APES-丙酮包被液技術(shù)服務(wù)
一、實(shí)驗(yàn)原理
類似于DNA的體內(nèi)復(fù)制。首先待擴(kuò)增DNA模板加熱變性解鏈，隨之將反應(yīng)混合物冷卻至某一溫度，這一溫度可使引物與它的靶序列發(fā)生退火，再將溫度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。APES-丙酮包被液這種熱變性-復(fù)性-延伸的過程就是一個PCR循環(huán)，PCR就是在合適條件下的這種循環(huán)的不斷重復(fù)。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
PCR擴(kuò)增
APES-丙酮包被液根據(jù)客戶的實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，進(jìn)行PCR反應(yīng)的優(yōu)化。
1、變性：高溫使雙鏈DNA解離形成單鏈（94℃，30s）。
2、退火：低溫下，引物與模板DNA互補(bǔ)區(qū)結(jié)合（55℃，30s）。
3、延伸：中溫延伸。DNA聚合酶催化以引物為起始點(diǎn)的DNA鏈延伸反應(yīng)（70～72℃，30～60s）。
APES-丙酮包被液以上述三個步驟為一個循環(huán)，每一循環(huán)的產(chǎn)物均可作為下一個循環(huán)的模板，經(jīng)過n次循環(huán)后，目的DNA以2n的形式增加。
三、樣品準(zhǔn)備
1、模板制備
客戶提供PCR所需模板（質(zhì)粒、基因組DNA、PCR產(chǎn)物等），或者提供樣品，我們制備模板。
2、引物設(shè)計(jì)
APES-丙酮包被液客戶提供上、下游引物，或者提供目的基因的相關(guān)信息（基因序列、Genebank accession number擴(kuò)增產(chǎn)物的用途等），我公司提供免費(fèi)的引物設(shè)計(jì)及合成。5000UXY120413核糖核酸酶H600UXY130675核糖核酸酶HII250UXY130637Tma 核酸內(nèi)切酶 III500UXY130638核酸內(nèi)切酶 IV1000UXY131228Tth 核酸內(nèi)切酶 IV500UXY130640核酸內(nèi)切酶 V250UXY130639核酸內(nèi)切酶 III(Nth)1000UXY130642核酸內(nèi)切酶 VIII1000UXY130635T7核酸內(nèi)切酶 I250UXY130634人源脫嘌呤/脫嘧啶 (AP) 核酸內(nèi)切酶1000UXY120410核酸外切酶 I750UXY120420核酸外切酶 III2500UXY130627核酸外切酶 T250UXY130628Lambda 核酸外切酶1000UXY130629RecJf 核酸外切酶1000UXY130632T7 核酸外切酶1000UXY130672核糖核酸酶RNase If10000UXY120414DNA 拓?fù)洚悩?gòu)酶 I100UXY130651DNA 促旋酶(E. coli )100UXY130665Cre 重組酶50UXY81106蛋白酶K干粉100mgXY80911蛋白酶K溶液1.5mLXY131025胰凝乳蛋白酶，測序級25μgXY131026彈性蛋白酶5mgXY120508腸激酶(輕鏈)0.032μg|0.063μgXY120507Xa因子蛋白酶25μg|50μgXY130867Furin 蛋白酶50UXY131027胃蛋白酶250mgXY130876PreScissiom 蛋白酶100UXY130872SUMO 蛋白酶5μgXY130875葡激酶100μgXY131183鏈激酶100μgXY130873TEV蛋白酶300UXY120708凝血酶1000UXY131028嗜熱菌蛋白酶25mgXY131029胰蛋白酶，質(zhì)譜級100μgXY130868人二硫鍵異構(gòu)酶1mgXY130869人超氧化物歧化酶10kuXY120623β-瓊脂糖酶Ⅰ100U|500UXY100406溶菌酶干粉10gXY100815溶菌酶溶液1.5mLXY131017乙酰化牛血清白蛋白400μLXY130874人玻連蛋白100μgXY130870硫氧還蛋白5mgXY131021鏈霉親和素1mgXY130818HRP標(biāo)記鏈霉親和素0.1mLXY131022堿性磷酸酶標(biāo)記鏈霉親和素0.5mLXY131085親和素10mgXY131086HRP標(biāo)記親和素2mgXY131087堿性磷酸酶標(biāo)記親和素100mgXY131088熒光素(FITC)標(biāo)記親和素5mgXY131090中性親和素蛋白10mgXY131092生物素1gXY131093熒光素標(biāo)記的生物素5mgXY131094生物素化的牛血清白蛋白25mgXY131095生物素化的辣根過氧化物酶5mgXY131096生物素化的堿性磷酸酶(AP)1mgXY131098生物素化蛋白G0.5mgXY131099生物素化蛋白A1mgXY131101生物素化蛋白L0.5mgXY131102生物素化兔IgG5mgXY130661RecA蛋白200μg|1000μgXY130662Tth RecA 蛋白100μgXY130663T4 噬菌體基因 32 蛋白100μg|500μgXY130664極高熱穩(wěn)定單鏈結(jié)合蛋白50μg