甲醛-明膠包被液技術服務
一、實驗原理
類似于DNA的體內復制。首先待擴增DNA模板加熱變性解鏈,隨之將反應混合物冷卻至某一溫度,這一溫度可使引物與它的靶序列發(fā)生退火,再將溫度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。甲醛-明膠包被液這種熱變性-復性-延伸的過程就是一個PCR循環(huán),PCR就是在合適條件下的這種循環(huán)的不斷重復。
二、實驗步驟
PCR擴增
甲醛-明膠包被液根據(jù)客戶的實驗目的,進行PCR反應的優(yōu)化。
1、變性:高溫使雙鏈DNA解離形成單鏈(94℃,30s)。
2、退火:低溫下,引物與模板DNA互補區(qū)結合(55℃,30s)。
3、延伸:中溫延伸。DNA聚合酶催化以引物為起始點的DNA鏈延伸反應(70~72℃,30~60s)。
甲醛-明膠包被液以上述三個步驟為一個循環(huán),每一循環(huán)的產物均可作為下一個循環(huán)的模板,經過n次循環(huán)后,目的DNA以2n的形式增加。
三、樣品準備
1、模板制備
客戶提供PCR所需模板(質粒、基因組DNA、PCR產物等),或者提供樣品,我們制備模板。
2、引物設計
甲醛-明膠包被液客戶提供上、下游引物,或者提供目的基因的相關信息(基因序列、Genebank accession number擴增產物的用途等),我公司提供免費的引物設計及合成。XY100212 一管式點突變試劑盒 10次 XY130823 多點突變試劑盒 20次 XY100213 DNA嵌套缺失試劑盒 10次 XY100922 亞硫酸氫鹽DNA修飾試劑盒 50次 XY130301 DNA甲基化修飾試劑盒 150次 XY130428 甲基化PCR 2.0試劑盒 150次 XY100923 甲基化專一性PCR試劑盒 50次 XY100936 人甲基化/非甲基化DNA標準品 100次 XY111009 端粒酶重復片段擴增試劑盒 50次 XY100204 一站式PCR-SSCP套裝 1套 XY101003 RAPD PCR試劑盒(含銀染) 100次 XY111109 DOP-PCR試劑盒 50次 XY130408 eTS抑制性差減雜交PCR試劑盒 10次 克隆及表達