pET28a-EYFP質(zhì)粒是一種原核表達(dá)載體,C端含有一個(gè)6×His標(biāo)簽,N端含有一個(gè)thrombin位點(diǎn)、6×His標(biāo)簽、T7標(biāo)簽和EYFP標(biāo)簽。該質(zhì)粒含有多個(gè)常用的酶切位點(diǎn),便于不同基因克隆。表達(dá)由宿主細(xì)胞提供的T7 RNA聚合酶誘導(dǎo),目的基因被克隆到質(zhì)粒載體上,受噬菌體強(qiáng)轉(zhuǎn)錄及翻譯信號(hào)控制。
pET系統(tǒng)是有史以來在大腸桿菌中表達(dá)重組蛋白的功能*強(qiáng)大的系統(tǒng),也是現(xiàn)今原核表達(dá)方面使用*廣泛的系統(tǒng)。該系列質(zhì)粒能很容易的通過降低誘導(dǎo)物的濃度來削弱蛋白表達(dá)。在非誘導(dǎo)條件下,可以使目的基因處于完全沉默狀態(tài)而不轉(zhuǎn)錄。