此款色譜柱能夠根據(jù)抗體與FcγRⅢa受體的親和力來分離抗體。與傳統(tǒng)的表面等離子體共振(SPR) 方法相比，TSKgelFcR-IIIA-NPR對曲妥珠單抗的FcγRⅢa親和力變化表現(xiàn)出更高的敏感性，證明了這項新技術在生物相似性評估中的強大作用。
通過近幾年的研究發(fā)現(xiàn)，抗體Fc區(qū)的N-糖鏈結構會影響抗體與Fc受體之間的親和力，與Fc受體親和力強的抗體，其細胞殺傷力即ADCC活性也越高，能增強****的活性。根據(jù)這一機制原理，東曹公司將Fc受體之一的重組FcγRⅢA作為配基，鍵合到非多孔親水性聚合物基質(zhì)的填料上，并充填至PEEK色譜柱內(nèi)，開發(fā)出了TSKgelFcR-ⅢA-NPR色譜柱，它給分析抗體糖鏈結構、測定ADCC活性提供了一種全新的方法。
FcR色譜柱的應用實例
下圖是使用TSKgelFcR-ⅢA-NPR色譜柱對利妥昔單抗類似藥和原研藥進行比對分析的色譜圖。洗脫峰面積比例的不同顯示出了生物類似藥和原研藥在糖鏈結構和活性上存在差異。
此外，TSKgelFcR-ⅢA-NPR色譜柱也可用于抗體**質(zhì)量控制中批次差的檢驗。將兩個批次的**性抗體**A注入色譜柱中進行分析后，通過比對峰面積百分比的差異可以更加快速簡便地發(fā)現(xiàn)**質(zhì)量的批間差。
幾種抗體生物活性分析方法的比較
目前為止，傳統(tǒng)的抗體活性檢測方法主要有細胞ELISA法或SPR等手段，不僅需要昂貴的設備及繁瑣的操作，且實驗成本高耗時較長。使用TSKgelFcR-ⅢA-NPR色譜柱能非常簡便地獲得重復性良好的分析結果，且分析成本更低。下表中，我們列舉了幾種常用的ADCC活性和糖鏈分析方法的比較。
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