SSPE,20X,pH7.4技術(shù)服務(wù)
一、實(shí)驗(yàn)原理
類似于DNA的體內(nèi)復(fù)制。首先待擴(kuò)增DNA模板加熱變性解鏈，隨之將反應(yīng)混合物冷卻至某一溫度，這一溫度可使引物與它的靶序列發(fā)生退火，再將溫度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。SSPE,20X,pH7.4這種熱變性-復(fù)性-延伸的過(guò)程就是一個(gè)PCR循環(huán)，PCR就是在合適條件下的這種循環(huán)的不斷重復(fù)。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
PCR擴(kuò)增
SSPE,20X,pH7.4根據(jù)客戶的實(shí)驗(yàn)?zāi)康模M(jìn)行PCR反應(yīng)的優(yōu)化。
1、變性：高溫使雙鏈DNA解離形成單鏈（94℃，30s）。
2、退火：低溫下，引物與模板DNA互補(bǔ)區(qū)結(jié)合（55℃，30s）。
3、延伸：中溫延伸。DNA聚合酶催化以引物為起始點(diǎn)的DNA鏈延伸反應(yīng)（70～72℃，30～60s）。
SSPE,20X,pH7.4以上述三個(gè)步驟為一個(gè)循環(huán)，每一循環(huán)的產(chǎn)物均可作為下一個(gè)循環(huán)的模板，經(jīng)過(guò)n次循環(huán)后，目的DNA以2n的形式增加。
三、樣品準(zhǔn)備
1、模板制備
客戶提供PCR所需模板（質(zhì)粒、基因組DNA、PCR產(chǎn)物等），或者提供樣品，我們制備模板。
2、引物設(shè)計(jì)
SSPE,20X,pH7.4客戶提供上、下游引物，或者提供目的基因的相關(guān)信息（基因序列、Genebank accession number擴(kuò)增產(chǎn)物的用途等），我公司提供免費(fèi)的引物設(shè)計(jì)及合成。
2000UXY130857T4 RNA 連接酶 2 (截短型 K227Q)2000UXY120510ATP依賴的Dnase200UXY131230DNase I干粉100mgXY130984DNase I溶液1.5mLXY90205RNase A干粉100mg|500mgXY3160RNase A溶液1.5mLXY120409BAL 31核酸酶50UXY101001Benzonase核酸酶500UXY130824冷啟動(dòng)核酸酶10000UXY120407S1核酸酶5000UXY120408綠豆核酸酶1000UXY120412微球菌核酸酶5000UXY120413核糖核酸酶H600UXY130675核糖核酸酶HII250UXY130637Tma 核酸內(nèi)切酶 III500UXY130638核酸內(nèi)切酶 IV1000UXY131228Tth 核酸內(nèi)切酶 IV500UXY130640核酸內(nèi)切酶 V250UXY130639核酸內(nèi)切酶 III(Nth)1000UXY130642核酸內(nèi)切酶 VIII1000UXY130635T7核酸內(nèi)切酶 I250UXY130634人源脫嘌呤/脫嘧啶 (AP) 核酸內(nèi)切酶1000UXY120410核酸外切酶 I750UXY120420核酸外切酶 III2500UXY130627核酸外切酶 T250UXY130628Lambda 核酸外切酶1000UXY130629RecJf 核酸外切酶1000UXY130632T7 核酸外切酶1000UXY130672核糖核酸酶RNase If10000UXY120414DNA 拓?fù)洚悩?gòu)酶 I100UXY130651DNA 促旋酶(E. coli )100UXY130665Cre 重組酶50UXY81106蛋白酶K干粉100mgXY80911蛋白酶K溶液1.5mLXY131025胰凝乳蛋白酶，測(cè)序級(jí)25μgXY131026彈性蛋白酶5mgXY120508腸激酶(輕鏈)0.032μg|0.063μgXY120507Xa因子蛋白酶25μg|50μgXY130867Furin 蛋白酶50UXY131027胃蛋白酶
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