甘油-PBS封固劑技術(shù)服務(wù)
一、實(shí)驗(yàn)原理
類似于DNA的體內(nèi)復(fù)制。首先待擴(kuò)增DNA模板加熱變性解鏈，隨之將反應(yīng)混合物冷卻至某一溫度，這一溫度可使引物與它的靶序列發(fā)生退火，再將溫度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。甘油-PBS封固劑這種熱變性-復(fù)性-延伸的過程就是一個PCR循環(huán)，PCR就是在合適條件下的這種循環(huán)的不斷重復(fù)。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
PCR擴(kuò)增
甘油-PBS封固劑根據(jù)客戶的實(shí)驗(yàn)?zāi)康模M(jìn)行PCR反應(yīng)的優(yōu)化。
1、變性：高溫使雙鏈DNA解離形成單鏈（94℃，30s）。
2、退火：低溫下，引物與模板DNA互補(bǔ)區(qū)結(jié)合（55℃，30s）。
3、延伸：中溫延伸。DNA聚合酶催化以引物為起始點(diǎn)的DNA鏈延伸反應(yīng)（70～72℃，30～60s）。
甘油-PBS封固劑以上述三個步驟為一個循環(huán)，每一循環(huán)的產(chǎn)物均可作為下一個循環(huán)的模板，經(jīng)過n次循環(huán)后，目的DNA以2n的形式增加。
三、樣品準(zhǔn)備
1、模板制備
客戶提供PCR所需模板（質(zhì)粒、基因組DNA、PCR產(chǎn)物等），或者提供樣品，我們制備模板。
2、引物設(shè)計
甘油-PBS封固劑客戶提供上、下游引物，或者提供目的基因的相關(guān)信息（基因序列、Genebank accession number擴(kuò)增產(chǎn)物的用途等），我公司提供免費(fèi)的引物設(shè)計及合成。XY100806Earle溶液100mLXY91105Hanks溶液100mLXY100927D-Hanks溶液100mLXY100215PBS緩沖液(10×)250mLXY100807杜氏PBS溶液，10×100mLXY90306胰酶消化液250mL(A)|250mL(B)XY100301秋水仙素溶液1mLXY130819Bouin固定液2LXY131223Zenker固定液2LXY131224Helly固定液2LXY131225Carnoy固定液2LXY131200細(xì)胞計數(shù)液(Vi-CELL儀專用)100次XYpyj19細(xì)胞培養(yǎng)基1套XYygtz22熒光探針和示蹤劑1瓶XYfly100細(xì)胞分離液1瓶XYydyz23細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)劑和抑制劑1瓶XY100407人**細(xì)胞分離液A型100mLXY90307青鏈霉素溶液100mLXY131134Percoll100mLXY131136Ficoll-Paque介質(zhì)100mLXY100601細(xì)胞核微量制備試劑盒50次XY111207動物線粒體純化試劑盒15次(A)|15次(B)XY111208植物線粒體純化試劑盒15次(A)|15次(B)XY120308植物葉綠體純化試劑盒15次XY100410超快轉(zhuǎn)染試劑盒1mLXY130821阿爾瑪藍(lán)細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒檢測試劑100次|500次XY111105MTT檢測試劑盒500次XY121205CCK-8細(xì)胞增殖及毒性檢測試劑盒5mLXY81026一站式生物素檢測TUNEL試劑盒(DAB法)10次XY81025雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒25次|50次XY130596熒光染色細(xì)胞凋亡檢測試劑盒200次XY130862DAPI干粉10mgXY130863碘化丙啶干粉10mgXY130864Hoechst 33258干粉10mgXY130865Hoechst 33342干粉10mgXY130595雙熒光素酶活性檢測試劑盒100次XY130597螢火蟲熒光素酶活性檢測試劑盒100次XY130598海腎熒光素酶活性檢測試劑盒100次XY131012螢火蟲熒光素1mLXY131019無內(nèi)**螢火蟲熒光素25mgXY130599β-半乳糖苷酶活性檢測試劑盒300次XY130802ADP/ATP發(fā)光法細(xì)胞活力檢測試劑盒200次XY130801ATP發(fā)光法細(xì)胞活力檢測試劑盒200次XY121104增強(qiáng)型天狼猩紅染色試劑盒100mLXY121105茜素紅S染色試劑盒100mLXY130822蘇木素染色液15ml 細(xì)胞試劑盒