高效液相色譜儀測定豬尿中鹽酸克倫特羅含量
鹽酸克倫特羅俗稱“瘦肉精”,生豬被飼喂添加了鹽酸克倫特羅的飼料,其屎液可檢出鹽酸克倫特羅。采用高效液相色譜儀測定。按本處理方法進行試驗的結果良好。
1、儀器與試劑
高效液相色譜儀,配紫外檢測器。
超聲波水浴,
離心機:4000r/min,
恒溫水浴箱 。
乙醇,乙醚,0.01mol/L 磷酸二氫鈉溶液;
2mol/L 氫氧化鈉溶液:20g氫氧化鈉 (優(yōu)級純 )溶于250ml水中;
無水硫酸鈉。
所有試劑除了注明外,均為分析純。
鹽酸克倫特羅標準溶液:儲備液,500ug/ml:5mg 鹽酸克倫特羅溶于超純水中,加甲醇 lmL,然后用超純水定容10ml;
工作液:將儲備標準液用超純水經(jīng)兩步稀釋為2.0ug/ml的工作標準液 。
2、樣品處理
吸取豬屎10m于125ml分液漏斗中,用2mol/mL NaOH溶液調 pH 值至 11~12(約8滴),分別用30、25ml乙醚萃取2次,每次振搖2min,待分層后把乙醚層 (上層 )通過無水硫酸鈉(2~3s)的漏斗放入100ml蒸發(fā)皿中。然后用少許己醚清洗分液漏斗并淋洗無水硫酸鈉,淋洗液放入蒸發(fā)皿中將蒸發(fā)皿置水搭上(約60℃)揮發(fā)蒸干后,再用60%乙醇溶液分3次將殘留物洗入定容瓶中并定容2ml,然后經(jīng)0.5um雙層濾膜離心過濾后,供高效液相色譜儀測定 。
3、色譜條件
色譜柱:C18,200mm ×4.6mm,
檢測波長:243nm;
柱溫:28℃ ;
進樣量:20ul;
流動相:0.01m ol/L,磷酸二氫鈉+ 甲醇 = 67 + 33 ;
流速 :0.8ml/min。
按上述色譜條件,采用外標法 ,以保 留時間定性,并以鹽酸克倫特羅的特征紫外吸收光譜對照樣品的掃描光譜進行確認,然后根據(jù)樣品峰面積與標準峰面積比較計算鹽酸克倫特羅含量 。
高效液相色譜儀測定豬尿中鹽酸克倫特羅含量
高效液相色譜儀測定豬尿中鹽酸克倫特羅含量
高效液相色譜儀測定豬尿中鹽酸克倫特羅含量
高效液相色譜儀測定豬尿中鹽酸克倫特羅含量