裸鼠肝癌模型構(gòu)建:取對數(shù)生長期細胞消化后離心,定量的PBS緩沖液及培養(yǎng)基將細胞吹打成3個不同細胞濃度組。將裸小鼠分為6組,每組10只,將以PBS緩沖液混懸的細胞和以完全培養(yǎng)基混懸的細胞分別接種在小鼠左后肢腋下及右后肢腋下,以每個接種部位0.2ml皮下注射,注射完畢緩緩拔出注射器,酒精棉球按壓穿刺部位10s左右以防細胞混懸液流出。
裸鼠肝癌模型注意:接種前進行空白混懸劑皮下注射,觀察空白混懸劑PBS緩沖液及培養(yǎng)基對裸鼠的影響。每隔一日用游標卡尺測量腫瘤的長徑、短徑,計算腫瘤體積,繪制腫瘤生長曲線。兩周后,頸椎脫臼處死荷瘤小鼠,剪開腫瘤生長處的皮膚,取出腫瘤稱重。
方法比較:裸鼠肝癌模型的建立中,接種的條件尤為重要。為了給癌細胞穩(wěn)定的生長環(huán)境和充足的生長空間,一般選擇在動物的皮下接種細胞或腫瘤組織。直接接種腫瘤組織的辦法具有腫瘤組織生長快速的、大小均勻的特點,但操作復(fù)雜,需要對動物進行麻醉、切口、縫合等。對于裸鼠來說,這無一不增加了感染的風險,影響術(shù)后生存質(zhì)量。腹水癌細胞皮下注射的方法也需要先對細胞進行在腹水中的增殖、分離和穩(wěn)定傳代,增加了工作量。相比較這兩種方法,癌細胞直接接種的方法簡單、快速、有效、風險低。