公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。

形態(tài)特性：上皮樣

生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

特征特性：1957年，PuckTT從成年中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢的活檢組織建立了CHO細(xì)胞；廣泛用于生物制品的表達(dá)。

培養(yǎng)條件：DMEM(高糖）+10%FBS

傳代方法:1:3傳代，CQ-4天換液一次
實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl??液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)； 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專(zhuān)門(mén)配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C。或者，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。 

4--2-氟 98%HSV II -Ab(Human Herpes simplexvirus II antibody) ELISA Kit  人單純皰疹?、蛐涂贵w兔促胰液素(SCT)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

4--3-氟 98%Human Estrogen-induced protein pS2 ELISA Kit  人雌誘導(dǎo)蛋白PS2兔緊密結(jié)合蛋白1(TJP1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

5--2-氟 97%BV(Human bacterial vaginosis) ELISA Kit  人細(xì)性病兔遲現(xiàn)抗原(VLA)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

2--4-氟 99%HSV I Ab(Human Herpes simplexvirus I antibody) ELISA Kit  人單純皰疹?、裥涂贵w兔白介素1受體拮抗劑(IL-1ra)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

2--6-氟 98%Human Estrogen-induced protein pS2 ELISA Kit  人雌誘導(dǎo)蛋白PS2兔尿嘧啶核苷化酶2(UPP2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

4--2-氟 99%HPV-IgM(Human papillomavirus IgM) ELISA Kit  人狀瘤病抗體IgM兔叉頭框蛋白C1(FOXC1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

5--2-氟 98%HPV-IgG(Human papillomavirus IgG) ELISA Kit  人狀瘤病抗體IgG兔膽固酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

3,5-二-2-氟吡啶 98%HSV-Ag2(Human Herpes simplex virus 2) ELISA Kit  人單純皰疹病抗原2兔周期素D1(CCND1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

2,4-二-5-硝三氟 98%fPSA(Human Free Prostate Specific Antigen) ELISA Kit  人游離前列腺特異性抗原兔黏膜地址素黏附分子(MAdCAM1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

2,3-二氟 98%PSA(Human prostate specific antigen) ELISA Kit  人前列腺特異性抗原兔脂肪合酶(FASN)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

2,5-二氟 98%PS(Human phosphatidylserine) ELISA Kit  人脂酰絲氨兔胃泌素抑制肽(GIP)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

3,4-二氟 98%PC/CPG(Human choline phosphoglyceride) ELISA Kit  人膽堿甘油酯兔蛋白激酶Bγ(PKBG)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

3,4-二氟-2- 97% TBA(Human Total bile acide) ELISA Kit  人總膽汁兔組織多肽抗原(TPA)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

4,5-二氟-2- 98% Apo C3(Human Apolipoprotein C3) ELISA Kit  人載脂蛋白C3兔皮膚反應(yīng)因子/炎性因子(SRF/IF)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

2,3-二氟芐溴 98%CH(Human cholesterol) ELISA Kit  人血清總膽固兔L1粘附分子(L1CAM/CD171)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞；CHO性鞘脂酶Elisa試劑盒Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗小鼠IgMPCDHGC5  原鈣粘蛋白γC5抗體

β-葡萄糖腦苷脂酶Elisa試劑盒Cy3標(biāo)記的羊抗小鼠IgMPCDHGC4  原鈣粘蛋白γC4抗體

β氨己糖苷酶AElisa試劑盒Cy5標(biāo)記的羊抗小鼠IgMPCDHGC3/PCDH2  原鈣粘蛋白γC3抗體

異質(zhì)性胞核核糖核蛋白KElisa試劑盒Cy5.5標(biāo)記的羊抗小鼠IgMPCDHGB6  原鈣粘蛋白γB6抗體

硫軟骨素Elisa試劑盒Cy7標(biāo)記的羊抗小鼠IgMPCDHGB5  原鈣粘蛋白γB5抗體

阿立新BElisa試劑盒Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗小鼠IgMPCDHGB4  原鈣粘蛋白γB4抗體

晶狀體蛋白αAElisa試劑盒膠體金標(biāo)記的羊抗小鼠IgMPCDHGB2  原鈣粘蛋白γB2抗體

CHO宿主蛋白Elisa試劑盒堿性酶（AP）標(biāo)記的羊抗大鼠IgGPCDHGB1  原鈣粘蛋白γB1抗體

鸚鵡衣原體抗體Elisa試劑盒膠體金標(biāo)記的羊抗大鼠IgGPCDHGA9  原鈣粘蛋白γA9抗體

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