實(shí)驗(yàn)室玻璃器皿的洗滌、包扎、干燥及** 為確保實(shí)驗(yàn)順利地進(jìn)行,要求把實(shí)驗(yàn)所用的玻璃器皿清洗干凈并干燥,微生物實(shí)驗(yàn)還要 進(jìn)行**。為保持**后和無菌狀態(tài),需要對培養(yǎng)皿,吸管等進(jìn)行包扎,對試管和三角瓶等加塞棉塞。
這些工作看起來很普通簡單,但如操作不當(dāng)或不安操作規(guī)定去做,則會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,甚至?xí)?dǎo)致試驗(yàn)的失敗。
1、玻璃器皿的清洗
①不能用有腐蝕作用的化學(xué)試劑,也不能使用比玻璃硬度大的物品來擦拭玻璃器皿;新的玻 璃器皿應(yīng)用 2%的鹽酸溶液浸泡數(shù)小時,用水充分洗干凈。
②用過的器皿應(yīng)立即洗滌。
③強(qiáng)酸,強(qiáng)堿,瓊脂等能腐蝕,阻塞管道的物質(zhì)不能直接倒在洗滌槽內(nèi),必須到在廢物缸內(nèi)。 一般的器皿都可用去污粉,肥皂或配成 5%的熱肥皂水來清洗。油脂很重的器皿應(yīng)先將油脂
擦去。沾有煤膏,焦油及樹脂一類物質(zhì),可用濃硫酸或 40%氫氧化鈉或用洗液浸泡;沾有蠟或油漆物,可加熱使之熔融后揩去,或用有機(jī)溶劑(苯,二甲苯,汽油,丙酮,松節(jié)油等) 揩去。
④洗滌后的器皿應(yīng)達(dá)到玻璃壁能被水均勻濕潤而無條紋和水珠。
2、器皿包扎
為了**后仍保持無菌狀態(tài),各種玻璃器皿均需包扎。
3、干燥
做實(shí)驗(yàn)應(yīng)經(jīng)常要用到的儀器應(yīng)在每次實(shí)驗(yàn)完畢后洗凈干燥備用。用于不同實(shí)驗(yàn)對干燥有不同的要求,一般定量分析用的燒杯、錐形瓶等儀器細(xì)凈即可使用,而用于精密分析的儀器很多要**干燥的,有的要求無水痕,有的要求無水。應(yīng)根據(jù)不同要求進(jìn)行干燥儀器。
(1)、烘干
洗凈的儀器控去水分,放在烘箱內(nèi)烘干,烘箱溫度為 105~110℃烘1 小時左右。也可放在紅外燈干燥箱中烘干。此法適用于一般儀器。稱量瓶等在烘干后要放在干燥器中冷卻和保 存。帶實(shí)心玻璃塞的及厚壁儀器烘干時要注意慢慢升溫并且溫度不可過高,以免破裂。量器不可放于烘箱中烘。硬質(zhì)試管可用酒精燈加熱烘干,要從底部烤起,把管口向下,以免水珠倒流把試管炸裂,烘到無水珠后把試管口向上趕凈水氣。
( (2)、熱(冷)風(fēng)吹干 對于急于干燥的儀器或不適于放入烘箱的較大的儀器可用吹干的辦法。通常用少量乙醇、
丙酮(或*后再用乙醚)倒入已控去水分的儀器中搖洗,然后用電吹風(fēng)機(jī)吹,開始用冷風(fēng)吹 1~2 分鐘,當(dāng)大部分溶劑揮發(fā)后吹入熱風(fēng)至完全干燥,再用冷風(fēng)吹去殘余蒸汽,不使其又冷凝在容器內(nèi)。
(3)、晾干
不急等用的儀器,可在蒸餾水沖洗后在無塵處倒置處控去水分,然后自然干燥。可用安 有木釘?shù)募茏踊驇в型笟饪椎牟AЧ穹胖脙x器。
3 ** **是指殺死或消滅一定環(huán)境中的所有微生物,**的方法分物理和化學(xué)**法兩大類。
本實(shí)驗(yàn)主要介紹物理方法的一種,即加熱**。加熱**包括濕熱和干熱**兩種。通過加 熱使菌體內(nèi)蛋白質(zhì)凝固變性,從而達(dá)到**目的。蛋白質(zhì)的凝固變性與其自身含水量有關(guān), 含水量越高,其凝固所需要的溫度越低。在同一溫度下,濕熱的**效力比干熱大,因為在濕熱情況下,菌體吸收水分,使蛋白質(zhì)易于凝固;同時濕熱的穿透力強(qiáng),可增加**效力。
(1)、濕熱**
①煮沸**法: 注射器和解剖器械等均可采用此法。先將注射器等用紗布包好,然后放進(jìn)煮沸**器內(nèi)加水煮沸。對于**的營養(yǎng)體煮沸約 15~30min,對于芽孢則需煮沸約 1~2h。
②高壓蒸汽**法: 高壓蒸汽**用途廣,效率高,是微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中*常用的**方法。 這種滅菌方法是基于水的沸點(diǎn)隨著蒸汽壓力的升高而升高的原理設(shè)計(jì)的。當(dāng)蒸汽壓力達(dá)到 1.05kg/cm2 時,水蒸氣的溫度升高到 121℃,經(jīng) 15~30min,可全部殺死鍋內(nèi)物品上的各種 微生物和它們的孢子或芽孢。一般培養(yǎng)基、玻璃器皿以及傳染性標(biāo)本和工作服等都可應(yīng)用此法**。
(2)、干熱** 通過使用干熱空氣殺滅微生物的方法叫干熱**。一般是把待**的物品包裝就緒后,放
入電烘箱中烘烤,即加熱至 160~170℃維持 1~2h。干熱**法常用于空玻璃器皿、金屬器 具的**。凡帶有膠皮的物品,液體及固體培養(yǎng)基等都不能用此法**。
三、實(shí)驗(yàn)儀器藥品
1、培養(yǎng)皿,吸管,試管,三角瓶,試管刷,棉花,報紙、包扎繩、去污粉等。
2、電熱鼓風(fēng)干燥箱、立式高壓蒸汽**鍋。
四、實(shí)驗(yàn)步驟與注意事項(xiàng)
1、洗滌
①用試管刷蘸取少量去污粉反復(fù)刷洗器皿 2~3 次。
②用自來水沖洗 2~3 次。
③用少量去離子水蕩洗 1~2 次,控干水分。
2、器皿包扎
①培養(yǎng)皿:洗凈的培養(yǎng)皿烘干后每 5 套(或根據(jù)需要而定) 疊在一起,用牢固的紙卷成一筒,或裝入特制的鐵桶中,然后 進(jìn)行**。
②吸管:洗凈,烘干后的吸管,在吸口的一頭塞入少許脫脂棉
花,以防在使用時造成污染.塞入的棉花量要適宜,多余的棉 花可用酒精燈火焰燒掉。每支吸管用一條寬約 4~5cm 的紙條,以 30~50℃的角度螺旋形卷起來,吸管的**在頭部,另 一端用剩余的紙條打成一結(jié),以防散開,標(biāo)上容量,若干支吸 管包扎成一束進(jìn)行**,使用時,從吸管中間擰斷紙條,抽 出吸管。
③試管和三角瓶:試管和三角瓶都需要做合適的棉塞,棉塞可起過濾作用,避免空氣中的微生 物進(jìn)入容器.制作棉塞時,要求棉花緊貼玻璃壁,沒有皺紋和縫隙,松緊適宜.過緊易擠破管口和 不易塞入;過松易掉落和污染.棉塞的長度不小于管口直徑的 2 倍,約 2/3 塞進(jìn)管口。若干支試 管用繩扎在一起,在棉花部分外包裹油紙或牛皮紙,再用繩扎緊。三角瓶加棉塞后單個用報紙 包扎。
3、 干燥**
①干熱**(電熱干燥箱的使用) A、把要**的物品放在箱內(nèi),堆積時要留有空隙,勿使接觸器壁,鐵殼,關(guān)閉箱門。 B、打開電源,控溫儀上有數(shù)字顯示。
C、按 SET 鍵進(jìn)入溫度設(shè)定,將溫度設(shè)為 160℃。 D、再按 SET 鍵進(jìn)入時間設(shè)定,將時間設(shè)定為 80min。 E、待箱內(nèi)溫度降至 60℃時,才能打開箱門取出**物品。
☆注意事項(xiàng):
由于紙張和棉花在 180℃以上時,容易焦化起火,所以干熱**的溫度切莫超過 180℃
由于油紙?jiān)诟邷叵聲a(chǎn)生油滴,滴到電熱絲上易著火,所以進(jìn)行干熱**的玻璃器皿 嚴(yán)禁用油紙包裝.
由于溫度的急劇下降,會使玻璃器皿破裂,所以烘箱的溫度只有下降到 60℃以下,才可 打開烘箱門。
烘箱內(nèi)物品不宜放得太多,以免影響空氣流通,而使溫度計(jì)上的溫度指示不準(zhǔn),造成上 面溫度達(dá)不到,下面溫度過高,影響**效果。
干燥箱控制控制示意圖
②濕熱**(高壓蒸汽**鍋的使用)
A、打開電源,開啟**腔蓋,加水。
☆注意:必須使用蒸餾水,每次**后注意補(bǔ)充蒸餾水。
B、裝入待**物品,關(guān)閉**腔蓋。
☆注意:關(guān)閉腔蓋時,先快速旋轉(zhuǎn)到閉蓋指示燈閃爍,然后緩慢旋轉(zhuǎn)手柄,直至閉蓋指示燈 完全亮起,不要在指示燈亮起后繼續(xù)旋緊手柄。
E、選擇**程序,按 DATA 鍵選擇固體模式—U01。
F、開始**,按 START 鍵直接啟動工作,20min。
G、程序結(jié)束與開蓋,當(dāng)溫度低于 40 ℃ ,“COMP”字符閃爍,可安全開蓋。
H、取出**物品,戴上隔熱手套,待蒸氣散開后方可將手伸入**腔內(nèi)。
I、關(guān)閉電源。
五、創(chuàng)新思考
1、濕熱**與干熱**有何不同。
2、**前為什么要進(jìn)行包扎。
3、干燥的主要方法。