃度蛋白溶液可以節(jié)約鹽的用量，但許多蛋白質的b和Ks常數(shù)十分接近，若蛋白濃度過高，會發(fā)生嚴重的共沉淀作用；在低濃度蛋白質溶液中鹽析，所用的鹽量較多，而共沉淀作用比較少，因此需要在兩者之間進行適當選擇。用于分步分離提純時，寧可選擇稀一些的蛋白質溶液，多加一點中性鹽，使共沉淀作用減至發(fā)布時間：2024-08-20 10:06 點擊次數(shù)：616 次
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RT-LAMP檢測試劑盒試驗使用方法 RT-LAMP檢測試劑盒試驗使用方法:一、稀釋標準曲線樣品（以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例）。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。1.標記6個離心管，分別為7，6，5，4，3，2。2.用帶芯槍頭分別加入45μL熒光PCR模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。3.在7號管中加入5μL陽性對照（濃度為1×10E8拷貝/發(fā)布時間：2024-08-15 15:34 點擊次數(shù)：264 次
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防血清揮發(fā)的方法 防發(fā)揮的方法 1、使用前：必須滅活處理，56℃30分鐘。對于一些品質高的胎牛血清和新牛血清可以考慮不經滅活直接用于細胞培養(yǎng)。 2、儲存條件：一般儲存于－20℃，同時應避免反復凍融。購買大包裝的血清后，首先要滅活處理，然后分裝成小包裝，儲存于－20℃，使用前融化。融化時現(xiàn)置于4℃。融化后的血清在4℃不宜長時間存放，應盡快使用。 3、使用濃度：自從有了合成培養(yǎng)基，血清就是作為一種添加成分與合成培發(fā)布時間：2024-08-08 10:21 點擊次數(shù)：238 次
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WB封閉液的選用要求 封閉是WesternBlot 至關重要的一部分，所以正確的封閉液選擇可以讓抗體更特異地和抗原結合，為成功的WB奠定基礎。封閉液的選用要求：1、常用封閉液為脫脂牛奶（光明或伊利等）、牛血清白蛋白（BSA）、無蛋白封閉液等。2、封閉液濃度：封閉時一般用5%脫脂牛奶，也可用1-5%BSA或1%無蛋白封閉液；配制二抗稀釋液一般為1-5%脫脂牛奶，全部用PBS稀釋。3、封閉時間：室溫1-2h、4度過夜或37發(fā)布時間：2024-07-31 13:58 點擊次數(shù)：2545 次
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小鼠8異前列腺素ELISA試劑盒操作步驟 操作步驟:1. 標準品的加樣：設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；。2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3. 加酶：每孔加入酶標試劑100μl，空白孔除外。4.發(fā)布時間：2024-07-24 09:58 點擊次數(shù)：214 次
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細胞穩(wěn)轉株構建病毒法步驟 細胞穩(wěn)轉株構建病毒法步驟：1、確定目標細胞系的相關信息，細胞的培養(yǎng)條件，細胞的增值速度，支原體污染情況；2、預實驗確定MOI值，可通過查閱文獻確定慢病毒在目標細胞系中的MOI值也可參考查閱得到的數(shù)據(jù)，設計梯度實驗，摸索合適MOI；3、預實驗確定篩選**用量，常用的**篩選有：puro、G418、潮霉素等；4、細胞鋪板，將需要的細胞量接種于合適的培養(yǎng)皿中；5、細胞感染，通過接種的細胞量及預實驗得來的發(fā)布時間：2024-07-16 16:27 點擊次數(shù)：198 次
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ELISA試劑盒鑒定方法詳述 鑒別方法：Ⅰ：利用干擾實驗即可辨別elisa試劑盒是否檢測目的抗原，方法如下：1、將針對試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測抗體配置成antibody:antigen≈1:2的混合孵育液。2、37℃孵育15分鐘后，代替原試劑盒中的檢測抗體3、后續(xù)操作按照試劑盒說明書進行，加檢測抗體、酶復合物和底物4、實驗完畢后，檢測其標準曲線，如果標準曲線良好則說明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配，試劑盒檢發(fā)布時間：2024-07-10 14:29 點擊次數(shù)：264 次
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ELISA實驗顯色淡結果分析 ELISA（酶聯(lián)**吸附試驗）是一種用于檢測抗原或抗體濃度的**學試驗。如果ELISA實驗的顯色淡或靈敏度低，可能有多種原因。ELISA實驗顯色淡的原因及解決方案： 原因一：試劑盒在運輸途中時間太長，溫度太高。 解決方案：盡量縮短運輸時間，夏季應放冰塊降溫。 原因二：試劑盒未充分平衡。 解決方案：試劑盒從2～8℃冰箱取出后打開盒蓋，于室溫平衡至少20分鐘，確保所有試劑已平衡至室溫（約25℃發(fā)布時間：2024-06-24 16:00 點擊次數(shù)：244 次
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血清的保存注意事項 血清的保存注意事項：1、需要長期保存的血清必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月.由于血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂.2、熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍的血清.加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活.除非必須,一般不建議作此熱處理,發(fā)布時間：2024-06-17 11:10 點擊次數(shù)：477 次