ELISA試劑盒的檢測(cè)范圍指的是該試劑盒能夠準(zhǔn)確檢測(cè)的目標(biāo)物質(zhì)的濃度區(qū)間。這個(gè)范圍通常在試劑盒的說明書中有明確標(biāo)注，它涵蓋了標(biāo)準(zhǔn)曲線的*低檢測(cè)限和*高檢測(cè)限。檢測(cè)范圍的選擇應(yīng)根據(jù)預(yù)期樣本中目標(biāo)物的濃度來確定，以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性。確認(rèn)ELISA試劑盒的檢測(cè)范圍是否合適，需要遵循以下步驟：

一、查閱說明書中的標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍?

試劑盒的檢測(cè)范圍通常以標(biāo)準(zhǔn)曲線（標(biāo)曲）的線性范圍表示，需確保待測(cè)樣本濃度落在此范圍內(nèi)。若樣本濃度過高，需通過預(yù)實(shí)驗(yàn)確定*佳稀釋倍數(shù)。例如，布魯氏菌ELISA試劑盒的檢測(cè)范圍差異可能導(dǎo)致成本和時(shí)間差異（進(jìn)口試劑盒A需130分鐘，國產(chǎn)B僅45分鐘）。

二、?驗(yàn)證線性與回收率

?線性測(cè)試?：將高濃度樣本用稀釋液梯度稀釋，觀察檢測(cè)值是否在80%-120%范圍內(nèi)。

?回收率?：加標(biāo)回收率應(yīng)接近100%（±5%為合格），反映檢測(cè)準(zhǔn)確性。例如，禽白血病病毒p27抗原ELISA試劑盒的線性范圍需通過稀釋樣本驗(yàn)證。

三、?預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證?

使用實(shí)際樣本進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，對(duì)比不同稀釋倍數(shù)下的檢測(cè)結(jié)果。若OD值超出標(biāo)曲范圍，需調(diào)整樣本稀釋比例。例如，非洲豬瘟病毒阻斷ELISA試劑盒在不同溫度保存下OD值可能偏差，需通過預(yù)實(shí)驗(yàn)確認(rèn)。

四、明確檢測(cè)目標(biāo)和樣本類型

首先，確定您要檢測(cè)的目標(biāo)蛋白或分子，以及樣本的類型（如血清、血漿、細(xì)胞上清等）。這將幫助您選擇適用于特定樣本類型和檢測(cè)目標(biāo)的試劑盒。

預(yù)測(cè)靶蛋白濃度

根據(jù)經(jīng)驗(yàn)或數(shù)據(jù)庫信息（如Pax-Db）預(yù)測(cè)待測(cè)樣本中目標(biāo)蛋白的濃度。這對(duì)于選擇合適檢測(cè)范圍的試劑盒至關(guān)重要。

五、考慮樣本稀釋

如果預(yù)期濃度遠(yuǎn)高于或低于試劑盒的檢測(cè)范圍，需要考慮對(duì)樣本進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂尰驖饪s。注意，樣本的稀釋應(yīng)在試劑盒推薦的范圍內(nèi)進(jìn)行，以避免基質(zhì)效應(yīng)影響結(jié)果。

六、平衡靈敏度與特異性

對(duì)于低豐度蛋白，選擇高靈敏度的試劑盒（如pg/mL級(jí)），而對(duì)于高濃度樣本，可能需要選擇線性范圍更寬的產(chǎn)品。

通過上述步驟，您可以更準(zhǔn)確地選擇適合您實(shí)驗(yàn)需求的ELISA試劑盒，確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。