細(xì)胞培養(yǎng)操作：
1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
商品屬性：
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產(chǎn)品名稱(chēng)
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CHL中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞
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英文名稱(chēng)
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CHL:CHL
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產(chǎn)品貨號(hào)
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A01X1152
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培養(yǎng)條件
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氣相：95%空氣+5%二氧化碳；
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生長(zhǎng)特性
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貼壁生長(zhǎng)
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細(xì)胞形態(tài)
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成纖維細(xì)胞
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產(chǎn)品種屬
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中國(guó)倉(cāng)鼠
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凍存條件
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無(wú)血清凍存液，液氮儲(chǔ)存
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組織來(lái)源
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肺
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用途
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僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
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商品詳情：
細(xì)胞別稱(chēng)：Chinese Hamster Lung；CHL；中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞
種屬來(lái)源：中國(guó)倉(cāng)鼠
年齡性別：1日齡
組織來(lái)源：肺
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞
背景簡(jiǎn)介：CHL細(xì)胞系來(lái)源于一雌性中國(guó)倉(cāng)???的肺組織。1970年由Koyama等建立，廣泛應(yīng)用于染色體異常測(cè)試。
生物等級(jí)：1
細(xì)胞規(guī)格：1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測(cè)：無(wú)
基因表達(dá)情況：human tissue plasminogen activator(t-PA)
保藏機(jī)構(gòu)：ECACC; 87111906 ；中國(guó)科學(xué)院昆明細(xì)胞庫(kù)
培養(yǎng)基：90% DMEM+10% FBS+雙抗
培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件：無(wú)血清凍存液，液氮儲(chǔ)存
公司正在出售的產(chǎn)品：
2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框84抗體 C2orf84
冰凍切片ATP酶活性染色試劑盒 人白介素2(IL-2)elisa分析檢測(cè)試劑盒
PAP1結(jié)合蛋白抗體 INO80B
跨膜γ羧基酸蛋白1抗體 PRRG1
核蛋白95抗體 Anti-UHRF1 磷酯酶Cβ3 Anti-PLCB3/PLC beta3
大鼠丙酮酸激酶M2型工酶(M2-PK)elisa檢測(cè)試劑盒 小鼠序列相似家族3成員B(FAM3B)elisa檢測(cè)試劑盒
人k鏈恒定區(qū)抗體 Ig kappa chain C region
枯草溶菌素轉(zhuǎn)化酶1抑制劑抗體 Anti-PROSAAS 2型豬鏈球菌溶血素抗體 Anti-SLYFRYL蛋白抗體 FRYL
乳腺癌易感基因復(fù)合物亞基蛋白3抗體 BRCC3
PE-CY5標(biāo)記的驢抗羊IgG H&L Donkey Anti-Goat IgG H&L / PE-Cy5
犬Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)elisa分析檢測(cè)試劑盒 Col Ⅲ ELISA Kit
小鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)elisa分析檢測(cè)試劑盒 Casp-9ELISAKit
猴β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)elisa分析檢測(cè)試劑盒 Aβ1-42 ELISA Kit
CHL中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞人多肽YY(Peptide-YY)elisa分析檢測(cè)試劑盒 HumanPeptideYYELISAKit
即早反應(yīng)蛋白3相互作用蛋白1抗體 IER3IP1
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過(guò)度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。
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