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- 產(chǎn)品名稱:質(zhì)粒中量抽提試劑盒(通用型)
- 產(chǎn)品型號:
- 產(chǎn)品展商:XYbscience
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簡單介紹
質(zhì)粒中量抽提試劑盒(通用型) (Plasmid Midi Preparation Kit for All Purpose, Plasmid Midiprep Kit for All
Prupose)是一種用于從大腸桿菌中進(jìn)行中量質(zhì)??焖俪樘岬耐ㄓ眯碗x心柱式試劑盒。質(zhì)粒中量抽提試劑盒(通用型)不僅適用于常用的EndA-菌株DH5α、JM109和XL-1 blue等,也適用于EndA+菌株如JM110、BL21(DE3)、TG1和HB101等,能有效避免EndA+菌株中高豐度核酸酶的污染,并適用于從糖類修飾水平高的野生菌株中提取質(zhì)粒。
產(chǎn)品描述
質(zhì)粒中量抽提試劑盒(通用型)
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產(chǎn)品編號
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產(chǎn)品名稱
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產(chǎn)品包裝
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產(chǎn)品價格
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XY0020
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質(zhì)粒中量抽提試劑盒(通用型)
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50次
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260.00元
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質(zhì)粒中量抽提試劑盒(通用型) (Plasmid Midi Preparation Kit for All Purpose, Plasmid Midiprep
Kit for All
Prupose)是一種用于從大腸桿菌中進(jìn)行中量質(zhì)??焖俪樘岬耐ㄓ眯碗x心柱式試劑盒。
本試劑盒不僅適用于常用的EndA-菌株DH5α、JM109和XL-1 blue等,也適用于EndA+菌株如JM110、BL21(DE3)、TG1和HB101等,能有效避免EndA+菌株中高豐度核酸酶的污染,并適用于從糖類修飾水平高的野生菌株中提取質(zhì)粒。
野生型大腸桿菌中表達(dá)Endonuclease I,能切割并降解雙鏈DNA。編碼Endonuclease I的基因是endA,如果endA突變失活,其基因型會被標(biāo)注為endA1,相應(yīng)的突變菌株被稱為EndA-菌株,而野生型菌株則被稱為EndA+菌株。常見的EndA-和EndA+菌株參見附表1。從EndA+菌株中抽提的質(zhì)粒,微量核酸酶和質(zhì)粒結(jié)合而容易被共純化,導(dǎo)致容易降解,而本試劑盒增加了特殊的洗滌步驟(核酸酶洗滌液溶液PB洗滌),可以有效避免EndA+菌株中抽提獲得的質(zhì)粒容易降解的問題(參考圖1)。
圖1. 使用溶液PB可以使從EndA+菌株JM110中抽提的質(zhì)粒不易降解,而對于EndA-菌株DH5α中抽提的質(zhì)粒沒有影響。使用本試劑盒時,如上圖所示,在使用和不使用溶液PB時的質(zhì)粒得率一致。但對于EndA+菌株JM110,不使用溶液PB時從其中抽提獲得的質(zhì)粒在內(nèi)切酶緩沖液Buffer Y中37℃孵育1小時后會全部降解,而使用溶液PB時同樣孵育1小時就不會降解。對于EndA-菌株DH5α無論是否使用溶液PB,抽提獲得的質(zhì)粒的都很穩(wěn)定。
本試劑盒采用了一種新型的離子交換柱。在特定條件下,使質(zhì)粒能在離心過柱的瞬間,結(jié)合到質(zhì)粒純化柱上,在一定條件下又能將質(zhì)粒充分洗脫,從而實現(xiàn)質(zhì)粒的快速純化。無需酚氯仿抽提,無需酒精沉淀,12個樣品只需不足60分鐘即可完成。
無需高速冷凍離心機(jī),只需普通臺式高速離心機(jī)。所有操作均可在1.5ml離心管中完成。
每個質(zhì)粒純化柱可以結(jié)合的質(zhì)粒量的上限約為50微克。每個純化柱可用于抽提5-10毫升用LB培養(yǎng)過夜的大腸桿菌。抽提所得質(zhì)粒的OD260和OD280比值一般在1.80左右。抽提獲得的質(zhì)粒量會受質(zhì)??截悢?shù)等因素影響。抽提獲得的質(zhì)粒DNA的OD260和OD280比值也會因菌種不同等原因而略有波動。
本試劑盒抽提所得到的質(zhì)??芍苯佑糜谵D(zhuǎn)染細(xì)胞,DNA測序,PCR,基于PCR的突變,體外轉(zhuǎn)錄,轉(zhuǎn)化**,內(nèi)切酶消化等。本試劑盒在使用溶液PB的情況下,獲得的質(zhì)粒的純度更高,內(nèi)**含量低,總體上轉(zhuǎn)染細(xì)胞的效率會顯著提高。
包裝清單:
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產(chǎn)品編號
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產(chǎn)品名稱
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包裝
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XY0020-1
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溶液I (懸浮液)
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45ml
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XY0020-2
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溶液II (裂解液)
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45ml
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XY0020-3
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溶液III (結(jié)合液)
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60ml
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XY0020-4
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溶液PB (核酸酶洗滌液)
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30ml
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XY0020-5
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溶液IV (洗滌液)
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18ml (**次使用前加入27ml無水乙醇)
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XY0020-6
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溶液V (洗脫液)
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8ml
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XY0020-7
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RNase A (100mg/ml)
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45μl
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XY0020-8
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中抽質(zhì)粒純化柱及廢液收集管
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50套
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說明書
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1份
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保存條件:
室溫保存,一年有效。
注意事項:
**次使用前把試劑盒提供的RNase A全部加到溶液I (懸浮??)中,混勻,并在瓶上做好標(biāo)記。加入RNase A后4℃存放。
**次使用前在溶液IV (洗滌液)中加入27ml無水乙醇,混勻,并在瓶上做好標(biāo)記。
溫度較低時,溶液II和溶液III可能會有沉淀產(chǎn)生。使用前必須檢查一遍。如有沉淀,37℃水浴加熱溶解,混勻后使用。溶液II請勿過分劇烈混勻,否則會產(chǎn)生大量氣泡。
溶液II使用完后,一定要蓋緊瓶蓋,防止被空氣中二氧化碳酸化。
溶液II有強(qiáng)堿性,溶液II、溶液III、溶液PB和溶液IV對人體有刺激性,操作時請小心,并注意適當(dāng)防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
本試劑盒所有操作均在室溫進(jìn)行,操作時無需冰浴。所有離心也均在室溫進(jìn)行。
廢液收集管在一次抽提中需多次使用,切勿中途丟棄。
本產(chǎn)品**于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或**,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的**和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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