多克隆抗體又簡稱多抗。與之相對應(yīng)的叫單克隆抗體,簡稱單抗。
抗原上那部分可以引起機體產(chǎn)生抗體的分子結(jié)構(gòu),叫做抗原決定簇。一個抗原上可以有好幾個不同的抗原決定簇,因而使機體產(chǎn)生好幾種不同的抗體,*終產(chǎn)生出抗體是漿細(xì)胞。只針對一個抗原決定簇起作用的漿細(xì)胞群就是一個純系,純系的英文為Clone,音譯就是克隆。由一種克隆產(chǎn)生的特異性抗體叫做單克隆抗體。單克隆抗體能目標(biāo)明確地與單一的特異抗原決定簇結(jié)合,就象導(dǎo)彈**地命中目標(biāo)一樣。另一方面,即使是同一種抗原決定簇,在機體內(nèi)也可以由好幾種克隆來產(chǎn)生抗體,形成好幾種單克隆抗體混雜物,稱為多克隆抗體。
1.佐劑的類型 目前實踐中常應(yīng)用的佐劑有氫氧化鋁膠、明礬、弗氏佐劑、脂質(zhì)體和石蠟
油等。也有采用結(jié)合桿菌等分枝桿菌、白喉桿菌以及細(xì)小棒狀桿菌等。
⑴ 弗氏不完全佐劑(incomplete Freund's adjuvant,IFA)
羊毛脂 1 份
石蠟油 5 份
混合,高壓**后保存。用時加熱融化,冷卻至 50℃左右,加抗原進行乳化處理。
⑵ 弗氏完全佐劑(complete Freund's adjuvant,CFA)
弗氏不完全佐劑 10ml
卡介苗 10mg~200mg 卡介苗可 100℃10min 滅活處理。
初次**時,*好用弗氏完全佐劑,以刺激機體產(chǎn)生較強的**反應(yīng)。再次**時,一般不用完全佐劑,而采用弗氏不完全佐劑。但在研究分枝桿菌及相關(guān)抗原時,一般不用弗氏完全佐劑,以免卡介苗的干擾。
⑶ 脂質(zhì)體:是人工制備的類脂質(zhì)的小球體,由一個或多個酷似細(xì)胞膜的類脂雙分子層組成,這種結(jié)構(gòu)使其能夠攜帶各種親水的、疏水的和兩性物質(zhì),他們被包裹在脂質(zhì)體內(nèi)部的水相中,或插入類脂雙分子層或吸附、聯(lián)接在脂質(zhì)體的表面,起到明顯的**增強作用。
⑷ 油佐劑 :采用植物油和礦物油均可,包括豆油、花生油、油菜油等。目前應(yīng)用*廣的礦物油。 10 號 白油(石蠟油) 100ml
硬脂酸鋁 2g
司本 80 6ml
混合加熱融化,分裝。用時按下列配方進行乳化。
油相 3 份
水相(加 4%吐溫-80) 1 份
先把油相攪拌起來,然后緩慢加入水相乳化。司本是油分散劑,吐溫是水分散劑,均有利于
乳化。