Highman封固劑技術(shù)服務(wù)
一、實驗原理
類似于DNA的體內(nèi)復(fù)制。首先待擴增DNA模板加熱變性解鏈，隨之將反應(yīng)混合物冷卻至某一溫度，這一溫度可使引物與它的靶序列發(fā)生退火，再將溫度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。Highman封固劑這種熱變性-復(fù)性-延伸的過程就是一個PCR循環(huán)，PCR就是在合適條件下的這種循環(huán)的不斷重復(fù)。
二、實驗步驟
PCR擴增
Highman封固劑根據(jù)客戶的實驗?zāi)康?，進行PCR反應(yīng)的優(yōu)化。
1、變性：高溫使雙鏈DNA解離形成單鏈（94℃，30s）。
2、退火：低溫下，引物與模板DNA互補區(qū)結(jié)合（55℃，30s）。
3、延伸：中溫延伸。DNA聚合酶催化以引物為起始點的DNA鏈延伸反應(yīng)（70～72℃，30～60s）。
Highman封固劑以上述三個步驟為一個循環(huán)，每一循環(huán)的產(chǎn)物均可作為下一個循環(huán)的模板，經(jīng)過n次循環(huán)后，目的DNA以2n的形式增加。
三、樣品準備
1、模板制備
客戶提供PCR所需模板（質(zhì)粒、基因組DNA、PCR產(chǎn)物等），或者提供樣品，我們制備模板。
2、引物設(shè)計
Highman封固劑客戶提供上、下游引物，或者提供目的基因的相關(guān)信息（基因序列、Genebank accession number擴增產(chǎn)物的用途等），我公司提供免費的引物設(shè)計及合成。100mLXY130898MAL指示劑培養(yǎng)基100mLXY130899GAL指示劑培養(yǎng)基100mLXY130901酵母生產(chǎn)及產(chǎn)孢培養(yǎng)基100mLXY130902酵母產(chǎn)孢培養(yǎng)基100mLXY120517零誘導(dǎo)培養(yǎng)基100mLXY120688放線菌酮溶液1mLXY120680放線菌素D溶液1mLXY120681可溶性兩性霉素B溶液1mLXY60206氨芐青霉素溶液10mLXY60101氨芐青霉素干粉1gXY120682桿菌肽溶液1mLXY120704博萊霉素溶液1mLXY120683羧芐青霉素鈉溶液1mLXY120684噻孢霉素溶液1mLXY120685先鋒霉素溶液1mLXY60102氯霉素干粉1gXY60207氯霉素溶液10mLXY120687環(huán)孢霉素A溶液1mLXY120686細胞松弛素B溶液0.1mLXY131234地塞米松溶液1mLXY120690紅霉素溶液10mLXY100838遺傳霉素(G418)干粉100mgXY100839潮霉素B干粉250mgXY120692硫酸慶大霉素溶液2mLXY60208硫酸卡那霉素溶液10mLXY60302硫酸卡那霉素干粉1gXY120693絲裂霉素C溶液1mLXY60203硫酸新霉素干粉1gXY120695新生霉素溶液5mLXY120694制霉菌素溶液10mLXY120696土霉素鹽酸鹽溶液10mLXY120697青霉素G鉀鹽溶液1MuXY120698青霉素G鈉鹽溶10mLXY120699多粘菌素 B 硫酸鹽5mLXY100840嘌呤霉素干粉25mgXY120700利福平溶液10mLXY131232壯觀霉素溶液10mLXY120701鏈脲佐菌素溶液10mLXY60210硫酸鏈霉素溶液10mLXY60209鹽酸四環(huán)素溶液10mLXY120702衣霉素溶液1mLXY60301鹽酸四環(huán)素干粉1gXY120703鹽酸萬古霉素溶液10mL 探針標記及檢測
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