Gelatins技術(shù)服務(wù)
一、實驗原理
類似于DNA的體內(nèi)復(fù)制。首先待擴(kuò)增DNA模板加熱變性解鏈，隨之將反應(yīng)混合物冷卻至某一溫度，這一溫度可使引物與它的靶序列發(fā)生退火，再將溫度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。Gelatins這種熱變性-復(fù)性-延伸的過程就是一個PCR循環(huán)，PCR就是在合適條件下的這種循環(huán)的不斷重復(fù)。
二、實驗步驟
PCR擴(kuò)增
Gelatins根據(jù)客戶的實驗?zāi)康模M(jìn)行PCR反應(yīng)的優(yōu)化。
1、變性：高溫使雙鏈DNA解離形成單鏈（94℃，30s）。
2、退火：低溫下，引物與模板DNA互補(bǔ)區(qū)結(jié)合（55℃，30s）。
3、延伸：中溫延伸。DNA聚合酶催化以引物為起始點的DNA鏈延伸反應(yīng)（70～72℃，30～60s）。
Gelatins以上述三個步驟為一個循環(huán)，每一循環(huán)的產(chǎn)物均可作為下一個循環(huán)的模板，經(jīng)過n次循環(huán)后，目的DNA以2n的形式增加。
三、樣品準(zhǔn)備
1、模板制備
客戶提供PCR所需模板（質(zhì)粒、基因組DNA、PCR產(chǎn)物等），或者提供樣品，我們制備模板。
2、引物設(shè)計
Gelatins客戶提供上、下游引物，或者提供目的基因的相關(guān)信息（基因序列、Genebank accession number擴(kuò)增產(chǎn)物的用途等），我公司提供免費的引物設(shè)計及合成。100mLXY80813Western印跡膜抗體**劑50mL|200mLXY1008315-溴-4-氯-3-吲哚磷酸100mgXY100832四氮唑藍(lán)250mgXY81224BCIP/NBT顯色試劑盒100mLXY100214預(yù)混型BCIP/NBT溶液100mLXY81223增強(qiáng)型DAB顯色試劑盒100mLXY101106沉淀型TMB顯色試劑盒100mLXY91101一管式 TMB 顯色液100mL(A)XY120201超敏化學(xué)發(fā)光(HRP)檢測試劑盒25mL|250mLXY131192超敏化學(xué)發(fā)光(AP)檢測試劑盒25mLXY131142魯米諾1gXY131143AMPPD100mgXY131118乙烯乙二醇200mLXY131119HRP 穩(wěn)定劑/ 稀釋劑200mLXY130565β-Actin小鼠單抗30μLXY130566α-Actin小鼠單抗30μLXY130567β-Tubulin小鼠單抗30μLXY130568α-Tubulin小鼠單抗30μLXY130569GAPDH小鼠單抗30μLXY130570植物Actin小鼠單抗30μLXY130571組蛋白3.1小鼠單抗30μLXY130572COX IV兔單抗20μLXY131144山羊抗小鼠IgG(H+L),堿性磷酸酶標(biāo)記100μLXY131145山羊抗兔IgG(Fc)，堿性磷酸酶標(biāo)記100μLXY131146山羊抗人IgG(H+L)，堿性磷酸酶標(biāo)記100μLXY131147山羊抗大鼠IgG(H+L)，堿性磷酸酶標(biāo)記100μLXY131148驢抗山羊IgG，堿性磷酸酶標(biāo)記60μLXY131149山羊抗兔IgG(H+L)，辣根過氧化物酶標(biāo)記300μLXY131150山羊抗小鼠IgG(H+L)，辣根過氧化物酶標(biāo)記300μLXY131151山羊抗人IgG(H+L)，辣根過氧化物酶標(biāo)記300μLXY131152兔抗雞IgY，辣根過氧化物酶標(biāo)記300μLXY131153驢抗山羊IgG，辣根過氧化物酶標(biāo)記60μLXY131154山羊抗小鼠IgG，熒光素488標(biāo)記0.1mgXY131155山羊抗小鼠IgG，熒光素555標(biāo)記0.1mgXY131156山羊抗兔IgG，異硫氰酸熒光素標(biāo)記0.1mgXY131157藻紅蛋白標(biāo)記山羊抗兔IgG0.1mgXY131158熒光素488標(biāo)記山羊抗兔IgG0.1mgXY131159熒光素555標(biāo)記山羊抗兔IgG0.1mgXY131160異硫氰酸熒光素標(biāo)記山羊抗小鼠IgG0.1mgXY131161山羊抗小鼠IgG，藻紅蛋白標(biāo)記0.1mgXY100841β-巰基乙醇1.5mLXY100881SDS溶液(10%,電泳級)100mLXY90311電泳級Tricine干粉100gXY111007MALDI蛋白樣品處理試劑盒500次 工具酶