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pET-N-GST-PreScission
產(chǎn)品編號(hào)
產(chǎn)品名稱
產(chǎn)品包裝
產(chǎn)品價(jià)格
XY2916
1μg
888.00元
pET-N-GST-PreScission是一種用于表達(dá)N端含有GST標(biāo)簽(Glutathione S-transferase tag, GST tag)的目的蛋白的原核表達(dá)質(zhì)粒。本質(zhì)粒N端GST標(biāo)簽后含有PreScission酶切位點(diǎn)，可通過(guò)PreScission Protease (P2302/P2303)切除N端的GST標(biāo)簽。 本質(zhì)粒為卡那霉素抗性。 本質(zhì)粒含有T7啟動(dòng)子/lac操縱子，可以在異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的誘導(dǎo)下高效啟動(dòng)目的蛋白表達(dá)。在多克隆位點(diǎn)的前面有一個(gè)GST標(biāo)簽的編碼序列。因此在多克隆位點(diǎn)根據(jù)讀碼框插入目的基因就可以表達(dá)N端含有GST標(biāo)簽的目的蛋白。 本載體在N端GST標(biāo)簽與多克隆位點(diǎn)之間含有PreScission蛋白酶識(shí)別的八肽序列LEVLFQGP，對(duì)應(yīng)的核酸序列為 CTGGAAGTTCTGTTCCAGGGGCCC，因此在目的蛋白純化后可以利用PreScission Protease切除N端的GST標(biāo)簽。PreScission 蛋白酶酶切發(fā)生在八肽序列的Q和G之間，因此在酶切去除GST標(biāo)簽的時(shí)候目的蛋白的N端留下兩個(gè)額外的氨基酸殘基GP。 通?？梢圆捎萌?span>BeyoGold
Feature Nucleotide
Position
f1 origin
12-467
Kanamycin resistance ORF
563-1645
PBR 322 origin
2084
LacI coding sequence
3518-4597
T7 promoter
4988-5004
GST tag coding sequence
5076-5732
PreScission recognition site sequence
5733-5756
Multiple cloning site(BamHI-XhoI)
5757-5804
T7 Terminator
5872-5918
pET-N-GST-PreScission質(zhì)粒(5943bp)的圖譜如下：
pET-N-GST-PreScission的多克隆位點(diǎn)的詳細(xì)圖譜如下：
XbaI
rbs
NdeI
5026
AATTCCCCTC
TAGAAATAAT
TTTGTTTAAC
TTTAAG
AAGG
AG
ATATACAT
TTAAGGGGAG
ATCTTTATTA
AAACAAATTG
AAATTC
TTCC
TC
TATATGTA
GST tag
5076
ATGATGTCCC
CTATACTAGG
TTATTGGAAA
ATTAAGGGCC
TTGTGCAACC
TACTACAGGG
GATATGATCC
AATAACCTTT
TAATTCCCGG
AACACGTTGG
5126
CACTCGACTT
CTTTTGGAAT
ATCTTGAAGA
AAAATATGAA
GAGCATTTGT
GTGAGCTGAA
GAAAACCTTA
TAGAACTTCT
TTTTATACTT
CTCGTAAACA
5176
ATGAGCGCGA
TGAAGGTGAT
AAATGGCGAA
ACAAAAAGTT
TGAATTGGGT
TACTCGCGCT
ACTTCCACTA
TTTACCGCTT
TGTTTTTCAA
ACTTAACCCA
5226
TTGGAGTTTC
CCAATCTTCC
TTATTATATT
GATGGTGATG
TTAAATTAAC
AACCTCAAAG
GGTTAGAAGG
AATAATATAA
CTACCACTAC
AATTTAATTG
5276
ACAGTCTATG
GCCATCATAC
GTTATATAGC
TGACAAGCAC
AACATGTTGG
TGTCAGATAC
CGGTAGTATG
CAATATATCG
ACTGTTCGTG
TTGTACAACC
5326
GTGGTTGTCC
AAAAGAGCGT
GCAGAGATTT
CAATGCTTGA
AGGAGCGGTT
CACCAACAGG
TTTTCTCGCA
CGTCTCTAAA
GTTACGAACT
TCCTCGCCAA
5376
TTGGATATTA
GATACGGTGT
TTCGAGAATT
GCATATAGTA
AAGACTTTGA
AACCTATAAT
CTATGCCACA
AAGCTCTTAA
CGTATATCAT
TTCTGAAACT
5426
AACTCTCAAA
GTTGATTTTC
TTAGCAAGCT
ACCTGAAATG
CTGAAAATGT
TTGAGAGTTT
CAACTAAAAG
AATCGTTCGA
TGGACTTTAC
GACTTTTACA
5476
TCGAAGATCG
TTTATGTCAT
AAAACATATT
TAAATGGTGA
TCATGTAACC
AGCTTCTAGC
AAATACAGTA
TTTTGTATAA
ATTTACCACT
AGTACATTGG
5526
CATCCTGACT
TCATGTTGTA
TGACGCTCTT
GATGTTGTTT
TATACATGGA
GTAGGACTGA
AGTACAACAT
ACTGCGAGAA
CTACAACAAA
ATATGTACCT
5576
CCCAATGTGC
CTGGATGCGT
TCCCAAAATT
AGTTTGTTTT
AAAAAACGTA
GGGTTACACG
GACCTACGCA
AGGGTTTTAA
TCAAACAAAA
TTTTTTGCAT
5626
TTGAAGCTAT
CCCACAAATT
GATAAGTACT
TGAAATCCAG
CAAGTATATA
AACTTCGATA
GGGTGTTTAA
CTATTCATGA
ACTTTAGGTC
GTTCATATAT
5676
GCATGGCCTT
TGCAGGGCTG
GCAAGCCACG
TTTGGTGGTG
GCGACCATCC
CGTACCGGAA
ACGTCCCGAC
CGTTCGGTGC
AAACCACCAC
CGCTGGTAGG
PreScission
PstI
↓
BamHI HindIII
EcoRI
5726
TCCAAAA
CTG
GAAGTTCTGT
TCCAGGGGCC
CGGATCCAAG
CTTCTGCAGG
AGGTTTT
GAC
CTTCAAGACA
AGGTCCCCGG
GCCTAGGTTC
GAAGACGTCC
EcoRV SalI BglII XhoI
5776
AATTCGATAT
CGTCGACAGA
TCTCTCGAGT
GAGATCCGGC
TGCTAACAAA
TTAAGCTATA
GCAGCTGTCT
AGAGAGCTCA
CTCTAGGCCG
ACGATTGTTT
pET-N-GST-PreScission中沒(méi)有的酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that do not cut pET-N-GST-PreScission)包括：
AatII
Acc65I
AflII
AgeI
AhdI
AleI
AscI
AvrII
BaeI
BbvCI
BfuAI
BmgBI
BmtI
BsaI
BseRI
BsiWI
BspMI
BsrGI
Bsu36I
CspCI
EagI
Eco53kI
FseI
KpnI
MfeI
NcoI
NheI
NotI
PacI
PmeI
PmlI
PspXI
RsrII
SacI
SacII
SbfI
SexAI
SfiI
SnaBI
SpeI
SrfI
StuI
ZraI
pET-N-GST-PreScission中的單酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that cut pET-N-GST-PreScission once)包括：
DraIII
CAC,NNN`GTG
242
MluI
A`CGCG,T
4242
PsiI
TTA|TAA
370
BstAPI
GCAN,NNN`NTGC
4563
PvuI
CG,AT`CG
943
SphI
G,CATG`C
4771
AsiSI
GCG,AT`CGC
SgrAI
CR`CCGG,YG
4923
SmaI
CCC|GGG
1067
T`CTAG,A
5034
XmaI
C`CCGG,G
CA`TA,TG
5074
TspMI
1069
MscI
TGG|CCA
5286
NruI
TCG|CGA
1286
BstBI
TT`CG,AA
AcuI
CTGAAG(N)14,NN`
1597
SwaI
ATTT|AAAT
5506
AlwNI
CAG,NNN`CTG
1729
ScaI
AGT|ACT
5652
BssSI
C`ACGA,G
1968
BamHI
G`GATC,C
5757
BstZ17I
GTA|TAC
2374
HindIII
A`AGCT,T
5763
Tth111I
GACN`N,NGTC
2399
C,TGCA`G
5769
PflFI
G`AATT,C
5775
PpuMI
RG`GWC,CY
3136
EcoRV
GAT|ATC
5783
FspI
TGC|GCA
3164
SalI
G`TCGA,C
5787
BglI
GCCN,NNN`NGGC
3182
BglII
A`GATC,T
5793
PshAI
GACNN|NNGTC
3401
XhoI
C`TCGA,G
5799
HpaI
GTT|AAC
3740
PaeR7I
BssHII
G`CGCG,C
3831
BlpI
GC`TNA,GC
5860
NmeAIII
GCCGAG(N)19,NN`
4041
StyI
C`CWWG,G
5882
BstEII
G`GTNAC,C
4060
pET-N-GST-PreScission質(zhì)粒中推薦使用的測(cè)序引物序列如下： pET-F primer (5619-5638): 5′- AAACGTATTGAAGCTATCCC-3′ pET-R primer (5857-5876): 5′-TGCTAGTTATTGCTCAGCGG-3′ pET-N-GST-PreScission的全序列信息：XY2916 pET-N-GST-PreScission.txt。 包裝清單：
包裝
—
說(shuō)明書(shū)
1份
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