雞氣管上皮細(xì)胞
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產(chǎn)品名稱
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雞氣管上皮細(xì)胞
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產(chǎn)品規(guī)格
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5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
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組織來(lái)源
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氣管組織
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生長(zhǎng)特性
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貼壁
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細(xì)胞形態(tài)
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上皮細(xì)胞樣
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分類
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雞原代細(xì)胞
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貨號(hào)
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A01X2306
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用途
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僅供科研實(shí)驗(yàn)
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培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
雞氣管上皮細(xì)胞分離自氣管組織；氣管（Trachea），呼吸器官的一部分；為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣，與環(huán)狀軟骨相連；向下至第四、五胸椎體（相當(dāng)胸骨角平面）交界處，分左、右主支氣管，分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個(gè)半環(huán)狀軟骨構(gòu)成，有彈性，軟骨為“C”字形的軟骨環(huán)，缺口向后，各軟骨環(huán)以韌帶連接起來(lái)，環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接，保持了持續(xù)張開狀態(tài)。管腔襯以粘膜，表面覆蓋纖毛上皮，粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒，纖毛不斷向咽部擺動(dòng)將粘液與灰塵排出，以凈化吸入的氣體。氣管上皮是氣道與外界環(huán)境接觸的道防線，不僅是各種病原體、炎癥介質(zhì)作用的靶細(xì)胞，還作為效應(yīng)細(xì)胞合成、釋放多種炎性介質(zhì)和細(xì)胞因子從而參與氣道炎癥及反應(yīng)。體外培養(yǎng)的原代氣管上皮細(xì)胞因與體內(nèi)組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)上存在很大的相似性，因此，在基礎(chǔ)及臨床研究中極為重要。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的雞氣管上皮細(xì)胞采用中性蛋白酶-連酶蛋白酶混合消化法，并通過(guò)上皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的雞氣管上皮細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-18熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見(jiàn)培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無(wú)菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
RabbitcatecholamineELISAKit
干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白5抗體
IFITM5
調(diào)節(jié)蛋白AIRE抗體
AIRE
小鼠CD5抗原樣蛋白(CD5L)elisa檢測(cè)試劑盒
RNasin（核糖核酸酶抑制劑）
AKT蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒
L-半乳糖苷-1,4-內(nèi)酯脫氫酶(Gal LDH)測(cè)試盒
甲基化樣蛋白7B抗體
METTL7B
1號(hào)染色體開放閱讀框168抗體
C1orf168
磷酸化肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2抗體 Anti-phospho-ARP2 (Thr237)
Kartagener綜合征相關(guān)蛋白RSHL3抗體 Anti-RSPH4A/RSHL3
蛋白激酶錨定蛋白抗體 Anti-Neurobeachin
囊泡相關(guān)膜蛋白2抗體 Anti-VAMP2
多發(fā)性骨髓瘤相關(guān)蛋白抗體
TPPC1
D型-天冬氨酸氧化酶抗體
DASOX
應(yīng)激誘導(dǎo)磷蛋白1抗體 Anti-STIP1/Hop
寡腺苷酸合成酶-1 Anti-OAS1
蛋白酶體激活因子PA28γ抗體 Anti-PSME3/PA28 gamma
轉(zhuǎn)鈷胺素蛋白2抗體 Anti-TCN2/Transcobalamin II
PE-Cy5.5標(biāo)記兔IgG（型對(duì)照)
雞氣管上皮細(xì)胞Rabbit IgG / PE-Cy5.5
特異性解旋酶抗體
0610041O14Rik;
adapter protein ATH 55; Adapter protein ATH-55; Ath55; AV025587; Crn related
protein kim1; crn-related protein kim1; DKFZp762C1015; HCNP; HCNP protein;
HCRN; KIAA1177; NTC90; PP3898; Pre-mRNA-splicing factor SYF1; Protein HCNP; RNA
splicing factor; SYF1; SYF1 homolog; SYF1 homolog, RNA splicing factor;
SYF1_HUMAN; Xab2; XPA binding protein 2; XPA-binding protein 2.
雞小腸黏膜上皮細(xì)胞
小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞
HUCCT1人膽管癌細(xì)胞
Caco-2人結(jié)腸腺癌細(xì)胞
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