Westernblot檢測化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)的特點:Westernblot是蛋白質(zhì)研究中常用的一個手段,大部分westernblot顯色底物是化學(xué)發(fā)光底物,后的顯示方法有膠片(壓片)法和化學(xué)發(fā)光(熒光)成像系統(tǒng)。
膠片法需要暗房,X光膠片,配置顯影液、定影液,然后進(jìn)行壓片、顯影、定影,要得到一個比較理想的圖片,往往需要重復(fù)壓片幾次,操作非常繁瑣,而且需要耗材。
化學(xué)發(fā)光(熒光)成像系統(tǒng)則超越了膠片法,不需要暗房、壓片,關(guān)鍵的條帶不會因為曝光不足或者曝光過度而丟失,而且該方法無耗材,圖片結(jié)果為電子文檔,方便存檔和長期保存。
所以,化學(xué)發(fā)光(熒光)成像系統(tǒng)是每個涉及生命科學(xué)研究的實驗室必備的儀器,何況大部分化學(xué)發(fā)光(熒光)成像系統(tǒng)還兼顧了凝膠成像系統(tǒng)的功能,但是,化學(xué)發(fā)光(熒光)成像系統(tǒng)在的普及率并不高,究其原因還是價格和性能:進(jìn)口產(chǎn)品性能雖好,但價格比較貴,很多實驗室買不起;目前有少量的國產(chǎn),雖價格便宜一些,但性能不好。
國產(chǎn)性能不好的主要原因在于CCD相機,因為對CCD要求不高的凝膠成像系統(tǒng),國產(chǎn)已占居大部分市場,而化學(xué)發(fā)光(熒光)成像系統(tǒng)對CCD要求極高:高靈敏度、高動態(tài)范圍、低噪音。
符合這些條件的進(jìn)口冷CCD相機價格也很貴,國產(chǎn)化學(xué)發(fā)光(熒光)成像系統(tǒng)如用這種相機,性能有了保證,但失去價格優(yōu)勢;如用國產(chǎn)冷CCD相機,由于所用芯片不合適(為降低成本,未選用高靈敏度芯片),或者AD轉(zhuǎn)換為12bit(動態(tài)范圍太低),或者在設(shè)計上未注意降噪的細(xì)節(jié)等原因,性能達(dá)不到化學(xué)發(fā)光(熒光)成像系統(tǒng)要求。
化學(xué)發(fā)光(熒光)成像系統(tǒng)專用冷CCD相機系列,與普通凝膠成像系統(tǒng)相比,其特點體現(xiàn)在:
1)高靈敏度CCD芯片:采用化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)通用的高靈敏度CCD芯片。
2)高動態(tài)范圍:CCD芯片選定后,相機的動態(tài)范圍就由AD轉(zhuǎn)換器決定,國際知名的化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)均采用了16bitAD轉(zhuǎn)換,而12bit的相機用于凝膠成像沒問題,用于化學(xué)發(fā)光就不合適了。
3)低噪音:相機產(chǎn)生的噪音有二種,分別是熱噪音和讀出噪音,在降低熱噪音方面,通過多級半導(dǎo)體制冷,使CCD芯片溫度低于環(huán)境溫度50°C左右,且溫度可控,控溫精度為±0.2°C,并可控制半導(dǎo)體制冷開關(guān)和風(fēng)扇開關(guān);在降低讀出噪音方面,通常采用低噪音的16位A/D轉(zhuǎn)換,同時反復(fù)優(yōu)化電路設(shè)計,降低噪音。
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