Elisa試劑盒檢測中樣本OD值很低怎么辦
*近在做ELISA實驗,購買的是RD公司的ELISA試劑盒,完全按照上面的說明書步驟去做,發(fā)現(xiàn)做出來的標準曲線還是可以的,但是樣本OD值很低,就是顯色很淡,不在標準曲線范圍之內,而試劑盒*低靈敏度是100PG/ML。所以我訂的標準曲線*高濃度是4000PG/ML,我的樣本是人血清,而購買的試劑盒說明書說應用于細胞血清的測定,用在人血清測定需要改變一些條件,但是本人摸索了一個多月,還是沒能做出來。我不知道問題出在哪里,*近試著把標準品放在人血清里檢測,得到的OD值也是很低0.1左右,也不再曲線范圍。為什么會這樣呢?我用的是1%BSA+PBS作為稀釋劑,后面該用10%胎牛血清也是不行。所以問問給位同仁,我的問題出現(xiàn)在哪里啊,人家做ELISA,很快就完成了,可我怎么那么做不出來呢?
可根據(jù)我司給出的建議:
1. 試劑盒沒有質量問題,應該從樣品及保存上找原因。
2.你可以試試EDTA抗凝后取血漿檢測。
3. 新鮮樣品檢測一下,將標準品稀釋后加入血清或血漿中檢測(也就是用血清進一步稀釋標準品),觀察檢測結果,判斷是否是血淸中有未知物質影響。
4. 適當延長顯色時間。
5. 更換酶標儀,排除儀器原因。
6. 咨詢RD的技術支持,幫助找原因。
7. 更換廠家試劑盒,重新做。