生化試劑盒樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過(guò)濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (通過(guò)過(guò)濾)。
4 ). 通過(guò)加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。

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通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開(kāi)酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接??,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:全程約50分鐘,可測(cè)100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn): X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳.
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì)量和軟件的算法。
β-半乳糖苷酶HRP標(biāo)記鏈霉親和素植物果膠甲酯酶(pectin methylesterase;PME)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒萘-D8 分析標(biāo)準(zhǔn)品苯乙 95%丁二酸銨(>98%,BR)
NOGO-A抗體(Nogo-A Ab)ELISA試劑盒雄酮 99%苯乙 95%硫代硫酸銨
NOD樣受體(NLR)ELISA試劑盒去氫表雄酮 99%苯乙 ≥90%, FCC, Kosher, FG鹽酸氨啉(>99%,BP)
NADPH氧化酶3(NOX3/MOX2)ELISA試劑盒2,3,5-三氯苯酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品苯乙 50%溶液3-[N-(1,1-二甲基-2-羥乙基)]氨基-2-羥烷磺酸鈉鹽(>98%,BP)
NADPH氧化酶1(NOX1/MOX1/NOH1)ELISA試劑盒2,3,6-三氯苯酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品高氯酸 AR,99.5%對(duì)甲氧基苯甲(>97%,BR)
Na+/H+交換體3(NHE3)ELISA試劑盒2,3,4-三氯苯酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品高氯酸鈉,無(wú)水 ACS, ≥98.0%三氧化二銻(>98%,BR)
N(ε)羧乙基賴氨酸(CEL)ELISA試劑盒3,4,5-三氯苯酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品高氯酸鈉,無(wú)水 99.99% metals basis(>99%,BR)
MYC誘導(dǎo)核抗原(MINA)ELISA試劑盒蓖麻油 CP高氯酸鈉,無(wú)水 for HPLC,99.0% 過(guò)硫酸銨
MAX二聚化蛋白1(mxd1)ELISA試劑盒萎銹靈 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.9%高氯酸鈉,一水 ACS, 98%甲亞鹽(>95%,BR)
MAP磷酸酶雙特異性磷酸酶1(DUSP-1)ELISA試劑盒解喹 分析標(biāo)準(zhǔn)品氯酸鈉 CP, ≥98.0%天青C(>50%,BS)
M2腎酮酸激酶(M2-PK)ELISA試劑盒炔草酸 分析標(biāo)準(zhǔn)品3-O-甲基-D-吡喃葡萄糖 99%氯酸鋇一水(>99%,BR)
L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒5-氯-8-羥基喹啉 97%過(guò)硫酸氫 ≥47% KHSO5 basis硫酸鋇(>98%,BR)
L-乳酸脫氫酶(L-LDH)ELISA試劑盒2,3-二氟-5-氯吡啶 98%二甲氨酰氯 97%硫化鋇(>98%,BR)
L-苯氨酸解氨酶(PAL)ELISA試劑盒唑螨酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%3-硝基-4-氨基苯酚 98%苯磺酸(>98%,BR)
L苯氨酸解氨酶(PAL)ELISA試劑盒2-庚 98%4-硝基鄰苯二 97%安息香(>98%,BR)
L-氨基酸氧化酶(LAO)ELISA試劑盒2-庚 ≥97%,Kosher納米三氧化二鐵(α- Fe2O 30nm 球形,99.5%,α型安息香乙(>98%,BR)
生化試劑盒雞神經(jīng)粘附分子(NCAM/CD56)酶聯(lián)免吸附試劑盒Anti-Glycodelin A/PP14/FITC 熒光素標(biāo)記胎盤(pán)蛋白14抗體IgG
雞半乳凝集素14(GAL14)酶聯(lián)免吸附試劑盒Anti-Clusterin- Alpha/ Beta /FITC 熒光素標(biāo)記凝聚素α/β抗體IgG
雞谷轉(zhuǎn)氨酶(ALT)酶聯(lián)免吸附試劑盒 Anti-C-Myc/HRP (MYC/MTLC) 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記致癌因C-Myc抗體IgG
雞膠原酶I(Collagenase I)酶聯(lián)免吸附試劑盒 Anti-C-Mer/MERTK /FITC 熒光素標(biāo)記c-mer原癌因酪氨酸激酶抗體IgG
雞不對(duì)稱二甲精氨酸(ADMA)酶聯(lián)免吸附試劑盒 Anti-C-Met/HGFR /FITC 熒光素標(biāo)記肝生長(zhǎng)因子受體(原癌因蛋白)抗體IgG
雞巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α)酶聯(lián)免吸附試劑盒Anti-C-Met/HGFR/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記肝生長(zhǎng)因子受體(原癌因蛋白)抗體IgG
雞空泡素相關(guān)蛋白A(VacA)酶聯(lián)免吸附試劑盒Anti-SMMHC/MYH11/FITC 熒光素標(biāo)記平滑肌肌球蛋白重鏈抗體IgG
雞泛素激活酶樣蛋白(UBE1L)酶聯(lián)免吸附試劑盒 Anti-SM-MHC/FITC 熒光素標(biāo)記心肌肌凝蛋白抗體IgG
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