Zetterqvist固定液技術(shù)服務(wù)
一、實驗原理
類似于DNA的體內(nèi)復(fù)制。首先待擴增DNA模板加熱變性解鏈,隨之將反應(yīng)混合物冷卻至某一溫度,這一溫度可使引物與它的靶序列發(fā)生退火,再將溫度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。Zetterqvist固定液這種熱變性-復(fù)性-延伸的過程就是一個PCR循環(huán),PCR就是在合適條件下的這種循環(huán)的不斷重復(fù)。
二、實驗步驟
PCR擴增
Zetterqvist固定液根據(jù)客戶的實驗?zāi)康模M行PCR反應(yīng)的優(yōu)化。
1、變性:高溫使雙鏈DNA解離形成單鏈(94℃,30s)。
2、退火:低溫下,引物與模板DNA互補區(qū)結(jié)合(55℃,30s)。
3、延伸:中溫延伸。DNA聚合酶催化以引物為起始點的DNA鏈延伸反應(yīng)(70~72℃,30~60s)。
Zetterqvist固定液以上述三個步驟為一個循環(huán),每一循環(huán)的產(chǎn)物均可作為下一個循環(huán)的模板,經(jīng)過n次循環(huán)后,目的DNA以2n的形式增加。
三、樣品準備
1、模板制備
客戶提供PCR所需模板(質(zhì)粒、基因組DNA、PCR產(chǎn)物等),或者提供樣品,我們制備模板。
2、引物設(shè)計
Zetterqvist固定液客戶提供上、下游引物,或者提供目的基因的相關(guān)信息(基因序列、Genebank accession number擴增產(chǎn)物的用途等),我公司提供免費的引物設(shè)計及合成。XY83660 非凍型組織DNA保存液 100mL|250mL XY860910 非凍型血液DNA保存液 100mL|250mL XY890315 非凍型尿液DNA保存液 15mL|100mL XY880802 非凍型拭子DNA保存液 100mL(A)|100mL(B) XY8130924 口腔采樣拭子 50支 XY8130925 鼻腔采樣拭子 50支 XY8130926 DNA樣品采集拭子 50支 XY8130927 宮頸采樣拭子 50支(A)|50支(B) XY870603 土壤腐殖酸**劑 100mL XY870302 一步離心式石蠟**劑 100次 XY890901 菌體內(nèi)****劑 200mL XY860403 紅細胞裂解液A型(核酸純化) 100mL XY890309 紅細胞裂解液B型(流式細胞分析用) 100mL XY8130928 紅細胞裂解液C型(核酸純化) 100mL XY8130989 白細胞裂解液 100mL