B-5固定液技術(shù)服務(wù)
一、實(shí)驗(yàn)原理
類(lèi)似于DNA的體內(nèi)復(fù)制。首先待擴(kuò)增DNA模板加熱變性解鏈,隨之將反應(yīng)混合物冷卻至某一溫度,這一溫度可使引物與它的靶序列發(fā)生退火,再將溫度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。B-5固定液這種熱變性-復(fù)性-延伸的過(guò)程就是一個(gè)PCR循環(huán),PCR就是在合適條件下的這種循環(huán)的不斷重復(fù)。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
PCR擴(kuò)增
B-5固定液根據(jù)客戶(hù)的實(shí)驗(yàn)?zāi)康模M(jìn)行PCR反應(yīng)的優(yōu)化。
1、變性:高溫使雙鏈DNA解離形成單鏈(94℃,30s)。
2、退火:低溫下,引物與模板DNA互補(bǔ)區(qū)結(jié)合(55℃,30s)。
3、延伸:中溫延伸。DNA聚合酶催化以引物為起始點(diǎn)的DNA鏈延伸反應(yīng)(70~72℃,30~60s)。
B-5固定液以上述三個(gè)步驟為一個(gè)循環(huán),每一循環(huán)的產(chǎn)物均可作為下一個(gè)循環(huán)的模板,經(jīng)過(guò)n次循環(huán)后,目的DNA以2n的形式增加。
三、樣品準(zhǔn)備
1、模板制備
客戶(hù)提供PCR所需模板(質(zhì)粒、基因組DNA、PCR產(chǎn)物等),或者提供樣品,我們制備模板。
2、引物設(shè)計(jì)
B-5固定液客戶(hù)提供上、下游引物,或者提供目的基因的相關(guān)信息(基因序列、Genebank accession number擴(kuò)增產(chǎn)物的用途等),我公司提供免費(fèi)的引物設(shè)計(jì)及合成。XY007 高致病性禽流感H5N1病毒核酸熒光PCR檢測(cè)試劑盒 48 XY008 禽流感H7病毒核酸熒光PCR檢測(cè)試劑盒 48 XY009 禽流感H9病毒核酸熒光PCR檢測(cè)試劑盒 48 XY010 流感病毒N1型核酸熒光PCR檢測(cè)試劑盒 48 XY011 流感病毒N2型核酸熒光PCR檢測(cè)試劑盒 48 XY012 乙型流感病毒核酸熒光PCR檢測(cè)試劑盒 48 XY013 丙型流感病毒核酸熒光PCR檢測(cè)試劑盒 48 XY014 呼吸道呼吸道合胞病毒(RSV)核酸熒光PCR檢測(cè)試劑盒 48 XY015 呼吸道呼吸道合胞病毒(RSV)A亞型核酸熒光PCR檢測(cè)試劑盒 48 XY016 呼吸道呼吸道合胞病毒(RSV)B亞型核酸熒光PCR檢測(cè)試劑盒 48 XY017 人副流感病毒1型核酸熒光PCR檢測(cè)試劑盒 48 XY018 人副流感病毒2型核酸熒光PCR檢測(cè)試劑盒 48 XY019 人副流感病毒3型核酸熒光PCR檢測(cè)試劑盒 48