鉻礬明膠包被液技術(shù)服務
一、實驗原理
類似于DNA的體內(nèi)復制。首先待擴增DNA模板加熱變性解鏈，隨之將反應混合物冷卻至某一溫度，這一溫度可使引物與它的靶序列發(fā)生退火，再將溫度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。鉻礬明膠包被液這種熱變性-復性-延伸的過程就是一個PCR循環(huán)，PCR就是在合適條件下的這種循環(huán)的不斷重復。
二、實驗步驟
PCR擴增
鉻礬明膠包被液根據(jù)客戶的實驗目的，進行PCR反應的優(yōu)化。
1、變性：高溫使雙鏈DNA解離形成單鏈（94℃，30s）。
2、退火：低溫下，引物與模板DNA互補區(qū)結(jié)合（55℃，30s）。
3、延伸：中溫延伸。DNA聚合酶催化以引物為起始點的DNA鏈延伸反應（70～72℃，30～60s）。
鉻礬明膠包被液以上述三個步驟為一個循環(huán)，每一循環(huán)的產(chǎn)物均可作為下一個循環(huán)的模板，經(jīng)過n次循環(huán)后，目的DNA以2n的形式增加。
三、樣品準備
1、模板制備
客戶提供PCR所需模板（質(zhì)粒、基因組DNA、PCR產(chǎn)物等），或者提供樣品，我們制備模板。
2、引物設計
鉻礬明膠包被液客戶提供上、下游引物，或者提供目的基因的相關(guān)信息（基因序列、Genebank accession number擴增產(chǎn)物的用途等），我公司提供免費的引物設計及合成。XY100844PCR優(yōu)化試劑盒1套XY90302氯化錳溶液，PCR級5mLXY70905明膠溶液，2%，PCR級1.5mLXY61203高GC DNA**劑，PCR級1.5mLXY130307二氯化錳溶液，25mM，PCR級5mLXY130840硫酸鎂溶液，10mM，PCR級5mLXY130841石蠟油，PCR級10mLXY80205DMSO，PCR級1.5mLXY130506海藻糖溶液，1.5M，PCR級1.5mLXY70902甜菜堿溶液，5M，PCR級1.5mLXY70909綠如藍染料，PCR級0.1mL|1mLXY51208dNTP溶液，10 mM0.5mL(B)|5mL(B)XY131038dUTP溶液，100 mM0.4mLXY130920dITP溶液，100mM0.5mLXY120615dATP溶液，100mM0.5mLXY120617dTTP溶液，100mM0.5mLXY120619dGTP溶液，100mM0.5mLXY130917dCTP溶液，100mM0.5mLXY131139Deaza dGTP溶液，5mM0.4mLXY131140雙脫氧dNTP溶液，10mM40uL×4XY131141dNTP和引物**劑100次XY131212PCR Mix染料10mLXY60901可逆型Taq DNA聚合酶抑制劑0.3mLXY130815Taq酶抗體250U|1000UXY130601DNA 修復混合液30次|150次XY70802即用型PCR試劑盒2.0100次|600次XY90805即用型PCR試劑盒3.0100次|600次XY130986即用型熱啟動PCR 試劑盒1.5次XY130985免DNA提取PCR試劑盒100次XY101005即用型易錯PCR試劑盒100次XY90702即用型長片段PCR試劑盒20次XY90708即用型高保真PCR試劑盒1.5mL|9mLXY130605即用型多重 PCR試劑盒50次XY90408即用型熒光定量PCR試劑盒100次|600次XY130816Real-Time PCR稀釋液1mlXY130817ROX參考染料，高濃度型200μlXY100931ROX參考染料，低濃度型5μgXY60906cDNA**鏈合成試劑盒10次|50次XY130911miRNA cDNA**鏈合成試劑盒25次XY131042miRNA熒光定量RT-PCR檢測試劑盒25次XY131005cDNA**鏈合成試劑盒30次XY130308一管式雙鏈cDNA合成試劑盒10次XY100814Oligo dT12-18引物5μgXY1004096 nt隨機引物5μgXY13122710 nt隨機引物5μgXY1206796nt隨機引物(抗水解)100μLXY80206兩管式RT-PCR試劑盒(MMLV-Taq)50次XY91202雙酶一管式RT-PCR試劑盒(MMLV-Taq)50次XY130609一步式RT-PCR Mix1mLXY130957免RNA提取RT-PCR試劑盒100次XY101219即用型熒光定量RT-PCR試劑盒50次XY100941通用型全基因組擴增試劑盒30次XY100938單細胞全基因組擴增試劑盒30次XY100940石蠟包埋組織全基因組擴增試劑盒30次XY100942單孢子全基因組擴增試劑盒30次XY100947環(huán)狀DNA全基因組擴增試劑盒30次XY100203通用型LAMP試劑盒50次XY101114通用型RT-LAMP試劑盒50次XY130923LAMP擴增陽性對照50次XY130833LAMP可見光染料1mLXY131179核酸稀釋液，測OD專用100mLXY131083Ribo-SPIA cDNA 擴增試劑盒20次XY91106T7體外轉(zhuǎn)錄試劑盒50次(A)|50次(B)XY91107SP6體外轉(zhuǎn)錄試劑盒50次(A)|50次(B)XY91108T3體外轉(zhuǎn)錄試劑盒50次(A)|50次(B)XY130694m7G(5′)ppp(5′)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25ODXY130695m7G(5′)ppp(5′)A 帽結(jié)構(gòu)類似物25ODXY130696G(5′)ppp(5′)A 帽結(jié)構(gòu)類似物25ODXY130697G(5′)ppp(5′)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25ODXY1306983′-O-Me-m7G(5′)ppp(5′)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25ODXY70906NTP溶液，10 mM0.5mLXY120625ATP溶液，100mM0.25mLXY120626UTP溶液，100mM0.25mLXY120628GTP溶液，100mM0.25mLXY120627CTP溶液，100mM0.25mLXY130832通用型MLPA試劑盒20次XY130551單細胞RNA擴增試劑盒80次XY130803單細胞裂解液(DNA)1mLXY130804單細胞裂解液(RNA)1mLXY130805單細胞懸浮液1mLXY130806胚胎裂解液1mLXY131128動物種屬鑒定PCR Mix100次XY131129植物種屬鑒定PCR Mix100次XY131130**種屬鑒定PCR Mix100次XY131131**種屬鑒定PCR Mix100次XY30常用PCR引物100uL 基因結(jié)構(gòu)和功能