ELISA包被溫度對(duì)抗原結(jié)合的影響主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面：

1. 反應(yīng)速率：在37℃下，抗原抗體反應(yīng)的速率快，因?yàn)檫@個(gè)溫度是大多數(shù)生物分子活性的合適溫度。更高的溫度（如43℃）可以加速反應(yīng)，但不推薦，因?yàn)檫^高的溫度可能導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性。相反，低溫（如室溫或4℃）雖然可以減少非特異性結(jié)合，但會(huì)顯著降低反應(yīng)速率。

2. 穩(wěn)定性：在低溫（4℃）下進(jìn)行包被，雖然可以大限度地保持生物活性，但需要更長(zhǎng)的時(shí)間來完成結(jié)合過程，可能需要過夜（16-24小時(shí)）。而37℃下，反應(yīng)時(shí)間可以縮短到1-2小時(shí)，但必須注意不要超過1小時(shí)，因?yàn)殚L(zhǎng)時(shí)間高溫可能會(huì)導(dǎo)致抗體變性。

3. 非特異性結(jié)合：低溫有助于減少非特異性結(jié)合，因?yàn)榈鞍踪|(zhì)在較低溫度下更穩(wěn)定，不易發(fā)生錯(cuò)誤的相互作用。然而，這需要平衡反應(yīng)速度和穩(wěn)定性之間的關(guān)系。

4. 溫育方式：水浴法能較好解決因受熱不均衡導(dǎo)致的周圍孔與中央孔結(jié)果的吸光度差異（“邊緣效應(yīng)”），確保反應(yīng)板均勻受熱，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的一致性。

5. 緩沖液選擇：不同的包被液如碳酸鹽緩沖液（pH 9.0-9.6）和磷酸鹽緩沖液（pH 7.2-7.4）在不同溫度下表現(xiàn)不同。例如，抗原在堿性條件下不穩(wěn)定時(shí)，可以使用接近生理pH值的磷酸鹽緩沖液，即使在室溫或4℃下進(jìn)行包被。

綜上所述，包被溫度的選擇需根據(jù)抗原和抗體的穩(wěn)定性、反應(yīng)速率以及實(shí)驗(yàn)的具體要求來決定，通常37℃是常用的平衡點(diǎn)，但在特定情況下，低溫或更高溫度的調(diào)整也是必要的。