DNA提取 ：一、p3xFLAG-CMV-8實(shí)驗(yàn)原理
DNA是遺傳信息的載體，是*重要的生物信息分子，因此DNA的提取也是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)中*重要、*基本的操作之一。我公司提供從各種不同來(lái)源的樣品（如**、**、血液、培養(yǎng)細(xì)胞、動(dòng)物組織及植物組織等）中提取高純度基因組DNA的服務(wù)。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1、細(xì)胞裂解
● CTAB法 CTAB（hexadecyltrimethylammonium bromide，十六烷基**基溴化銨）是一種陽(yáng)離子去污劑，可融解細(xì)胞膜，并與核酸形成符合物。該復(fù)合物在高鹽溶液中（>0.7M NaCl）是可溶的，p3xFLAG-CMV-8通過(guò)有機(jī)溶劑抽提，去除蛋白、多糖、酚類(lèi)等雜質(zhì)后加入乙醇沉淀即可使核酸分離出來(lái)。此法多用于植物組織、**等材料。
● SDS法 SDS是一種陰離子去污劑，高溫（55℃-65℃）下可裂解細(xì)胞，使蛋白變性、染色體解析。常用于血液、**、酵母、動(dòng)物組織、細(xì)胞等樣品基因組DNA的提取。
● 其他方法 物理方法如機(jī)械剪切、超聲波破碎、勻漿等，化學(xué)方法如異硫氰酸胍、堿裂解、蛋白酶K消化等。
2、DNA分離純化
● 用酚/氯仿抽提裂解液，收集水相，乙醇沉淀DNA，*后用TE溶解DNA沉淀。
3、DNA的定量及檢測(cè)
● p3xFLAG-CMV-8瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)DNA片段的分子質(zhì)量。
● 紫外分光光度計(jì)檢測(cè)DNA濃度 DNA在OD260處有顯著吸收峰，OD260值為1相當(dāng)于大約50ug/ml雙鏈DNA。提取的基因組DNA樣品濃度＝OD260×50ug/ml×稀釋倍數(shù)。
● 紫外分光光度計(jì)檢測(cè)DNA純度
一般用OD260/OD280值檢測(cè)DNA樣品的純度。OD260/OD280值約為1.7-1.9，說(shuō)明DNA純度較好；若小于1.7有可能有蛋白污染；若大于2.0，說(shuō)明有RNA污染或DNA已經(jīng)降解。
三、p3xFLAG-CMV-8樣品處理
因細(xì)胞結(jié)構(gòu)及所含成分不同，樣品預(yù)處理的方法也有差異。不同樣品的預(yù)處理方法大致如下：
● 植物組織——液氮研磨
● 動(dòng)物組織——?jiǎng)驖{、液氮研磨
● 培養(yǎng)細(xì)胞——蛋白酶K消化
● 細(xì) 菌——溶菌酶消化
● 酵 母——Lyticase消化、玻璃珠破碎
p3xFLAG-CMV-8注意：客戶(hù)*好提供新鮮的樣品或取樣后立即在低溫（-20℃或-70℃）冷凍保存的樣品，避免反復(fù)凍溶。
XY001結(jié)核桿菌熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 TB40/96次XY002牛病毒性腹瀉/粘膜病病毒熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 BVDV40/96次XY003牛傳染性鼻氣管炎病毒熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 IBRV40/96次XY004布魯氏菌熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 BS40次/盒XY005炭疽桿菌熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 BA40次/盒XY006口蹄疫通用型熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 FMDV40次/盒XY007口蹄疫A型熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 FMDV-A40次/盒XY008口蹄疫O型熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 FMDV-O40次/盒XY009口蹄疫亞I型熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 FMDV-I40次/盒XY010副結(jié)核熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 paratuberculo sis40次/盒XY001禽流感病毒(即A型禽流感)通用型熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 AIV-M40/96次XY002禽流感病毒H5亞型熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 AIV-H540/96次XY003禽流感病毒N1亞型熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 AIV-N140/96次XY004禽流感病毒H7亞型熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 AIV-H740/96次XY004-1禽流感病毒H7N9熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 AIV-H7N924/40次XY005禽流感病毒H9亞型熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 AIV-H940/96次XY006新城疫病毒通用型熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 NDV40/96次XY007新城疫病毒(中強(qiáng)毒株)熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 NDV-vm40/96次XY008禽傳染性法氏囊病病毒熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 IBDV40/96次XY009禽傳染性****病毒熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 IBV40/96次XY010禽馬立克氏病病毒熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 MDV40/96次XY011禽J亞型禽白血病病毒熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 ALV－J40/96次XY012禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 REV48次/盒XY013禽流感通用型和新城疫病毒通用型(二合一)熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 AIV-M和NDV48次/盒XY001鯉春病毒血癥熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 Rhabdovirus carpio40次/盒XY002傳染性胰臟壞死病毒熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒 IPNV40次/盒XY003病毒性出血性敗血癥熒光定
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