pCMV-N-His
產(chǎn)品編號(hào)
產(chǎn)品名稱
產(chǎn)品包裝
產(chǎn)品價(jià)格
XY2737
1μg
888.00元
pCMV-N-His是自行研發(fā)的用于在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)N端和His tag(His標(biāo)簽)融合的目的蛋白的表達(dá)質(zhì)粒。含有CMV啟動(dòng)子可以高效啟動(dòng)目的蛋白在細(xì)胞中的表達(dá)；在多克隆位點(diǎn)的5'端含有一個(gè)可以編碼His標(biāo)簽的序列，因此可以表達(dá)出含有His標(biāo)簽的融合蛋白，可以方便地使用抗His的抗體來(lái)識(shí)別目的蛋白，有利于目的蛋白檢測(cè)和分離純化。質(zhì)粒為卡那霉素抗性。轉(zhuǎn)染細(xì)胞后，可使用G418篩選穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株。 pCMV-N-His質(zhì)粒的主要信息如下：
Feature Nucleotide
Position
CMV promoter
1-602
T3 promoter and T3 primer binding site
620-639
His tag
679-696
multiple cloning site
699-772
T7 promoter and T7 primer binding site
815-836
SV40 polyA signal
847-1230
f1 origin of ss-DNA replication
1368-1674
bla promoter
1699-1823
SV40 promoter
1843-2181
neomycin/kanamycin resistance ORF
2216-3007
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal
3008-3466
pUC origin
3595-4262
pCMV-N-His質(zhì)粒的圖譜如下：
pCMV-N-His的多克隆位點(diǎn)的詳細(xì)圖譜如下：
His tag XmaI
SacI M H H H H H H SmaI
651
GAGCTCCACC
GCGGTGGCGG
CCGCC
ATG
CA
TCATCACCAT
CACCAT
AGCC
CTCGAGGTGG
CGCCACCGCC
GGCGG
TAC
GT
AGTAGTGGTA
GTGGTA
TCGG
PstI
BamHI HindIII EcoRI EcoRV SalI BglII XhoI
701
CGGGCGGATC
CAAGCTTCTG
CAGGAATTCG
ATATCGTCGA
CAGATCTCTC
GCCCGCCTAG
GTTCGAAGAC
GTCCTTAAGC
TATAGCAGCT
GTCTAGAGAG
XbaI ApaI KpnI KpnI
751
GAGTCTAGAA
CTAGTGGGCC
CGGTACCTTA
ATTAATTAAG
GTACCAGGTA
CTCAGATCTT
GATCACCCGG
GCCATGGAAT
TAATTAATTC
CATGGTCCAT
pCMV-N-His中沒有的酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that do not cut pCMV-N-His)包括：
Afl II
Age I
Ahd I
Asc I
Bbs I
Bbv II
Blp I
Bsg I
BsiW I
BsmB I
BspM II
BsrG I
BssH II
Bst1107 I
BstE II
Ear I
Eco47 III
Eco72 I
EcoN I
Esp I
Fse I
Nru I
PflM I
Pme I
Pml I
PpuM I
Psp1406 I
Sap I
Sca I
Spl I
pCMV-N-His中的單酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that cut pCMV-N-His once)包括：
Nde I
CA`TA,TG
241
Pvu I
CG,AT`CG
849
SnaB I
TAC|GTA
347
Bcl I
T`GATC,A
1003
Nhe I
G`CTAG,C
598
Mun I
C`AATT,G
1096
Sac I
G,AGCT`C
656
Hpa I
GTT|AAC
1109
Sac II
CC,GC`GG
663
Mlu I
A`CGCG,T
1232
BstX I
CCAN,NNNN`NTGG
664
Dra III
CAC,NNN`GTG
1462
Not I
GC`GGCC,GC
669
Sfi I
GGCCN,NNN`NGGCC
2121
PspA I
C`CCGG,G
700
BseR I
GAGGAG 16/14
2164
Xma I
Stu I
AGG|CCT
2167
Srf I
GCCC|GGGC
702
Cla I
AT`CG,AT
2186
Sma I
CCC|GGG
Kas I
G`GCGC,C
2345
BamH I
G`GATC,C
707
Nar I
GG`CG,CC
2346
Hind III
A`AGCT,T
713
Ehe I
GGC|GCC
2347
Pst I
C,TGCA`G
723
Bbe I
G,GCGC`C
2349
EcoR I
G`AATT,C
725
Msc I
TGG|CCA
2428
EcoR V
GAT|ATC
733
Tth111 I
GACN`N,NGTC
2464
Sal I
G`TCGA,C
737
BsrD I
GCAATG, 8
2579
Acc I
GT`MK,AC
738
Bsp1286 I
G,DGCH`C
2649
Bgl II
A`GATC,T
743
Rsr II
CG`GWC,CG
2862
PaeR7 I
C`TCGA,G
749
Xho I
BsiC I
TT`CG,AA
3028
Xba I
T`CTAG,A
755
BstB I
Spe I
A`CTAG,T
761
Bsa I
GGTCTC 7/11
3335
Bsp120 I
G`GGCC,C
767
HgiE II
ACCNNNNNNGGT-1/13
3675
Apa I
G,GGCC`C
771
ApaL I
G`TGCA,C
3950
pCMV-N-His質(zhì)粒中對(duì)于插入片段進(jìn)行測(cè)序時(shí)，推薦使用的正向測(cè)序引物T3和反向測(cè)序引物T7的序列如下： T3 primer(620-639): 5′AATTAACCCTCACTAAAGGG 3′ T7 primer(815-836): 5′GTAATACGACTCACTATAGGGC 3′ pCMV-N-His的全序列信息：XY2737 pCMV-N-His-seq.txt 包裝清單：
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