**組化組織固定、脫水和包埋的方法改進

**組織化學將傳統(tǒng)形態(tài)學與傳統(tǒng)**學結合起來，既可以在光鏡下或電鏡下觀察組織或細胞的形態(tài)，實現(xiàn)組織或細胞定位；同時又發(fā)揮了**學中對特異抗原抗體定性定量的作用。**組織化學技術是一多步驟、多環(huán)節(jié)、多因素影響的實驗技術，有很多干擾因素都可能影響終的檢測結果，并造成錯誤的判斷。本文就**組化中組織的固定、脫水、包埋過程中的注意事項進行可控因素的分析和總結。

組織固定的目的之一是大限度地保存組織細胞的抗原性，也是影響**組化結果的關鍵因素。因此，及時、恰當、完好的固定是制作好的組織切片的基礎。

為使組織得到充分固定我們需要做到：

①固定的組織新鮮：組織取材后應該立即固定，應盡快進入固定液固定或入液氮冷凍保存。特別是在夏季，如果保標本不及時固定，組織容易收縮變形，并發(fā)生自溶現(xiàn)象。

②適宜的固定液：選10%中性緩沖甲醛固定液(pH7.4左右)，固定液為組織塊體積的4～10倍。較好的固定液應該具有強滲透力，能迅速滲透入組織內部；其次不會使組織發(fā)生過度收縮變形，并能使組織內易觀察的成分得以凝固為不溶性物質；還要使組織達到硬度，有較好的折光率。

③組織塊的體積：組織塊的體積宜小而薄，一般用于**組化的組織大小宜為1.0cm×1.0cm×0.2cm。組織太大，內部得不到充分固定，導致組織結構破壞，給切片帶來的困難，還增加非特異性染色，同時浪費試劑。固定液的量 固定組織時，有足夠的固定液。一般為組織塊體積的10～15倍。固定用的容器足夠大，組織材料不要太多，避免組織中的水分滲出影響固定液的濃度。

④恰當?shù)墓潭〞r間：固定的時間要視組織塊的大小及固定液的種類、濃度、溫度而定。組織塊越大，固定時間越長；反之，組織塊越小，固定的時間越短。固定液的穿透力與濃度呈正比取材后30min內固定，小標本固定時間為4～6h，大標本為12～16h，固定總時間不超過24h為宜。

⑤固定后要充分沖洗，以減少染色時的人工假象。組織固定后，因固定液滲透到組織中，所以沖洗，除去殘留的固定液，否則會影響下一步的脫水。特別對于長時間固定的標本應用流水沖洗，盡可能減少色素沉著。對于混合固定液固定的組織、更要及時沖洗，否則將影響**組織化學切片的質量，產生人工假象。

脫水及包埋：定期更換脫水劑和透明劑可有效防止組織脫水不及透明不夠，并有利于下一步的切片染色觀察，防止**組化時出現(xiàn)的假陽性或假陰性以及脫片現(xiàn)象。包埋石蠟對切片質量也有直接的影響，需選用專用的切片石蠟以切片質量的穩(wěn)定。