氣相色譜儀測(cè)定醬油、水果汁、果醬中苯 甲酸、山梨酸的含量
1 原理
試樣經(jīng)鹽酸酸化后,用乙醚提取苯甲酸、山梨酸,采用氣相色譜儀 - 氫火焰離子化檢測(cè)器進(jìn)行分離測(cè)定,外標(biāo)法定量。
2 試劑和材料
除非另有說明,本方法所用試劑均為分析純,水為 GB / T6682 規(guī)定的上等水。
2. 1 試劑
2. 1. 1 乙醚( C 2 H 5 OC 2 H 5 )。
2. 1. 2 乙醇( C 2 H 5 OH )。
2. 1. 3 正己烷( C 6 H 14 )。
2. 1. 4 乙酸乙酯( CH 3 CO 2 C 2 H 5 ):色譜純。
2. 1. 5 鹽酸( HCl )。
2. 1. 6 氯化鈉( NaCl )。
2. 1. 7 無水硫酸鈉( Na 2 SO 4 ): 500℃ 烘 8h ,于干燥器中冷卻至室溫后備用。
2. 2 試劑配制
2. 2. 1 鹽酸溶液( 1+1 ):取 50mL 鹽酸,邊攪拌邊慢慢加入到 50mL 水中,混勻。
2. 2. 2 氯化鈉溶液( 40g / L ):稱取 40g 氯化鈉,用適量水溶解,加鹽酸溶液 2mL ,加水定容到 1L。
2. 2. 3 正己烷 - 乙酸乙酯混合溶液( 1+1 ):取 100mL 正己烷和 100mL 乙酸乙酯,混勻。
2. 3 標(biāo)準(zhǔn)品
2. 3. 1 苯甲酸( C 6 H 5 COOH , CAS 號(hào): 65-85-0 ),純度 ≥99. 0% ,或經(jīng)國(guó)家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。
2. 3. 2 山梨酸( C 6 H 8 O 2 , CAS 號(hào): 110-44-1 ),純度 ≥99. 0% ,或經(jīng)國(guó)家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。
2. 4 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制
2. 4. 1 苯甲酸、山梨酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液( 1000mg / L ):分別準(zhǔn)確稱取苯甲酸、山梨酸各 0. 1g (準(zhǔn)確到0. 0001g ),用甲醇溶解并分別定容至 100mL 。轉(zhuǎn)移至密閉容器中,于 -18℃ 貯存,保存期為 6 個(gè)月。
2. 4. 2 苯甲酸、山梨酸混合標(biāo)準(zhǔn)中間溶液( 200mg / L ):分別準(zhǔn)確吸取苯甲酸、山梨酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液各10. 0mL 于 50mL 容量瓶中,用乙酸乙酯定容。轉(zhuǎn)移至密閉容器中,于 -18℃ 貯存,保存期為 3 個(gè)月。
2. 4. 3 苯甲酸、山梨酸混合標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液:分別準(zhǔn)確吸取苯甲酸、山梨酸混合標(biāo)準(zhǔn)中間溶液 0mL 、0. 05mL 、 0. 25mL 、 0. 50mL 、 1. 00mL 、 2. 50mL 、 5. 00mL 和 10. 0mL ,用正己烷 - 乙酸乙酯混合溶劑( 1+1 )定容至 10mL ,配制成質(zhì)量濃度分別為 0 mg / L 、 1.00mg / L 、 5. 00mg / L 、 10. 0 mg / L 、 20.0mg / L 、50. 0mg / L 、 100mg / L 和 200mg / L 的混合標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液。臨用現(xiàn)配。
2. 5 材料
塑料離心管:50mL 。
3 儀器和設(shè)備
3. 1 氣相色譜儀:帶氫火焰離子化檢測(cè)器( FID )。
3. 2 分析天平:感量為 0. 001g 和 0. 0001g 。
3. 3 渦旋振蕩器。
3. 4 離心機(jī):轉(zhuǎn)速 >8000r / min 。
3. 5 勻漿機(jī)。
3. 6 氮吹儀。
4 分析步驟
4. 1 試樣制備
取多個(gè)預(yù)包裝的樣品,其中均勻樣品直接混合,非均勻樣品用組織勻漿機(jī)充分?jǐn)嚢杈鶆?取其中的200g 裝入潔凈的玻璃容器中,密封,水溶液于 4℃ 保存,其他試樣于 -18℃ 保存。
4. 2 試樣提取
準(zhǔn)確稱取約 2.5g (準(zhǔn)確至 0.001g )試樣于 50mL 離心管中,加 0.5g氯化鈉、0. 5mL 鹽酸溶液( 1+1 )和 0. 5mL 乙醇,用 15mL 和 10mL 乙醚提取兩次,每次振搖 1min ,于 8000r / min 離心 3min 。每次均將上層乙醚提取液通過無水硫酸鈉濾入 25mL 容量瓶中。加乙醚清洗無水硫酸鈉層并收集至約25mL 刻度,*后用乙醚定容,混勻。準(zhǔn)確吸取 5mL 乙醚提取液于 5mL 具塞刻度試管中,于 35℃ 氮吹至干,加入 2mL 正己烷 - 乙酸乙酯( 1+1 )混合溶液溶解殘?jiān)?待氣相色譜儀測(cè)定。
4. 3 儀器參考條件
4. 3. 1 色譜柱:聚乙二醇毛細(xì)管氣相色譜柱,內(nèi)徑 320 μ m ,長(zhǎng) 30m ,膜厚度 0. 25 μ m ,或等效色譜柱。
4. 3. 2 載氣:氮?dú)?流速 3mL / min 。
4. 3. 3 空氣: 400L / min 。
4. 3. 4 氫氣: 40L / min 。
4. 3. 5 進(jìn)樣口溫度: 250℃ 。
4. 3. 6 檢測(cè)器溫度: 250℃ 。
4. 3. 7 柱溫程序:初始溫度 80℃ ,保持 2min ,以 15℃ / min 的速率升溫至 250℃ ,保持 5min 。
4. 3. 8 進(jìn)樣量: 2 μ L 。
4. 3. 9 分流比: 10∶1 。
4. 4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作
將混合標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液分別注入氣相色譜儀中,以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo),以峰面積為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
4. 5 試樣溶液的測(cè)定
將試樣溶液注入氣相色譜儀中,得到峰面積,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到待測(cè)液中苯甲酸、山梨酸的質(zhì)量濃度。
5 分析結(jié)果的表述
試樣中苯甲酸、山梨酸含量按式(2 )計(jì)算:
…………………………( 2 )
式中:
X———試樣中待測(cè)組分含量,單位為克每千克(g/kg);
ρ———由標(biāo)準(zhǔn)曲線得出的樣液中待測(cè)物的質(zhì)量濃度,單位為毫克每升(mg/ L );
V———加入正己烷 - 乙酸乙酯( 1+1 )混合溶劑的體積,單位為毫升( mL );
25———試樣乙醚提取液的總體積,單位為毫升( mL );
m———試樣的質(zhì)量,單位為克(g );
5———測(cè)定時(shí)吸取乙醚提取液的體積,單位為毫升( mL );
1000 ———由mg/kg轉(zhuǎn)換為 g /kg的換算因子。
結(jié)果保留 3 位有效數(shù)字
氣相色譜儀測(cè)定醬油、水果汁、果醬中苯 甲酸、山梨酸的含量
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