Xylene（二甲苯）技術(shù)服務(wù)
一、實(shí)驗(yàn)原理
類(lèi)似于DNA的體內(nèi)復(fù)制。首先待擴(kuò)增DNA模板加熱變性解鏈，隨之將反應(yīng)混合物冷卻至某一溫度，這一溫度可使引物與它的靶序列發(fā)生退火，再將溫度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。Xylene（二甲苯）這種熱變性-復(fù)性-延伸的過(guò)程就是一個(gè)PCR循環(huán)，PCR就是在合適條件下的這種循環(huán)的不斷重復(fù)。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
PCR擴(kuò)增
Xylene（二甲苯）根據(jù)客戶的實(shí)驗(yàn)?zāi)康模M(jìn)行PCR反應(yīng)的優(yōu)化。
1、變性：高溫使雙鏈DNA解離形成單鏈（94℃，30s）。
2、退火：低溫下，引物與模板DNA互補(bǔ)區(qū)結(jié)合（55℃，30s）。
3、延伸：中溫延伸。DNA聚合酶催化以引物為起始點(diǎn)的DNA鏈延伸反應(yīng)（70～72℃，30～60s）。
Xylene（二甲苯）以上述三個(gè)步驟為一個(gè)循環(huán)，每一循環(huán)的產(chǎn)物均可作為下一個(gè)循環(huán)的模板，經(jīng)過(guò)n次循環(huán)后，目的DNA以2n的形式增加。
三、樣品準(zhǔn)備
1、模板制備
客戶提供PCR所需模板（質(zhì)粒、基因組DNA、PCR產(chǎn)物等），或者提供樣品，我們制備模板。
2、引物設(shè)計(jì)
Xylene（二甲苯）客戶提供上、下游引物，或者提供目的基因的相關(guān)信息（基因序列、Genebank accession number擴(kuò)增產(chǎn)物的用途等），我公司提供免費(fèi)的引物設(shè)計(jì)及合成。抗HPC4標(biāo)簽蛋白單抗100μLXY130591小鼠抗SUMO標(biāo)簽蛋白單抗100μLXY130592HRP標(biāo)記內(nèi)參抗體30μLXY131202即用型GFP標(biāo)簽蛋白裂解液100uLXY130413肝素瓊脂糖5mL|50mLXY130417藍(lán)膠瓊脂糖5mL|50mLXY130421DEAE交換介質(zhì)50mLXY130423Q交換介質(zhì)50mLXY130422CM交換介質(zhì)50mLXY130424SP交換介質(zhì)50mLXY131020Sephacryl S-400基質(zhì)10mLXY130425苯基介質(zhì)50mLXY130426丁基介質(zhì)50mLXY130427丁基硫介質(zhì)50mLXY130418Protein A瓊脂糖1mLXY130420Protein G瓊脂糖1mLXY131201Protein A+G瓊脂糖2mLXY100939福林酚試劑100mLXY90610卵白蛋白標(biāo)準(zhǔn)品1mLXY131070牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)品1mLXY131071牛血清γ 球蛋白標(biāo)準(zhǔn)品1mLXY131072預(yù)稀釋BSA 蛋白標(biāo)準(zhǔn)品1mLXY131220預(yù)稀釋BGG 蛋白標(biāo)準(zhǔn)品1mLXY131074SDS-PAGE 樣品預(yù)處理試劑盒50次XY131122考馬斯亮藍(lán)R-25010gXY131123考馬斯亮藍(lán)G-25010gXY131078天然蛋白A1mgXY131079重組蛋白A1mgXY131080重組蛋白G1mgXY131081重組蛋白A/G1mgXY131082重組蛋白L1mgXY131075糖蛋白染色試劑盒10次XY131076磷酸蛋白染色試劑盒10次XY131077組氨酸標(biāo)簽蛋白染色試劑盒10次XY80814Bradford法蛋白定量試劑盒100mL|200mLXY80815BCA法蛋白定量試劑盒500次XY80816超敏型BCA法蛋白定量試劑盒500次XY131069還原劑兼容型BCA蛋白定量試劑盒250次XY101102改良Lowry法蛋白定量試劑盒1000次XY80808蛋白酶抑制劑混合液2×0.5mLXY80809蛋白磷酸酶抑制劑混合液11mLXY130525蛋白磷酸酶抑制劑混合液25mLXY130526**專(zhuān)用蛋白酶抑制劑10mLXY130527哺乳動(dòng)物專(zhuān)用蛋白酶抑制劑1mLXY130528植物專(zhuān)用蛋白酶抑制劑1mLXY130529酵母專(zhuān)用蛋白酶抑制劑5mLXY130530His標(biāo)簽蛋白專(zhuān)用蛋白酶抑制劑10mLXY130531組織培養(yǎng)專(zhuān)用蛋白酶抑制劑1mLXY130543α2巨球蛋白25Inh.UXY130544AEBSF溶液5mLXY130534抗凝血酶Ⅲ溶液1mLXY130535APMSF溶液1mLXY100834胰蛋白酶抑制劑溶液10mLXY130536抑氨肽酶溶液5mLXY130537鈣蛋白酶抑制劑Ⅰ溶液10mLXY100538鈣蛋白酶抑制劑Ⅱ溶液10mLXY100539胰凝乳蛋白酶抑制劑溶液1mLXY130540二氯異香豆素溶液10mLXY130541E-64蛋白酶抑制劑溶液10mLXY100837EDTA溶液,0.5M,蛋白級(jí)10mLXY130532EGTA溶液10mLXY130542水蛭素溶液2000ATUXY100836亮抑蛋白酶肽溶液1mLXY130533木瓜蛋白酶抑制劑溶液10mLXY100835胃蛋白酶抑制劑溶液1mLXY130545膦酰二肽溶液10mLXY100833PMSF溶液