DNA提取 ：一、FUW-OSKM實(shí)驗(yàn)原理
DNA是遺傳信息的載體，是*重要的生物信息分子，因此DNA的提取也是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)中*重要、*基本的操作之一。我公司提供從各種不同來源的樣品（如**、**、血液、培養(yǎng)細(xì)胞、動(dòng)物組織及植物組織等）中提取高純度基因組DNA的服務(wù)。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1、細(xì)胞裂解
● CTAB法 CTAB（hexadecyltrimethylammonium bromide，十六烷基**基溴化銨）是一種陽離子去污劑，可融解細(xì)胞膜，并與核酸形成符合物。該復(fù)合物在高鹽溶液中（>0.7M NaCl）是可溶的，FUW-OSKM通過有機(jī)溶劑抽提，去除蛋白、多糖、酚類等雜質(zhì)后加入乙醇沉淀即可使核酸分離出來。此法多用于植物組織、**等材料。
● SDS法 SDS是一種陰離子去污劑，高溫（55℃-65℃）下可裂解細(xì)胞，使蛋白變性、染色體解析。常用于血液、**、酵母、動(dòng)物組織、細(xì)胞等樣品基因組DNA的提取。
● 其他方法 物理方法如機(jī)械剪切、超聲波破碎、勻漿等，化學(xué)方法如異硫氰酸胍、堿裂解、蛋白酶K消化等。
2、DNA分離純化
● 用酚/氯仿抽提裂解液，收集水相，乙醇沉淀DNA，*后用TE溶解DNA沉淀。
3、DNA的定量及檢測
● FUW-OSKM瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA片段的分子質(zhì)量。
● 紫外分光光度計(jì)檢測DNA濃度 DNA在OD260處有顯著吸收峰，OD260值為1相當(dāng)于大約50ug/ml雙鏈DNA。提取的基因組DNA樣品濃度＝OD260×50ug/ml×稀釋倍數(shù)。
● 紫外分光光度計(jì)檢測DNA純度
一般用OD260/OD280值檢測DNA樣品的純度。OD260/OD280值約為1.7-1.9，說明DNA純度較好；若小于1.7有可能有蛋白污染；若大于2.0，說明有RNA污染或DNA已經(jīng)降解。
三、FUW-OSKM樣品處理
因細(xì)胞結(jié)構(gòu)及所含成分不同，樣品預(yù)處理的方法也有差異。不同樣品的預(yù)處理方法大致如下：
● 植物組織——液氮研磨
● 動(dòng)物組織——?jiǎng)驖{、液氮研磨
● 培養(yǎng)細(xì)胞——蛋白酶K消化
● 細(xì) 菌——溶菌酶消化
● 酵 母——Lyticase消化、玻璃珠破碎
FUW-OSKM注意：客戶*好提供新鮮的樣品或取樣后立即在低溫（-20℃或-70℃）冷凍保存的樣品，避免反復(fù)凍溶。
XY0801 高效感受態(tài)細(xì)胞制備試劑盒 100×100μl/200×100μl/400×100μl
XY0101 BCA蛋白定量試劑盒 200次/500次/2500次/5000次
XY0201 Bradford法蛋白定量試劑盒 250次/1000次/2500次
XY0401 超敏可逆蛋白染色試劑盒 250ml/1L
XY0501 新型快速蛋白染色試劑盒 20次/60次
XY0601 加熱型快速考馬斯亮蘭染色液 250ml/500ml/2000ml
XY0701 蛋白印跡膜再生液Stripping Buffer 6次/12次/40次
XY0801 超敏可逆蛋白印跡膜染色試劑盒I 100ml/250ml
XY1001 細(xì)胞核蛋白/漿蛋白抽提試劑盒 50次
XY1101 通用蛋白裂解/抽提試劑 50ml/100ml
XY1201 RIPA裂解液 50ml/100ml
XY2401 UltraECL底物化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒 50ml(A液B液各25ml)/100ml(A液B液各50ml)/500ml(A液B液各250ml)
XY2501 堿性磷酸酶底物顯色試劑盒(BCIP/NBT) 100ml
XY0101 GenFectinTM基因轉(zhuǎn)染試劑 0.5ml(可做250次6孔板或者35mm平皿轉(zhuǎn)染)/1ml(可做250次6孔板或者35mm平皿轉(zhuǎn)染)
RNA純化
XY3060 非凍型組織RNA保存液 100mL|250mL
XY111202 非凍型血液RNA保存液 10mL|100mL
XY80601 非凍型**RNA保存液 100mL|250mL
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