原代細(xì)胞的培養(yǎng):
(1)原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法
原代細(xì)胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細(xì)胞在體外進(jìn)行的培養(yǎng),是建立細(xì)胞系的步,是一項(xiàng)基本技術(shù)。
原代細(xì)胞接近和能反映體內(nèi)生長特性,適宜用于敏感性試驗(yàn)、細(xì)胞分化等實(shí)驗(yàn)研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
大鼠主動(dòng)脈弓平滑肌細(xì)胞
商品屬性:
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組織來源
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主動(dòng)脈組織
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規(guī)格
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5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
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細(xì)胞分類
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大鼠原代細(xì)胞
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培養(yǎng)條件
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氣相:空氣,95%;CO2,5%
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生長特性
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貼壁培養(yǎng)
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細(xì)胞形態(tài)
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長梭形
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細(xì)胞簡介:
血管發(fā)生和發(fā)展的一個(gè)主要因素是由于血管平滑肌細(xì)胞( smooth
muscle cells, SMCs)轉(zhuǎn)變成為了具有繁殖能力的表型。近期的研究表明平滑肌細(xì)胞能表達(dá)鈣離子通道,ICAM-1和VCAM-1。其中ICAM-1和VCAM-1的表達(dá)可能是造成血管壁炎癥反應(yīng),并進(jìn)一步造成血管的原因
。因此,對血管平滑肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)和研究可用來發(fā)現(xiàn)和確定新的血管的靶向方法。
細(xì)胞特性:
1) 組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常主動(dòng)脈組織。
2) 細(xì)胞鑒定:平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)熒光染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細(xì)胞生長方式:長梭形,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基:
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干擾素α21抗體
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嗜乳脂蛋白亞家族2成員A2抗體
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過氧化氫檢測試劑盒500T
測分型SODCu-Zn、Mn、總 100管/48樣 50管/24樣
小鼠抗平滑肌抗體(ASMA)elisa檢測試劑盒
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MFHA1/Malignant
fibrous histiocytoma
脫氫肽酶1抗體
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緊密連接蛋白2抗體 Anti-TJP2
視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞特異性蛋白65抗體 Anti-RPE65
核受體輔助抑制因子1抗體 Anti-NCoR1
玻璃粘連蛋白抗體 Anti-VTN/Vitronectin
TRA2B蛋白抗體
TRA2B
線粒體核糖體蛋白L50抗體
MRPL50
14號染色體開放閱讀框174 Anti-SAMD15/C14orf174
泛素特異性蛋白酶OTB1抗體 Anti-OTUB1
磷酸化p21激活激酶2抗體 Anti-phospho-PAK2(Ser141)
跨膜絲氨酸蛋白酶5抗體 Anti-TMPRSS5
辣根過氧物酶標(biāo)記小鼠IgG
大鼠主動(dòng)脈弓平滑肌細(xì)胞鯽魚卵黃蛋白原(VTG)elisa生化檢測試劑盒
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原代細(xì)胞的分離方法:
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
二、實(shí)體組織材料的分離方法
對于實(shí)體組織材料,由于細(xì)胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細(xì)胞充分分散,形成細(xì)胞懸液,可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。
(一)機(jī)械分散法
特點(diǎn):簡便、快速,但對組織機(jī)械損傷大,而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
(二)消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng),使團(tuán)塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時(shí)再采用機(jī)械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散,制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液,接種培養(yǎng)后,細(xì)胞容易貼壁生長。
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