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產(chǎn)品資料

pCold I

pCold I
  • 如果您對該產(chǎn)品感興趣的話，可以
  • 產(chǎn)品名稱：pCold I
  • 產(chǎn)品型號：
  • 產(chǎn)品展商：XYbscience
  • 產(chǎn)品文檔：無相關(guān)文檔
簡單介紹
pCold I當(dāng)培養(yǎng)的大腸桿菌的溫度充分降低，幾乎暫時停止生長大部分的蛋白表達(dá)減少，而此時一組蛋白質(zhì)稱為“冷休克蛋白”被專門誘導(dǎo)表達(dá)。冷休克表達(dá)載體，pCold I-IV，是利用冷休克基因CSPA啟動子設(shè)計高效率蛋白??表達(dá)載體。 CSPA的啟動子的下游處，插入了lac操縱子，以便嚴(yán)格控制表達(dá)。pCold I此外，5'非翻譯區(qū)（5'UTR），翻譯增強(qiáng)元件（TEE），His標(biāo)簽序列，Xa因子切割位點(diǎn)和多克隆位點(diǎn)（MCS）位于在CSPA啟動子的下游的。由于該產(chǎn)品采用了大腸桿菌的啟動子，大多數(shù)大腸桿菌菌株可被用作表達(dá)宿主。有四種類型的pCold載體，他們的下列原件的位置稍有不同，TEE，His標(biāo)簽序列和Factor XA酶切位點(diǎn)。
產(chǎn)品描述
 

pCold I

  • 產(chǎn)品信息
  • 基本信息
  • 質(zhì)粒簡介
  • 質(zhì)粒圖譜
  • 質(zhì)粒序列

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品貨號 產(chǎn)品名稱 產(chǎn)品規(guī)格 優(yōu)惠價
XY0072 pCold I

5μg

￥請詢價

使用說明

信裕質(zhì)粒平臺的各批次質(zhì)粒菌株發(fā)貨前均經(jīng)過嚴(yán)格的多重驗(yàn)證，如存在質(zhì)量問題，請在收到產(chǎn)品的三個月內(nèi)通知我司。收到質(zhì)粒后請短暫離心，加入20μl ddH2O溶解質(zhì)粒，取2μl轉(zhuǎn)化至對應(yīng)感受態(tài)中，挑取單克隆重新提取質(zhì)粒后使用。如需獲取其他詳細(xì)信息請登錄我司官網(wǎng)查詢。

基本信息

啟動子: CspA promoter
復(fù)制子: Ori，F(xiàn)1 ori
質(zhì)粒分類: 大腸系列質(zhì)粒；大腸表達(dá)質(zhì)粒；pCold系列質(zhì)粒
質(zhì)粒大小: 4407bp
質(zhì)粒標(biāo)簽: N-His, N-Factor Xa
原核抗性: 氨芐青霉素Amp（100μg/ml）
克隆菌株: DH5α等大腸桿菌
培養(yǎng)條件: 37℃，有氧，LB
表達(dá)宿主: BL21等大腸桿菌
培養(yǎng)條件: 37℃，有氧，LB
誘導(dǎo)方式: IPTG或乳糖及其類似物
5'測序引物: pCold-F（ACGCCATATCGCCGAAAGG）
3'測序引物: pCold-R（GGCAGGGATCTTAGATTCTG）
備注: 冷啟動表達(dá)質(zhì)粒

質(zhì)粒簡介

        當(dāng)培養(yǎng)的大腸桿菌的溫度充分降低，幾乎暫時停止生長大部分的蛋白表達(dá)減少，而此時一組蛋白質(zhì)稱為“冷休克蛋白”被專門誘導(dǎo)表達(dá)。冷休克表達(dá)載體，pCold I-IV，是利用冷休克基因CSPA啟動子設(shè)計高效率蛋白質(zhì)表達(dá)載體。 CSPA的啟動子的下游處，插入了lac操縱子，以便嚴(yán)格控制表達(dá)。此外，5'非翻譯區(qū)（5'UTR），翻譯增強(qiáng)元件（TEE），His標(biāo)簽序列，Xa因子切割位點(diǎn)和多克隆位點(diǎn)（MCS）位于在CSPA啟動子的下游的。由于該產(chǎn)品采用了大腸桿菌的啟動子，大多數(shù)大腸桿菌菌株可被用作表達(dá)宿主。有四種類型的pCold載體，他們的下列原件的位置稍有不同，TEE，His標(biāo)簽序列和Factor XA酶切位點(diǎn)。
        pColdI質(zhì)粒是利用冷休克基因CSPA啟動子設(shè)計高效率蛋白質(zhì)表達(dá)載體。在啟動子下游處，插入了lac操縱子，以便嚴(yán)格控制表達(dá)。此外，5’非翻譯區(qū)（5’UTR），翻譯增強(qiáng)元件（TEE）,His標(biāo)簽序列，Xa因子切割位點(diǎn)和多克隆位點(diǎn)（MCS）位于CAPS啟動子的下游。當(dāng)培養(yǎng)溫度切換到低溫時，大腸桿菌暫時停止生長，大部分的大腸桿菌蛋白質(zhì)表達(dá)減少，但是一類稱為冷休克蛋白的蛋白質(zhì)被特異性誘導(dǎo)表達(dá)。
 

質(zhì)粒圖譜



質(zhì)粒序列

LOCUS       Exported                4407 bp ds-DNA     circular SYN 13-SEP-2016
DEFINITION  synthetic circular DNA
KEYWORDS    Untitled 3
SOURCE      synthetic DNA construct
  ORGANISM  synthetic DNA construct
REFERENCE   1  (bases 1 to 4407)
  TITLE     Direct Submission
  JOURNAL   Exported Tuesday, September 13, 2016 from MiaoLingPlasmid
            http://www.miaolingbio.com
FEATURES             Location/Qualifiers
     source          1..4407
                     /organism="synthetic DNA construct"
                     /mol_type="other DNA"
     protein_bind    84..100
                     /bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"
                     /note="lac operator"
                     /note="The lac repressor binds to the lac operator to
                     inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
                     relieved by adding lactose or
                     isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
     CDS             271..288
                     /codon_start=1
                     /product="6xHis affinity tag"
                     /note="6xHis"
                     /translation="HHHHHH"
     CDS             289..300
                     /codon_start=1
                     /product="Factor Xa recognition and cleavage site"
                     /note="Factor Xa site"
                     /translation="IEGR"
     rep_origin      complement(711..1166)
                     /direction=LEFT
                     /note="f1 ori"
                     /note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
                     indicates direction of (+) strand synthesis"
     promoter        1266..1370
                     /gene="bla"
                     /note="AmpR promoter"
     CDS             1371..2231
                     /codon_start=1
                     /gene="bla"
                     /product="beta-lactamase"
                     /note="AmpR"
                     /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
                     related antibiotics"
                     /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
                     ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
                     PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
                     EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
                     LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
                     LIKHW"
     rep_origin      2402..2990
                     /direction=RIGHT
                     /note="ori"
                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
                     replication"
     CDS             complement(3162..4244)
                     /codon_start=1
                     /gene="lacI"
                     /product="lac repressor"
                     /note="lacI"
                     /note="The lac repressor binds to the lac operator to
                     inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
                     relieved by adding lactose or
                     isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
                     /translation="MKPVTLYDVAEYAGVSYQTVSRVVNQASHVSAKTREKVEAAMAEL
                     NYIPNRVAQQLAGKQSLLIGVATSSLALHAPSQIVAAIKSRADQLGASVVVSMVERSGV
                     EACKAAVHNLLAQRVSGLIINYPLDDQDAIAVEAACTNVPALFLDVSDQTPINSIIFSH
                     EDGTRLGVEHLVALGHQQIALLAGPLSSVSARLRLAGWHKYLTRNQIQPIAEREGDWSA
                     MSGFQQTMQMLNEGIVPTAMLVANDQMALGAMRAITESGLRVGADISVVGYDDTEDSSC
                     YIPPLTTIKQDFRLLGQTSVDRLLQLSQGQAVKGNQLLPVSLVKRKTTLAPNTQTASPR
                     ALADSLMQLARQVSRLESGQ"
     promoter        complement(4245..4322)
                     /gene="lacI"
                     /note="lacI promoter"
ORIGIN
        1 aaggaatggt gtggccgatt aatcataaat atgaaaaata attgttgcat cacccgccaa
       61 tgcgtggctt aatgcacatc aaattgtgag cggataacaa tttgatgtgc tagcgcatat
      121 ccagtgtagt aaggcaagtc ccttcaagag ttatcgttga tacccctcgt agtgcacatt
      181 cctttaacgc ttcaaaatct gtaaagcacg ccatatcgcc gaaaggcaca cttaattatt
      241 aagaggtaat acaccatgaa tcacaaagtg catcatcatc atcatcatat cgaaggtagg
      301 catatggagc tcggtaccct cgagggatcc gaattcaagc ttgtcgacct gcagtctaga
      361 taggtaatct ctgcttaaaa gcacagaatc taagatccct gccatttggc ggggattttt
      421 ttatttgttt tcaggaaata aataatcgat cgcgtaataa aatctattat tatttttgtg
      481 aagaataaat ttgggtgcaa tgagaatgcg caggcccttt cgtctcgcgc gtttcggtga
      541 tgacggtgaa aacctctgac acatgcagct cccggagacg gtcacagctt gtctgtaagc
      601 ggatgccggg agcagacaag cccgtcaggg cgcgtcagcg ggtgttggcg ggtgtcgggg
      661 ctggcttaac tatgcggcat cagagcagat tgtactgaga gtgcaccata aaattgtaaa
      721 cgttaatatt ttgttaaaat tcgcgttaaa tttttgttaa atcagctcat tttttaacca
      781 ataggccgaa atcggcaaaa tcccttataa atcaaaagaa tagcccgaga tagggttgag
      841 tgttgttcca gtttggaaca agagtccact attaaagaac gtggactcca acgtcaaagg
      901 gcgaaaaacc gtctatcagg gcgatggccc actacgtgaa ccatcaccca aatcaagttt
      961 tttggggtcg aggtgccgta aagcactaaa tcggaaccct aaagggagcc cccgatttag
     1021 agcttgacgg ggaaagccgg cgaacgtggc gagaaaggaa gggaagaaag cgaaaggagc
     1081 gggcgctagg gcgctggcaa gtgtagcggt cacgctgcgc gtaaccacca cacccgccgc
     1141 gcttaatgcg ccgctacagg gcgcgtacta tggttgcttt gacgtatgcg gtgtgaaata
     1201 ccgcacagat gcgtaaggag aaaataccgc atcaggcgtc aggtggcact tttcggggaa
     1261 atgtgcgcgg aacccctatt tgtttatttt tctaaataca ttcaaatatg tatccgctca
     1321 tgagacaata accctgataa atgcttcaat aatattgaaa aaggaagagt atgagtattc
     1381 aacatttccg tgtcgccctt attccctttt ttgcggcatt ttgccttcct gtttttgctc
     1441 acccagaaac gctggtgaaa gtaaaagatg ctgaagatca gttgggtgca cgagtgggtt
     1501 acatcgaact ggatctcaac agcggtaaga tccttgagag ttttcgcccc gaagaacgtt
     1561 ttccaatgat gagcactttt aaagttctgc tatgtggcgc ggtattatcc cgtattgacg
     1621 ccgggcaaga gcaactcggt cgccgcatac actattctca gaatgacttg gttgagtact
     1681 caccagtcac agaaaagcat cttacggatg gcatgacagt aagagaatta tgcagtgctg
     1741 ccataaccat gagtgataac actgcggcca acttacttct gacaacgatc ggaggaccga
     1801 aggagctaac cgcttttttg cacaacatgg gggatcatgt aactcgcctt gatcgttggg
     1861 aaccggagct gaatgaagcc ataccaaacg acgagcgtga caccacgatg cctgtagcaa
     1921 tggcaacaac gttgcgcaaa ctattaactg gcgaactact tactctagct tcccggcaac
     1981 aattaataga ctggatggag gcggataaag ttgcaggacc acttctgcgc tcggcccttc
     2041 cggctggctg gtttattgct gataaatctg gagccggtga gcgtgggtct cgcggtatca
     2101 ttgcagcact ggggccagat ggtaagccct cccgtatcgt agttatctac acgacgggga
     2161 gtcaggcaac tatggatgaa cgaaatagac agatcgctga gataggtgcc tcactgatta
     2221 agcattggta actgtcagac caagtttact catatatact ttagattgat ttaaaacttc
     2281 atttttaatt taaaaggatc taggtgaaga tcctttttga taatctcatg accaaaatcc
     2341 cttaacgtga gttttcgttc cactgagcgt cagaccccgt agaaaagatc aaaggatctt
     2401 cttgagatcc tttttttctg cgcgtaatct gctgcttgca aacaaaaaaa ccaccgctac
     2461 cagcggtggt ttgtttgccg gatcaagagc taccaactct ttttccgaag gtaactggct
     2521 tcagcagagc gcagatacca aatactgttc ttctagtgta gccgtagtta ggccaccact
     2581 tcaagaactc tgtagcaccg cctacatacc tcgctctgct aatcctgtta ccagtggctg
     2641 ctgccagtgg cgataagtcg tgtcttaccg ggttggactc aagacgatag ttaccggata
     2701 aggcgcagcg gtcgggctga acggggggtt cgtgcacaca gcccagcttg gagcgaacga
     2761 cctacaccga actgagatac ctacagcgtg agctatgaga aagcgccacg cttcccgaag
     2821 ggagaaaggc ggacaggtat ccggtaagcg gcagggtcgg aacaggagag cgcacgaggg
     2881 agcttccagg gggaaacgcc tggtatcttt atagtcctgt cgggtttcgc cacctctgac
     2941 ttgagcgtcg atttttgtga tgctcgtcag gggggcggag cctatggaaa aacgccagca
     3001 acgcggcctt tttacggttc ctggcctttt gctggccttt tgctcacata gtcatgcccc
     3061 gcgcccaccg gaaggagctg actgggttga aggctctcaa gggcatcggt cgagatcccg
     3121 gtgcctaatg agtgagctaa cttacattaa ttgcgttgcg ctcactgccc gctttccagt
     3181 cgggaaacct gtcgtgccag ctgcattaat gaatcggcca acgcgcgggg agaggcggtt
     3241 tgcgtattgg gcgccagggt ggtttttctt ttcaccagtg agacgggcaa cagctgattg
     3301 cccttcaccg cctggccctg agagagttgc agcaagcggt ccacgctggt ttgccccagc
     3361 aggcgaaaat cctgtttgat ggtggttaac ggcgggatat aacatgagct gtcttcggta
     3421 tcgtcgtatc ccactaccga gatatccgca ccaacgcgca gcccggactc ggtaatggcg
     3481 cgcattgcgc ccagcgccat ctgatcgttg gcaaccagca tcgcagtggg aacgatgccc
     3541 tcattcagca tttgcatggt ttgttgaaaa ccggacatgg cactccagtc gccttcccgt
     3601 tccgctatcg gctgaatttg attgcgagtg agatatttat gccagccagc cagacgcaga
     3661 cgcgccgaga cagaacttaa tgggcccgct aacagcgcga tttgctggtg acccaatgcg
     3721 accagatgct ccacgcccag tcgcgtaccg tcttcatggg agaaaataat actgttgatg
     3781 ggtgtctggt cagagacatc aagaaataac gccggaacat tagtgcaggc agcttccaca
     3841 gcaatggcat cctggtcatc cagcggatag ttaatgatca gcccactgac gcgttgcgcg
     3901 agaagattgt gcaccgccgc tttacaggct tcgacgccgc ttcgttctac catcgacacc
     3961 accacgctgg cacccagttg atcggcgcga gatttaatcg ccgcgacaat ttgcgacggc
     4021 gcgtgcaggg ccagactgga ggtggcaacg ccaatcagca acgactgttt gcccgccagt
     4081 tgttgtgcca cgcggttggg aatgtaattc agctccgcca tcgccgcttc cactttttcc
     4141 cgcgttttcg cagaaacgtg gctggcctgg ttcaccacgc gggaaacggt ctgataagag
     4201 acaccggcat actctgcgac atcgtataac gttactggtt tcacattcac caccctgaat
     4261 tgactctctt ccgggcgcta tcatgccata ccgcgaaagg ttttgcgcca ttcgatggtg
     4321 tccgggatct cgacgctctc ccttatgcga ctcctgcatt aggaagcagc ccagtagtag
     4381 gttgaggccg ttgagcaccg ccgccgc
//
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