戊二醛二甲砷酸鈉緩沖固定液技術服務
一、實驗原理
類似于DNA的體內復制。首先待擴增DNA模板加熱變性解鏈,隨之將反應混合物冷卻至某一溫度,這一溫度可使引物與它的靶序列發(fā)生退火,再將溫度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。戊二醛二甲砷酸鈉緩沖固定液這種熱變性-復性-延伸的過程就是一個PCR循環(huán),PCR就是在合適條件下的這種循環(huán)的不斷重復。
二、實驗步驟
PCR擴增
戊二醛二甲砷酸鈉緩沖固定液根據客戶的實驗目的,進行PCR反應的優(yōu)化。
1、變性:高溫使雙鏈DNA解離形成單鏈(94℃,30s)。
2、退火:低溫下,引物與模板DNA互補區(qū)結合(55℃,30s)。
3、延伸:中溫延伸。DNA聚合酶催化以引物為起始點的DNA鏈延伸反應(70~72℃,30~60s)。
戊二醛二甲砷酸鈉緩沖固定液以上述三個步驟為一個循環(huán),每一循環(huán)的產物均可作為下一個循環(huán)的模板,經過n次循環(huán)后,目的DNA以2n的形式增加。
三、樣品準備
1、模板制備
客戶提供PCR所需模板(質粒、基因組DNA、PCR產物等),或者提供樣品,我們制備模板。
2、引物設計
戊二醛二甲砷酸鈉緩沖固定液客戶提供上、下游引物,或者提供目的基因的相關信息(基因序列、Genebank accession number擴增產物的用途等),我公司提供免費的引物設計及合成。XY870601 糞便DNAOUT 30次|100次 XY880102 柱式糞便DNAOUT 50次 XY8130812 凋亡DNAOUT 24次 XY880602 柱式凋亡DNAOUT 50次 XY890314 柱式尿液DNAOUT 50次 XY8121102 柱式鼠尾DNAOUT 50次 XY8130401 柱式海洋動物DNAOUT 50次 XY83672 植物DNAOUT 100次|250次 XY860602 柱式植物DNAOUT 50次 XY8130510 磁珠植物DNAOUT 50次 XY880925 大提柱式植物DNAOUT 4次 XY860705 一管式植物DNAOUT 50次|500次 XY860805 ***DNAOUT 20次|100次 XY8101116 柱式植物油DNAOUT 50次 XY8100932 溶壁酶(破壁酶)干粉 1g XY8100917 蝸牛酶干粉 5g XY8100919 消解酶(溶細胞酶)干粉 100mg XY860304 **DNAOUT 50次 XY870901 柱式**DNAOUT 50次 XY8100303 玻璃珠法柱式**DNAOUT 50次 XY880926 大提柱式**DNAOUT 4次 XY880803 柱式動物線粒體DNAOUT,PCR級 50次