原核表達(dá)載體(pCold-SUMO)是在 pCold 載體基礎(chǔ)上改造而成，該載體啟動(dòng)子(CS Promoter)來(lái)源于南極嗜冷**，在低溫下(15 度)才能啟動(dòng)蛋白的表達(dá)。低溫下**生長(zhǎng)緩慢，使得蛋白合成速度減慢，從而*大限度的提高了蛋白正確折疊的幾率，提高了蛋白可溶性表達(dá)，增強(qiáng)了活性蛋白的表達(dá)比率。該表達(dá)系統(tǒng)所包含的 SUMO tag可以極大地提高小分子量蛋白的表達(dá)量，而且進(jìn)一步提高了蛋白的可溶表達(dá)幾率。同時(shí)，試劑盒配備的SUMO Protease(含6×His標(biāo)簽)可特異性去除 SUMO tag，從而得到不含任何標(biāo)簽的重組蛋白。TEE信號(hào)肽可增強(qiáng)冷啟動(dòng)子調(diào)控下目的蛋白的高表達(dá)。BL21(DE3)Chaprone E.coli **中含有分子伴侶蛋白質(zhì)粒，其表達(dá)產(chǎn)物可協(xié)助重組蛋白正確折疊形成可溶活性蛋白。分子伴侶蛋白質(zhì)粒為氯霉素抗性（chloramphenicol，Cmr）的表達(dá)受控于四環(huán)素（tetR）操縱子。
pCold-SUMO質(zhì)粒是利用冷休克基因CSPA啟動(dòng)子設(shè)計(jì)高效率蛋白質(zhì)表達(dá)載體。在E.COLI啟動(dòng)子下游處，插入了lac操縱子，以便嚴(yán)格控制表達(dá)。此外，5’非翻譯區(qū)（5’UTR），翻譯增強(qiáng)元件（TEE）,His標(biāo)簽序列，Xa因子切割位點(diǎn)和多克隆位點(diǎn)（MCS）位于CAPS啟動(dòng)子的下游。當(dāng)培養(yǎng)溫度切換到低溫時(shí)，大腸桿菌暫時(shí)停止生長(zhǎng)，大部分的大腸桿菌蛋白質(zhì)表達(dá)減少，但是一類稱為冷休克蛋白的蛋白質(zhì)被特異性誘導(dǎo)表達(dá)。