冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
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產(chǎn)品名稱
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大鼠少突膠質(zhì)細(xì)胞
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規(guī)格
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詳見說明書
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貨號
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BH-8010825
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細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
培養(yǎng)操作：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取.
人干擾素可誘導(dǎo)蛋白AIM2 ELISA試劑盒 人 96T 0.312-20 ng/mL
ELISA Kit for Human Interferon-inducible protein AIM2
人金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白5(ADAM-TS 5)ELISA試劑盒 人 96T 0.156-10 ng/mL
ELISA Kit for Human A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 5
人δ氨基乙酰丙酸脫水酶(ALAD)ELISA試劑盒 人 96T 1.56-100 ng/mL
ELISA Kit for Human Delta-aminolevulinic acid dehydratase
人血管**素樣蛋白4(ANGPTL4)ELISA試劑盒 人 96T 0.156-10 ng/mL
ELISA Kit for Human Angiopoietin-related protein 4
人金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白9(ADAMTS9) ELISA試劑盒 人 96T 0.156-10 ng/mL
L-丙氨酸乙酯鹽酸鹽
英文名稱：L-Alanine ethlester hydrochloride；L-Ethyl 2-aminopropanoate hydrochloride；Ethyl L-alaninate hydrochloride
其他名稱：L-丙氨酸合乙酯鹽酸鹽；L-丙胺酸乙酯鹽酸鹽
CAS號：1115-59-9
C5H11NO2·HCl =153.61
級別：BR
含量：≥98.5%
比旋光度：+2.9°±0.5(C=2.5 in H2O)
熔點：～62℃
性狀(以下信息僅供參考)：白色至類白色結(jié)晶粉末
用途：本品僅供科研，不得用于其它用途
保存：RT
ELISA Kit for Human A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 9
L-精氨酸
英文名稱：L-Arginine；L-1-Amino-4-guanidovaleric acid；L-2-Amino-5-guanidinovaleric acid；L-α-Amino-δ-guanidovaleric acid；L-Guanidine aminovaleric acid；Nδ-Amidino-L-ornithine
其他名稱：2-氨基-5-胍基戊酸；L-蛋白氨基酸；L-胍基戊氨酸；L-2-氨基-胍基戊酸
CAS號：74-79-3
C6H14N4O2=174.2
級別：BR
含量：≥98.0%
比旋光度：26.9～27.9o
PH：10.5～12.0
氯化物：≤0.02%
銨鹽：≤0.02%
硫酸鹽：≤0.02%
鐵：≤10ppm
重金屬：≤10ppm
砷鹽：≤1ppm
干燥失重：≤0.5%
灼燒殘渣：≤0.1%
性狀(以下信息僅供參考)：白色結(jié)晶粉末或棱形結(jié)晶，從乙醇中析出的為無水單斜片狀結(jié)晶。溶于水，微溶于乙醇，不溶于乙迷。具強堿性，水溶液能從空氣中吸收二氧化碳。水中溶解度: 148.7 g/l (20°C)
用途：本品僅供科研，不得用于其它用途。(以下用途僅供參考)一氧化氮合成酶底物，能轉(zhuǎn)換為瓜氨酸和NO?？恳环N依賴于NO的機制誘導(dǎo)胰島素分泌
保存：RT
人乙醛脫氫酶2(ALDH2)ELISA試劑盒 人 96T 0.312-20 ng/mL
ELISA Kit for Human Aldehyde dehydrogenase, mitochondrial
人載脂蛋白C2(Apo C2)ELISA試劑盒 人 96T 3.12-200 ng/mL
ELISA Kit for Human Apolipoprotein C-II
人載脂蛋白B(Apo-B)ELISA試劑盒 人 96T 78-5000 ng/mL
ELISA Kit for Human Apolipoprotein B-100
人β抑制蛋白2(ARRB2)ELISA試劑盒 人 96T 0.312-20 ng/mL
ELISA Kit for Human Beta-arrestin-2
人金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白1(ADAMTS1) ELISA試劑盒 人 96T 1.56-100 ng/mL
ELISA Kit for Human A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 1
大鼠少突膠質(zhì)細(xì)胞人金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白7(ADAMTS7)ELISA試劑盒 人 96T 0.156-10 ng/mL
ELISA Kit for Human A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 7
人12-脂氧化酶/脂加氧酶(LOX-12)ELISA試劑盒 人 96T 0.156-10 ng/mL
ELISA Kit for Human Arachidonate 12-lipoxygenase, 12S-type
細(xì)胞處理方法：
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說明書僅供參考，具體操作還需要根據(jù)到貨時細(xì)胞密度，細(xì)胞生長狀態(tài)等具體情況，酌情處理，如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo)。
一．貼壁細(xì)胞
客戶接收到細(xì)胞，用75%的酒精（建議配制75%酒精的水是過的）培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X ,200X 各一張）。
顯微鏡觀察細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右（可以傳代的情況下），細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度，培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。1000rpm,5min離心，重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二．懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞，用75%的酒精（建議配制75%酒精的水是過的）培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X ,200X 各一張）。
3. 嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒）。
5. 1000rpm,5min離心，重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基，37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
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