細(xì)胞株培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
培養(yǎng)操作：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取.
細(xì)胞處理方法：
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說明書僅供參考，具體操作還需要根據(jù)到貨時(shí)細(xì)胞密度，細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)等具體情況，酌情處理，如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo)。
一．貼壁細(xì)胞
客戶接收到細(xì)胞，用75%的酒精（建議配制75%酒精的水是過的）培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張）。
顯微鏡觀察細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右（可以傳代的情況下），細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度，培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。1000rpm,5min離心，重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二．懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞，用75%的酒精（建議配制75%酒精的水是過的）培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張）。
3. 嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒）。
5. 1000rpm,5min離心，重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基，37℃,5%CO2培養(yǎng)。
冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA試劑盒1-甲基吡唑-4-酸頻哪酯 97%4-三氟甲氧基苯 99%天狼猩紅
Bcl-2樣蛋白1(BCL2L1)ELISA試劑盒5-甲基吡啶-3-酸 98%芐基酮 98%DL-2氨基丁酸(>98.5%,BR)
Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISA試劑盒2-甲氧基吡啶-3-酸頻哪酯 97%氧化鉿(IV) 99.99% metals basisDL-2-羧酸(>98%，BR)
A組鏈球菌菌壁多糖抗體(ASP)ELISA試劑盒2-甲氧基吡啶-5-酸頻哪酯 97% Standard for GCDL-苯甘氨酸(>98%，BC)
A組鏈球菌多糖抗原(ASP Ag)ELISA試劑盒1-BOC-吡咯-3-酸 98%溶液 AR，30-33 wt. % in absolute ethanolDL-beta-苯氨酸(>98%，BR)
A激酶PRKA錨定蛋白12(Akap12)ELISA試劑盒3-酸 97%溶液 CP，30-33 wt. % in absolute ethanolDL-肉堿鹽酸鹽
AT豐富結(jié)合域1A(ARID1A)ELISA試劑盒2-基-5-降烯 98%2-氨基-2-甲基-1- 97%DL-鳥氨酸鹽酸鹽(>98%，BC)
ATP酶(ATP)ELISA試劑盒嘧啶-5-酸 98%碳酸氫 AR,99.5% DL-(>99%,BP)
Apelin12(AP12)ELISA試劑盒吡啶-4-酸 94%無水碳酸 AR，99%甲基烯酸二甲氨乙酯(>99%,BR)
Apelin 36(AP36)ELISA試劑盒嘧啶-5-酸頻哪酯 97%無水碳酸 GR，99.5%D-蘋果酸(>98%，BR)
apelin 13(AP13)ELISA試劑盒2-(三氟甲氧基)苯酸 97%無水碳酸 PTDMS
apelin 12(AP12)ELISA試劑盒2,4,6-三酸 98% 無水碳酸 SPD-正亮氨酸(>99%,BC)
AP-5復(fù)合物β亞基(PP1030)ELISA試劑盒異辛酸 GCS,≥99.5% (GC)無水碳酸 99.99% metals basis鹽酸多巴
Alpha-D 酚/維生素E(Alpha-D TPL)ELISA試劑盒異辛酸 CP,98.0%無水碳酸 99.995% metals basisDST
Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)ELISA試劑盒異辛酸 >99.0% (GC)無水碳酸 ACS, ≥99.0% 2'-脫氧尿苷-5'-三磷酸三鈉鹽
AFG3樣蛋白2(AFG3L2)ELISA試劑盒2-溴異丁酰溴 98%硝酸 AR,99.0%四氫甲基嘧啶羧酸(>98%，BR)
細(xì)胞株25羥基維生素D3檢測(cè)試劑盒2,2′-聯(lián)氨-雙（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二鹽 98%甲溶液 ACS,37 wt. % in H2O, 含10-15% 甲穩(wěn)定劑
2-硫代噻唑烷-4-羧酸檢測(cè)試劑盒4-氨基-3-羥基苯甲酸 98%京尼平甙 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%
3-硝基酪氨酸檢測(cè)試劑盒亞硫酸銨 94%乙二溶液 40 wt. % in H2O (8.8 M)
3型1-磷酸鞘氨受體檢測(cè)試劑盒氨基胍碳酸氫鹽 分析標(biāo)準(zhǔn)品甘草酸 93%
4-羥基壬烯檢測(cè)試劑盒順式-烏頭酸 分析標(biāo)準(zhǔn)品，98%氫加蘭他敏 98%
5α還原酶檢測(cè)試劑盒N-（4-氨酰）-L-谷氨酸 97%二氫黃酮甙 97%
5-甲基四氫葉酸檢測(cè)試劑盒花生四烯酸 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥99.0% (GC)和厚樸酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品
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