兔股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞 
	細(xì)胞簡介: 

	
		股骨頭( caput femoris)呈圓形,約占一圓球的2/3,其上完全為關(guān)節(jié)軟骨所覆蓋,在其頂部微后有一小窩,稱為股骨頭凹,為股骨頭韌帶附著處,股骨頭可由此獲得少量血供。
	
	
		
			
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						組織來源
					 
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						產(chǎn)品規(guī)格
					 
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						貨號
					 
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						用途
					 
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						股骨頭動脈組織
					 
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						5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
					 
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						A01X2173
					 
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						僅供科研研究實驗
					 
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	細(xì)胞特性: 
	
 
	
		1)組織來源于實驗動物的股骨頭動脈組織。
	
	
		2)細(xì)胞鑒定:血管假性血友病因子(vWF)熒光染色為陽性。
	
	
		3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
	
	
		4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
	
	
		5)細(xì)胞生長方式:鋪路石狀細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
	
	
		推薦培養(yǎng)基
	
	
		我們推薦使用 DELF 原代 內(nèi)皮 細(xì) 胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
	
	
 
	實驗具體步驟: 

	(1)動物福利:小鼠麻醉犧牲/處死,或者斷頸處死;
(2)小鼠:可以將小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者簡單粗暴的使用75%乙醇在燒杯中浸泡3min,然后轉(zhuǎn)移至無菌操作臺使用無菌吸水紙/棉花將酒精擦拭干凈;
(3)取出心臟組織:用眼科剪在鑷子的配合下打開腹腔,取出心臟組織,置于含有2X雙抗冰冷PBS的培養(yǎng)皿中;
(4)組織:在含有2X雙抗PBS中將心臟一分為二,充分洗滌里邊的血液,/3次,每次5min;
(5)破碎組織:使用眼科鉗或者剪刀,將心臟組織剪碎至1-3 mm3大小組織塊;(備注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml膠原酶Ⅰ于37℃聯(lián)合消化組織3-5 min,
	利于后期細(xì)胞從組織塊中爬出來,同時能夠消除部分結(jié)締組織等)
(6)種植組織塊:將上述組織使用2X雙抗冰冷PBS洗滌3次,每次5min,然后使用完全培養(yǎng)基(含有1X雙抗)洗滌一次。經(jīng)過的心臟破碎組織塊經(jīng)過離心后,可以用細(xì)頭
	鑷子將組織塊種植于培養(yǎng)皿中(備注:破碎組織塊可能還含有液體,可以在一個無菌培養(yǎng)皿底沾幾下,把液體);種植完成后,可以將培養(yǎng)皿正置3-5小時,然后更換培養(yǎng)皿的
蓋子正置放置過夜(也可以使用封口膜密閉培養(yǎng)皿在4℃正置過夜);

	(7)培養(yǎng)基培養(yǎng):將組織塊中輕柔緩慢的加入完全培養(yǎng)基,然后在恒溫潮濕細(xì)胞培養(yǎng)箱(37℃,5% CO2)培養(yǎng)48h后觀察單個細(xì)胞從組織塊中爬出情況,一般3-5 day能夠達(dá)到傳代的爬出效率;
(8)貼壁細(xì)胞傳代:當(dāng)單個細(xì)胞從組織塊爬出面積在組織塊3-5倍,進(jìn)行傳代,此時可以使用0.25% or 1/3 0.25% 胰蛋白酶消化組織塊爬出的細(xì)胞,消化時間根據(jù)正常細(xì)胞消化時間即可,當(dāng)然可以在消化過程中不斷管擦爬出細(xì)胞的皺縮情況,一旦達(dá)到消化完成(皺縮細(xì)胞≥70%)即可使用完全培養(yǎng)基終止消化。在吹打單個細(xì)胞時候,一定要輕柔/緩慢,不能吹打到組織塊,如果組織塊掉下來,大概率是不會再貼壁成功啦。
	根據(jù)細(xì)胞數(shù)量種植到對應(yīng)的培養(yǎng)皿/瓶中;
(9)鑒定:細(xì)胞在傳代至代、第五代、第十代時候可以將部分細(xì)胞進(jìn)行鑒定,鑒定辦法包括:RNA-seq、western blot、qRT-PCR、RT-PCR、IF、流式細(xì)胞術(shù)等。
	實驗方法: 
	
 
	一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,可采用低速離心。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料,由于細(xì)胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細(xì)胞充分分散,形成細(xì)胞懸液,可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。其中,機械分散法的特點是簡便、快速,但對組織機械損傷大,而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。消化分離法是指把組織剪切成較小團塊(或糊狀),應(yīng)用酶??生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動,使團塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時再采用機械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細(xì)胞團塊得以較充分的分散,制成少量細(xì)胞群團和大量單個細(xì)胞的細(xì)胞懸液,接種培養(yǎng)后,細(xì)胞容易貼壁生長。
	 
	公司正在出售的產(chǎn)品: 
	
 
	MCP-4ELISAkit
	鮭魚補體蛋白4(C4)elisa分析檢測試劑盒
	C4 ELISA Kit
	人膽固醇7α-羥化酶(CYP7A)elisa分析檢測試劑盒
	HumanCYP7AELISAKit
	鈉依賴性脯氨酸轉(zhuǎn)運PROT抗體  Anti-SLC6A7/PROT
	染色體分離調(diào)節(jié)蛋白1抗體  Anti-RCS1/FAM64A
	神經(jīng)細(xì)胞分化因子2抗體  Anti-Neuro D2
	X-連鎖凋亡蛋白/性連鎖凋亡抑制蛋白抗體  Anti-XIAP/BIRC4
	鉀離子通道蛋白16抗體
	KCNK16
	細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶樣3抗體
	CDKL3/NKIAMRE
	猴促腎上腺皮質(zhì)(ACTH)elisa檢測試劑盒
	胰抗原修復(fù)溶液
	小鼠碘甲腺原氨酸脫碘酶Ⅱ(DIO2)elisa檢測試劑盒
	大鼠Rho相關(guān)GTP結(jié)合蛋白RhoE elisa檢測試劑盒免費代測
	環(huán)指蛋白190抗體
	RNF190
	驅(qū)動蛋白家族成員9抗體
	KIF9
	線粒體內(nèi)鈣結(jié)合天冬氨酸/谷氨酸載體蛋白抗體  Anti-SLC25A13
	磷酯酶Cβ2抗體  Anti-PLC β2/Phospholipase C beta 2
	原鈣粘蛋白γA11抗體  Anti-PCDHGA11
	泛素蛋白連接酶D3抗體  Anti-UBE2D3
	膠體金標(biāo)記的兔抗猴IgM
	兔股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞Rabbit Anti-Mink IgG H&L / APC
	EXD3蛋白抗體
	Dehydrogenase/reductase
SDR family member 9; DHRS9; DHRS9_HUMAN; NADP dependent retinol
dehydrogenase/reductase; NADP-dependent retinol dehydrogenase/reductase;
RDH-E2; Rdh15; RDHE2; RDHL; RDHTBE; retinol dehydrogenase homolog; Retinol
dehydrogenase, tracheobronchiol epithelail cell-specific; RETSDR8; SDR family,
member 9; SDR9C4; short chain dehydrogenase/reductase family 9; short chain dehydrogenase/reductase
family 9C, member 4; Short chain dehydrogenase/reductase retSDR8; Short-chain
dehydrogenase/reductase retSDR8; 3 alpha hydroxysteroid dehydrogenase; 3-alpha
hydroxysteroid dehydrogenase; 3-alpha-HSD; 3alpha HSD.
	兔股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞
	人單核細(xì)胞
	AAV-293腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞
	SCaBER人膀胱鱗癌細(xì)胞
   
    
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