導言

色譜分析中色譜柱的選擇是方法開發(fā)過程中重要的一步，對于分離效率具有重大影響。一旦選錯了色譜柱，將會無謂地延長和消耗方法開發(fā)和優(yōu)化的時間和精力。許多實驗室常常限制色譜柱的選用，常會將其方法建立在一種主流的色譜柱化學(例如慣用的端基封口的C18 色譜柱)上。然而，隨著色譜柱技術的發(fā)展，現(xiàn)在有了差異性不斷增加的基質(zhì)顆粒和配體化學可供方法開發(fā)時篩查選擇性和改善分離之用。

本文通過眾多不同的色譜柱在選擇性上的變化的實例，概述選擇*優(yōu)色譜柱固定相的重要性。

跨越眾多色譜柱化學的樣品篩查使用配有色譜柱管理器的ACQUITY UPLC H-Class 系統(tǒng)完成?；衔锵疵摯涡虻淖兓ㄟ^UV和MS檢測器檢測。正確選擇色譜柱對于快速建立有效的方法和*大限度地降低進一步方法開發(fā)和優(yōu)化的需**非常重要的。

儀器和耗材

Ziprasidone(齊拉西酮)堿降解樣品：將氫氧化鈉加入到Ziprasidone 標準溶液中，將反應液加熱2 小時，用酸中和，轉(zhuǎn)移至樣品瓶中供進樣用。

LC 條件

ACQUITY UPLC H-Class，配色譜柱管理器，PDA 和SQD 檢測器

色譜柱： ACQUITY UPLC，2.1×50mm，1.7-1.8μm

BEH C18 P/N 186002350

BEH Shield RP18 P/N 186002853

CSHTM C18 P/N 186005296

HSS Cyano P/N 186005986

HSS PFP P/N 186005965

HSS T3 P/N 186003538

結(jié)果/ 討論

Ziprasidone(齊拉西酮)堿降解樣品在一系列不同的色譜柱化學上的分析表明基質(zhì)顆粒和鍵合相化學對分離的影響(參見圖1)。

圖1. Ziprasidone(齊拉西酮)堿降解樣品在各種色譜柱上的選擇性差異。標記峰的質(zhì)量(M/Z)表明： (1) 445(雜質(zhì))，(2) 413(Ziprasidone,API)，(3) 417(雜質(zhì))

總之，Ziprasidone(齊拉西酮)堿降解樣品表明在各種色譜柱顆粒和配體上的非常不同的選擇性。若初始選擇BEH C18 或HSS T3 則需要增加方法優(yōu)化步驟以便完全分離各個組份。相反，通過快速的寬范圍的色譜柱篩查，選擇早已表明良好分離的色譜柱則不必去做進一步方法開發(fā)工作。此例中，CSHC18 由于其尖銳的峰形和雜質(zhì)與主峰之間優(yōu)良的分離度而被選中。

結(jié)論

通盤考慮適宜的顆?；|(zhì)和鍵合相化學選擇色譜柱對于快速開發(fā)有效的分離方法是一個重要工具。假如在開發(fā)新方法時一開始就沒選對色譜柱將會導致昂貴的和不必要的后續(xù)優(yōu)化試驗。隨著色譜柱技術的進展，有日益增多的不同基質(zhì)顆粒和配體的色譜柱可供選擇，用以優(yōu)化色譜性能。對于任何基質(zhì)中的組份分離，通過寬范圍的色譜柱化學篩查樣品的做法值得推崇。

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