蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)染技術(shù)是DNA和RNAi轉(zhuǎn)染的補充,是蛋白質(zhì)功能研究和細胞路徑研究的有力工具。而且轉(zhuǎn)染抗體入胞漿,可以進行活細胞染色,不需要固定細胞,或在蛋白質(zhì)水平沉默。
PULSinTM:Polyplus Transfection公司開發(fā)的一種有效轉(zhuǎn)染功能蛋白/抗體到活細胞中的新型轉(zhuǎn)染試劑。使用PULSinTM轉(zhuǎn)染蛋白和抗體為細胞內(nèi)蛋白功能研究提供了強有力的工具。
PULSin?為陽離子兩性物質(zhì),可以通過正電荷外衣包裹許多蛋白質(zhì)/抗體。PULSin?/蛋白復合物結(jié)合到細胞表面黏附分子——多配體聚糖。進入細胞和隨后內(nèi)涵體的釋放步驟與基因轉(zhuǎn)染的步驟是相似的。*終,負電荷的磷脂酰絲氨酸從復合物中排出蛋白質(zhì),將天然的蛋白質(zhì)釋放到胞漿中。對于陽離子聚合物轉(zhuǎn)染,結(jié)合細胞以及進入細胞的步驟并不是蛋白轉(zhuǎn)染的難點,而是后面的步驟(即在胞漿中的釋放過程)才是蛋白轉(zhuǎn)染的關(guān)鍵步驟。Polyplus公司利用兩性內(nèi)涵體釋放因子成功解決了蛋白質(zhì)在胞漿中的釋放問題。
-
PULSin?應(yīng)用廣泛,可用于蛋白、多肽和抗體轉(zhuǎn)染
-
高轉(zhuǎn)染效率:Polyplus Transfection公司利用兩性內(nèi)涵體釋放因子成功解決了蛋白質(zhì)在胞漿中的釋放問題,因而對比其他試劑,轉(zhuǎn)染效率優(yōu)勢明顯。
-
實驗操作簡便:PULSin?是即用型的轉(zhuǎn)染試劑,并且其中包括熒光對照蛋白和緩沖液,實驗操作非常方便和簡便。
-
轉(zhuǎn)染蛋白過程無毒,可轉(zhuǎn)染大多數(shù)細胞系和原代細胞
|
貼壁細胞系
|
3T3 L1
A549
BHK-21
CaSki
CHO
CV-1
HEK-293
|
60-80%
80%
30-40%
80-90%
80-90%
50%
45-55%
|
HeLa
HepaRG
MCF-7
MLE-15
NIH-3T3
RAW 264.7
Si Ha
|
80-90%
60-70 %
60%
60-75%
90-98%
40-50%
60-70%
|
|
懸浮細胞系
|
Jurkat
THP-1
|
20-30%
10%
|
K-562
|
20-30%
|
|
原代細胞(貼壁)
|
Primary human fibroblasts
Primary human hepatocytes
Primary human keratinocytes
Primary human visceral preadipocytes
|
60-70%
50-40%
55-70%
60-75%
|