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  • 檢測試劑盒保存方法 檢測試劑盒保存方法:1.檢測試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可運用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗刷液可能會有結晶分出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗刷時不影響成果。3.各步加樣均應運用加樣器,并常常校正其準確性,以防止試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,引薦運用排槍加樣。4.請每次測定的一起做規(guī)范曲線,做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高
    發(fā)布時間:2024-10-06 10:20 點擊次數(shù):224 次
  • 實時熒光定量PCR使用的熒光物質(zhì)原理簡述 實時熒光定量PCR所使用的熒光物質(zhì)可分為兩種:熒光探針和熒光染料?,F(xiàn)將其原理簡述如下:1.TaqMan熒光探針:PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的5'-3'外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可
    發(fā)布時間:2024-09-30 10:15 點擊次數(shù):272 次
  • 從外觀和性能上篩選血清分析 在實際篩選時,主要從血清外觀和實驗操作時細胞的生長狀態(tài)進行。從外觀上:1.顏色:根據(jù)血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色,這個指標的意義在于能體現(xiàn)出采血過程的嚴謹規(guī)范程度。胎牛血清或多或少總有點溶血,因為胎牛血清凝血功能差,紅細胞容易破裂;2.澄清度:高質(zhì)量的胎牛血清由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低,表現(xiàn)為稀薄、清淡;3.血清沉淀:血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生,對血清質(zhì)量沒有影響,沉淀的
    發(fā)布時間:2024-09-23 10:23 點擊次數(shù):171 次
  • 生化試劑的技術分類陳述 生化試劑的技術分類:1.生化分離與分析技術光譜技術已從單一的比色法發(fā)展為采用分光光度法、透射比濁法、原子吸收和火焰發(fā)射光譜法、分子熒光光譜法。分離技術除了一般的離心和超離心技術外,還有層析技術和電泳技術。層析技術包括薄層層析、凝膠層析、離心交換層析、親和層析、氣相層析、高效液相色譜(HPLC)等等。電泳技術中紙電泳、醋酸纖維膜電泳的應用已明顯減少,瓊脂糖電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAG)應用增多,
    發(fā)布時間:2024-09-14 15:18 點擊次數(shù):194 次
  • ELISA試劑盒主要操作步驟技巧 ELISA試劑盒主要操作步驟技巧:1加樣:①實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。2.溫育:①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應時間的條件;②用1個小溫度計放置在板孔反應液中測量觀察;③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學梯度
    發(fā)布時間:2024-09-09 10:03 點擊次數(shù):220 次
  • 小鼠血管舒緩激肽(BK)ELISA試劑盒實驗包被和封閉的原理 ELISA包被和封閉的原理:實驗時,需要將抗原或捕獲抗體包被于固相載體上,通過檢測分子(酶或熒光基團),將化學信號轉(zhuǎn)換為電信號,以OD值或發(fā)光值的結果,對靶蛋白進行定量分析。ELISA中的固相載體物很多,常用的是聚苯乙烯,具有較強的蛋白質(zhì)吸附性。具有可制成各種形式,且不參與化學反應的特點。與聚苯乙烯類似的塑料為聚氯乙烯,它質(zhì)軟板薄,可切割,價廉、但光潔度不如聚苯乙烯板。聚氯乙烯對蛋白質(zhì)的吸附性能比
    發(fā)布時間:2024-09-03 11:02 點擊次數(shù):218 次
  • 大腸桿菌PCR檢測試劑盒PCR引物二聚體減除方法 大腸桿菌PCR檢測試劑盒PCR引物二聚體減除方法:如果出現(xiàn)了引物二聚體,有許多方法可以減少或消除反應中的引物二聚體。1、首先是優(yōu)化熱循環(huán)條件,這主要是提高退火溫度。大多數(shù)情況下,兩步循環(huán)(由95°C變性步驟直接進入60°C退火和延伸步驟)有利于強效擴增,因此引物設計時設定的成功退火溫度為60°C。2、可降低引物濃度,甚至采用不同的正向引物和反向引物的比值也有一定的幫助。大多數(shù)情況下,每條引物的理想
    發(fā)布時間:2024-08-27 10:24 點擊次數(shù):236 次
  • 鑒定ELISA試劑盒方法分析 鑒定ELISA試劑盒方法:鑒別方法:Ⅰ:利用干擾實驗即可辨別elisa試劑盒是否檢測目的抗原,方法如下:(1)將針對試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測抗體配置成antibody:antigen≈1:2的混合孵育液(2)37℃孵育15分鐘后,代替原試劑盒中的檢測抗體(3)后續(xù)操作按照試劑盒說明書進行,加檢測抗體、酶復合物和底物(4)實驗完畢后,檢測其標準曲線,如果標準曲線良好則說明加入的目的
    發(fā)布時間:2024-08-19 14:07 點擊次數(shù):225 次
  • PCR反應條件的選擇技巧 PCR反應條件的選擇技巧主要體現(xiàn)在溫度、時間和循環(huán)次數(shù)上,溫度過高,延伸時間不夠都會對實驗結果有很大的影響。PCR反應條件三要素為溫度、時間和循環(huán)次數(shù)。溫度與時間的設置基于PCR原理三步驟而設置變性-退火-延伸三個溫度點。在標準反應中采用三溫度點法,雙鏈DNA在90~95℃變性,再迅速冷卻至40~60℃,引物退火并結合到靶序列上,然后快速升溫至70~75℃,在TaqDNA 聚合酶的作用下,使引
    發(fā)布時間:2024-08-16 13:43 點擊次數(shù):253 次
  • ELISA檢測試劑盒實驗加樣流程 ELISA檢測試劑盒實驗加樣流程:1、標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。2、加樣后及時放入孵箱。 3、加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。4、如果采用
    發(fā)布時間:2024-08-13 10:38 點擊次數(shù):301 次
  • 細胞復蘇過程 細胞復蘇是指將凍存在液氮里邊或者-80℃冰箱中的細胞解凍,再培養(yǎng)傳代。細胞復蘇應采用快速融化的方法,這樣的目的是為了讓細胞外結晶在很短的時間內(nèi)融化,從而避免慢悠悠的融化,使得水分滲入細胞內(nèi)再結晶,從而對細胞再次造成傷害,從而影響細胞的存活率。細胞復蘇:1:細胞是凍在-80℃的環(huán)境里面的,所以拿出來后,應該盡快去37℃水浴鍋里解凍(我一般是放在PE手套里面,然后在37攝氏度的水域上快速融化。
    發(fā)布時間:2024-08-06 10:12 點擊次數(shù):285 次
  • 細胞適應無血清培養(yǎng)基的方法 細胞適應無血清培養(yǎng)基的方法: 1.直接適應——細胞從添加血清的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)換到無血清培養(yǎng)基(SFM)中。 一些類型細胞可直接從包含血清的培養(yǎng)基適應無血清培養(yǎng)基。對于直接適應,接種細胞密度應該:2.5×105~3.5×105細胞/ml。當細胞密度達到1×106~3×106細胞/ml時,傳代培養(yǎng)細胞。當細胞密度在培養(yǎng)4到7天后達到2×106~4×106細胞/ml時,細胞wan全適應了無血清培養(yǎng)基
    發(fā)布時間:2024-07-29 16:58 點擊次數(shù):220 次
  • ELISA試驗溫育的時間及溫度選擇 在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應,即加酶結合物和顯色劑后。抗原抗體反應的完成需要有一定的溫度和時間,這一保溫過程稱為溫育(incubation),有人稱之為孵育。溫育的時間選擇:溫育這一步是ELISA測定中容易出現(xiàn)問題的步驟。目前國內(nèi)ELISA試劑盒的反應溫育時間為37℃30分鐘-1小時,進口ELISA試劑盒則通常為37℃1-2小時才能有較完全的結合,低于1小時,可能會影響測定下限。ELISA
    發(fā)布時間:2024-07-22 16:46 點擊次數(shù):277 次
  • PCR產(chǎn)物純化效率提升方法 PCR擴增完成后需要進行瓊脂糖凝膠電泳檢測,在條帶單一無其他雜帶的情況下,可以直接對產(chǎn)物進行純化。提升PCR產(chǎn)物純化效率提升方法如下:1.模板純度,有較多蛋白或其他雜質(zhì)時,會一定程度影響pcr效率;2.模板量,過高的模板量反而會降低pcr效率特異性;3.引物,引物的長度xu要再效率和特異性間獲得優(yōu)化,其次要控制引物gc含量;4.聚合酶,要考慮酶的保真率和速度;5.mg離子濃度,mg離子濃度過高會降
    發(fā)布時間:2024-07-18 14:54 點擊次數(shù):262 次
  • 細胞培養(yǎng)實驗基本操作步驟 細胞培養(yǎng)實驗基本操作步驟:1、進無菌室前要洗手,按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。2、操作者動作要輕,安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意,金屬器械不能在火焰中長時間燒灼,以防退火;燒過的器械要冷卻后才能使用;已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼,因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì),吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中;
    發(fā)布時間:2024-07-09 14:19 點擊次數(shù):233 次
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