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*新ThermaSepTM : Oligonucleotide分析純化色譜柱

*新ThermaSepTM : 寡核苷酸(Oligonucleotide)分析純化色譜柱 超高純度的寡核苷酸是許多基因研究(定量PCR、microarrays和基因合成試驗)所需要的,瓦里安*新推出的ThermaSep柱,可有效地將合成寡核苷酸時所產(chǎn)生的副產(chǎn)品去除,以提高下游工作的成功率。 一般來說,較高的溫度可以改善寡核苷酸的分離效果,以聚合物為基體的ThermaSep柱可以在高溫下(大約80 oC)使用,與目前市場上大多數(shù)硅膠基體的色譜柱相比,高溫穩(wěn)定性確實(shí)是ThermaSep柱一個非常突出的優(yōu)點(diǎn)。而硅膠基體在較高的溫度下會產(chǎn)生溶解現(xiàn)象,不但會污染純化的寡核苷酸,也會使色譜柱壽命大大縮短。 ThermaSep具有以下優(yōu)點(diǎn): ‧多樣的分離模式:ThermaSep色譜柱可應(yīng)用于反相色譜模式和離子交換色譜模式分離樣品。 ‧優(yōu)異的熱穩(wěn)定性:這是多數(shù)寡核苷酸純化應(yīng)用的需求,用戶需要提高操作溫度來提高目標(biāo)寡核苷酸和其他寡核苷酸的分離度,此外該色譜柱的使用壽命也很長。 ‧**的性能表現(xiàn):分離產(chǎn)品的純度>95%,產(chǎn)率>80%,可使混合物的分離變得更加簡單,ThermaSep柱可以成功地分離具有n-1失敗序列的寡核苷酸、未結(jié)合的染料以及未結(jié)合的修飾物等雜質(zhì)。而且以耐高溫的聚合物為基體的ThermaSep色譜柱不會有硅膠殘留。 ‧操作方便效率高:寡核苷酸的純化法一般包括trityl-on HPLC和凝膠電泳兩種。以傳統(tǒng)HPLC方法為例,寡核苷酸先用trityl基團(tuán)保護(hù),在液相色譜柱分離后再去除保護(hù)基團(tuán),這個步驟比較復(fù)雜;凝膠電泳法也是耗時較長的方法,而且產(chǎn)率不穩(wěn)定。ThermaSep柱分離寡核苷酸時可以直接使用無基團(tuán)保護(hù)的樣品,省略去除保護(hù)基團(tuán)的步驟,收集下來的樣品就可以直接在下游應(yīng)用。 ‧**的樣品分離規(guī)模: 分析和半制備系統(tǒng) 瓦里安寡核苷酸純化系統(tǒng)可以使用內(nèi)徑從2.1mm 到10mm的色譜柱,該系統(tǒng)可以通過更換泵頭輕松轉(zhuǎn)換為半制備系統(tǒng)(使用內(nèi)徑為41.4mm的色譜柱),所有管路都必須為PEEK或鈦合金材質(zhì)。由于樣品收集的模式為時間窗口模式,所以泵流速必須相當(dāng)準(zhǔn)確和穩(wěn)定。 制備系統(tǒng) 更大量的制備系統(tǒng)其色譜柱內(nèi)徑就必須增加到 50mm以上,并且可以通過更換泵頭使用內(nèi)徑為100mm直徑的色譜柱。 生產(chǎn)系統(tǒng) 瓦里安Skid systems可以配合使用內(nèi)徑大于100mm的色譜柱,達(dá)到生產(chǎn)規(guī)模。