產(chǎn)品名稱：小細胞肺癌
生長特性：懸浮生長

培養(yǎng)條件：RPMI1640+10%FBS

傳代方法：1:2to1:4，每周2~3次

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凍存培養(yǎng)基：

凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清??牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。

2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。

6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

Bassoon蛋白(BSN)elisa檢測試劑盒英文名稱：BSN ELISA Kit，英文縮寫：BSN，產(chǎn)品別名：Bassoon蛋白(BSN)ELISA檢測試劑盒，Bassoon蛋白(BSN)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

Ⅱ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅡ)elisa檢測試劑盒英文名稱：CTXⅡ ELISA Kit，英文縮寫：CTXⅡ，產(chǎn)品別名：Ⅱ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅡ)ELISA檢測試劑盒，Ⅱ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅡ)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

AMPA離子能谷氨酸受體3(GRIA3)elisa檢測試劑盒英文名稱：GRIA3 ELISA Kit，英文縮寫：GRIA3，產(chǎn)品別名：AMPA離子能谷氨酸受體3(GRIA3)ELISA檢測試劑盒，AMPA離子能谷氨酸受體3(GRIA3)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

5-羥色胺(5-HT)elisa檢測試劑盒英文名稱：5-HT ELISA Kit，英文縮寫：5-HT，產(chǎn)品別名：5-羥色胺(5-HT)ELISA檢測試劑盒，5-羥色胺(5-HT)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

107kDa肌醇多聚磷酸-4-磷酸酶Ⅰ型(INPP4A)elisa檢測試劑盒英文名稱：INPP4A ELISA Kit，英文縮寫：INPP4A，產(chǎn)品別名：107kDa肌醇多聚磷酸-4-磷酸酶Ⅰ型(INPP4A)ELISA檢測試劑盒，107kDa肌醇多聚磷酸-4-磷酸酶Ⅰ型(INPP4A)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

轉(zhuǎn)錄中介因子1-β(TRIM28/KAP1/RNF96/TIF1B)elisa檢測試劑盒英文名稱：TRIM28/KAP1/RNF96/TIF1B ELISA Kit，英文縮寫：TRIM28/KAP1/RNF96/TIF1B，產(chǎn)品別名：轉(zhuǎn)錄中介因子1-β(TRIM28/KAP1/RNF96/TIF1B)ELISA檢測試劑盒，轉(zhuǎn)錄中介因子1-β(TRIM28/KAP1/RNF96/TIF1B)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sTRAIL)elisa檢測試劑盒英文名稱：sTRAIL ELISA Kit，英文縮寫：sTRAIL，產(chǎn)品別名：腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sTRAIL)ELISA檢測試劑盒，腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sTRAIL)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)elisa檢測試劑盒英文名稱：LBP ELISA Kit，英文縮寫：LBP，產(chǎn)品別名：脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA檢測試劑盒，脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

載脂蛋白C1(APO-C1)elisa檢測試劑盒英文名稱：APO-C1 ELISA Kit，英文縮寫：APO-C1，產(chǎn)品別名：載脂蛋白C1(APO-C1)ELISA檢測試劑盒，載脂蛋白C1(APO-C1)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

抑制素B(INH-B)elisa檢測試劑盒英文名稱：INH-B ELISA Kit，英文縮寫：INH-B，產(chǎn)品別名：抑制素B(INH-B)ELISA檢測試劑盒，抑制素B(INH-B)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

胰多肽(PP)elisa檢測試劑盒英文名稱：PP ELISA Kit，英文縮寫：PP，產(chǎn)品別名：胰多肽(PP)ELISA檢測試劑盒，胰多肽(PP)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。
DMS-79細胞mTOR/FRAP  雷帕霉素靶蛋白抗體規(guī)格 0.1ml

MTNR1B  褪黑素受體1B抗體規(guī)格 0.1ml

MTNR1A/MTR-1A/MEL-1A-R  褪黑素受體1A/松果體素受體1A抗體規(guī)格 0.1ml

MT-ND6  NADH復(fù)合體6抗體規(guī)格 0.1ml

MT-ND5  NADH復(fù)合體5抗體規(guī)格 0.2ml

MT-ND1  NADH復(fù)合體1抗體規(guī)格 0.2ml

MTMR8  肌管素相關(guān)蛋白8抗體規(guī)格 0.2ml

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