冷凍保存細胞之方法？

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

產品名稱：**細胞瘤
形態(tài)特性：母細胞

生長特性：懸浮生長

培養(yǎng)條件：RPMI1640+10%FBS

傳代方法： 1:3~1:5傳代；2~3天換液1次。

培養(yǎng)操作：

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。      

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。  

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取.

公司優(yōu)勢：

1.具有多年的銷售經驗的行業(yè)背景，我司秉承質量優(yōu)先的理念，希望廣大科研工作者與我司達成長期的合作關系；

2.公司不僅與各大高校、科研機構以及**性企業(yè)有著合作關系，還與國際接軌，我司代理多種知名的國際品牌，如ATCC、DSMZ、Millipore、Abcam,Serva、Pharmacia、eBioscience,Santa，Abnova，GenWay等。

相關熱銷產品：

FAM172A蛋白(FAM172A)elisa檢測試劑盒英文名稱：FAM172A ELISA Kit，英文縮寫：FAM172A，產品別名：FAM172A蛋白(FAM172A)ELISA檢測試劑盒，F(xiàn)AM172A蛋白(FAM172A)檢測試劑盒產品保存：2~8℃、有效期6個月。

A組鏈球壁多糖抗體(ASP)elisa檢測試劑盒英文名稱：ASP ELISA Kit，英文縮寫：ASP，產品別名：A組鏈球壁多糖抗體(ASP)ELISA檢測試劑盒，A組鏈球壁多糖抗體(ASP)檢測試劑盒產品保存：2~8℃、有效期6個月。

CD40配體(CD40L)elisa檢測試劑盒英文名稱：CD40L ELISA Kit，英文縮寫：CD40L，產品別名：CD40配體(CD40L)ELISA檢測試劑盒，CD40配體(CD40L)檢測試劑盒產品保存：2~8℃、有效期6個月。

Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)elisa檢測試劑盒英文名稱：NTX ELISA Kit，英文縮寫：NTX，產品別名：Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)ELISA檢測試劑盒，Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)檢測試劑盒產品保存：2~8℃、有效期6個月。

17酮皮質類固醇(17-KS)elisa檢測試劑盒英文名稱：17-KS ELISA Kit，英文縮寫：17-KS，產品別名：17酮皮質類固醇(17-KS)ELISA檢測試劑盒，17酮皮質類固醇(17-KS)檢測試劑盒產品保存：2~8℃、有效期6個月。

胎球蛋白A(Fetuin-A)elisa檢測試劑盒英文名稱：Fetuin-A ELISA Kit，英文縮寫：Fetuin-A，產品別名：胎球蛋白A(Fetuin-A)ELISA檢測試劑盒，胎球蛋白A(Fetuin-A)檢測試劑盒產品保存：2~8℃、有效期6個月。

表皮生長因子受體(EGFR/ErbB1)elisa檢測試劑盒英文名稱：EGFR/ErbB1 ELISA Kit，英文縮寫：EGFR/ErbB1，產品別名：表皮生長因子受體(EGFR/ErbB1)ELISA檢測試劑盒，表皮生長因子受體(EGFR/ErbB1)檢測試劑盒產品保存：2~8℃、有效期6個月。

B細胞活化因子(BAFF/CD257/TNFSF13B)elisa檢測試劑盒英文名稱：BAFF/CD257/TNFSF13B ELISA Kit，英文縮寫：BAFF/CD257/TNFSF13B，產品別名：B細胞活化因子(BAFF/CD257/TNFSF13B)ELISA檢測試劑盒，B細胞活化因子(BAFF/CD257/TNFSF13B)檢測試劑盒產品保存：2~8℃、有效期6個月。

阻抑素2(PHB2)elisa檢測試劑盒英文名稱：PHB2 ELISA Kit，英文縮寫：PHB2，產品別名：阻抑素2(PHB2)ELISA檢測試劑盒，阻抑素2(PHB2)檢測試劑盒產品保存：2~8℃、有效期6個月。

轉鈷胺素蛋白Ⅰ(TCN1)elisa檢測試劑盒英文名稱：TCN1 ELISA Kit，英文縮寫：TCN1，產品別名：轉鈷胺素蛋白Ⅰ(TCN1)ELISA檢測試劑盒，轉鈷胺素蛋白Ⅰ(TCN1)檢測試劑盒產品保存：2~8℃、有效期6個月。

中性粒細胞彈性蛋白酶(ELA2)elisa檢測試劑盒英文名稱：ELA2 ELISA Kit，英文縮寫：ELA2，產品別名：中性粒細胞彈性蛋白酶(ELA2)ELISA檢測試劑盒，中性粒細胞彈性蛋白酶(ELA2)檢測試劑盒產品保存：2~8℃、有效期6個月。
MAVER-1細胞PARG1/Rho GTPase activating protein 29  Rho GTP酶激活蛋白29抗體規(guī)格 0.2ml

PARD6B  缺陷性分配同源物β抗體規(guī)格 0.2ml

PAR6  缺陷性分配同源物α抗體規(guī)格 0.2ml

PAR4  蛋白酶激活受體4抗體規(guī)格 0.2ml

PAR4  蛋白酶活化受體4抗體規(guī)格 0.1ml

PAR3  非典型蛋白激酶C特定相互作用蛋白抗體規(guī)格 0.1ml

PAR3  蛋白酶激活受體3抗體規(guī)格 0.2ml
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器備。