高效液相色譜儀測定煙用添加劑中馬兜鈴酸A的含量
一、原理
采用含0.1％甲酸的甲醇一水混合溶劑萃取煙用添加劑中的馬兜鈴酸A，經(jīng)高效液相色譜儀分離，以紫外檢測器測定，外標法定量。
二、試劑與材料
除特殊要求外，均使用分析純試劑。
1、水，符合GB／T 6682中上等水的要求。
2、乙腈：色譜純。
3、甲酸：色譜純。
4、甲醇：色譜純。
5、馬兜鈴酸A，純度>97％。
6、甲醇水混合溶劑，體積比9：1。
7、萃取溶劑：取1mL甲酸于1000mL容量瓶中，用甲醇一水混合溶劑定容至刻度。
8、標準溶液
8.1、上等標準儲備液：
稱取100mg(準確至0.1mg)馬兜鈴酸A，用萃取溶劑溶解轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中，定容至刻度并搖勻。在2℃～8℃下保存，有效期1個月。
8.2、二級標準儲備液：
準確移取與5.0mL上等標準儲備液至100mL容量瓶中，用萃取溶劑稀釋定容至刻度并搖勻。在2℃～8℃下保存，有效期1個月。
8.3、標準工作溶液：
分別準確移取100uL、300uL、500uL、1000uL、2000uL、4000uL二級標準儲備液至50mL容量瓶中，用萃取溶劑定容至刻度，得到系列標準工作溶液。即配即用。
三、儀器設(shè)備
1、高效液相色譜儀，配置柱溫箱、梯度洗脫功能和紫外檢測器。
2、分析天平，感量0.1mg。
3、振蕩器，*大轉(zhuǎn)速應(yīng)不小于200r／min。
4、離心機，*大轉(zhuǎn)速應(yīng)不小于8000r／min。
5、有機相濾膜，0.45um。
四、分析步驟
1、樣品處理：
稱取2g(準確到0.1mg)試樣于100ml。具塞錐形瓶中，準確加入50mL萃取溶劑，用150r／min振蕩萃取10min。取3mL萃取液置于10mL具塞離心試管中，在5000r／min條件下離心10min，取1mL上清液過有機相濾膜，濾液用高效液相色譜儀分析。
2、色譜條件：
色譜柱：C18，3.5um，250mm(長度)×4.6mm(內(nèi)徑)
流動相A：0.1％的甲酸乙腈溶液(體積分數(shù))；
流動相B：0.1％的甲酸水溶液(體積分數(shù))；
柱溫：35℃；
流速：1.0mL／min；
進樣體積：10uL；
梯度洗脫程序見表1；
紫外檢測器檢測波長：393 nm。
3、樣品測定：
按照儀器測試條件測定試樣，每個樣品平行測定兩次。
4、結(jié)果的計算與表述
樣品中的馬兜鈴酸A的含量由式(1)計算(計算結(jié)果應(yīng)扣除空白值)
高效液相色譜儀測定煙用添加劑中馬兜鈴酸A的含量
高效液相色譜儀測定煙用添加劑中馬兜鈴酸A的含量
高效液相色譜儀測定煙用添加劑中馬兜鈴酸A的含量
高效液相色譜儀測定煙用添加劑中馬兜鈴酸A的含量