海洋微藻的培養(yǎng)、觀察與計數(shù)

一、實(shí)驗?zāi)康模?

1、通過實(shí)驗了解藻類生長的基本條件和方法，掌握海洋微藻的基本培養(yǎng)方法；

2、顯微鏡下觀察并識別幾種常見海洋微藻；

3、了解血球計數(shù)板的計數(shù)原理，掌握血球計數(shù)板的計數(shù)方法。

二、實(shí)驗材料：亞心形扁藻、小球藻、叉鞭金藻；

三、主要實(shí)驗儀器和器皿

 １．顯微鏡，血球計數(shù)板，計數(shù)器

 ２．培養(yǎng)瓶（三角瓶），量筒；

四、試劑

 １．培養(yǎng)液： f/2培養(yǎng)液  

 ２．碘固定液

五、培養(yǎng)條件：

     光照強(qiáng)度：1200Lux、溫度：20-23℃、鹽度：3%、光照時間：黑暗/光照=12/12

六、方法和步驟

1、前期準(zhǔn)備：各種器皿的**、培養(yǎng)液的配制、準(zhǔn)備并培養(yǎng)3種不同的海洋微藻：亞心形扁藻、小球藻、叉鞭金藻；

2、接種：將不同的實(shí)驗藻種分別接種到盛有培養(yǎng)液的不同三角瓶(100ml)中,接種的藻容量和新培養(yǎng)液之間的比例為1：2～1：3。培養(yǎng)量與總?cè)萘康谋刃∮?/3；

3、培養(yǎng) ：按上述培養(yǎng)條件進(jìn)行培養(yǎng)，在培養(yǎng)的過程中，每天搖瓶3次，使藻類充分見接觸氧氣和光照；

4、換代：5-7天換代1次，換代濃度同上；

5、固定：將藻液搖勻，用小三角瓶分別倒取一定量(20-30ml)的上述3種藻液加入幾滴碘液，搖勻殺死細(xì)胞；

6、取樣：搖勻后，用吸管吸取上述不同的藻液分別滴到蓋有蓋玻片的學(xué)球計數(shù)板的邊緣，使藻液慢慢進(jìn)入蓋有蓋玻片的區(qū)域，避免蓋玻片浮起，用吸水紙輕輕吸走多余的藻液，每種藻液取樣2次；

7、觀察計數(shù)：顯微鏡下觀察不同的藻種并分別計數(shù)。

1）血球計數(shù)板計數(shù)原理

血球計數(shù)板是一塊特制的載玻片，板的中部一“H” 型的凹槽，橫槽兩邊的平臺上各有一個有九個大方格的方格網(wǎng)。每個大格：邊長為１ｍｍ，深為0.1mm，容積為0.1mm3(10-4ml)。中間大方格為計數(shù)室以計數(shù)室為中心，對角線兩端各有一個有16個中格組成的大格。