實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；

產(chǎn)品名稱：乳腺癌細胞;MDA-MB-231
形態(tài)特性：上皮樣

生長特性：貼壁生長

特征特性：MDA-MB-231來自患有轉(zhuǎn)移乳腺腺癌的51歲女病人的胸水。在裸鼠和ALS處理的BALB/c小鼠中，它能形成低分化腺癌（III級）。

培養(yǎng)條件：L15+10%FBS

傳代方法：消化CQ-5分鐘，1:2,3天內(nèi)可長滿

公司細胞現(xiàn)貨供應，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。

2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細胞種類。

5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。

6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
九種TVOCs混合標準品10μg/ml,溶劑:Anti-CXC-R2/FITC  熒光素標記表面趨化因子受體2抗體IgG雞谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(GSTs)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

九種TVOCs混合標準品100μg/ml,溶劑:Anti-CXCR3/CD183/FITC  熒光素標記表面趨化因子受體3抗體/G蛋白偶聯(lián)受體IgG雞血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

九種TVOCs混合標準品1000μg/ml,溶劑:Anti-CXCR3/CD183(rat,mo) /FITC  熒光素標記兔抗大、小鼠表面趨化因子受體3抗體IgG雞血小板激活因子(PAF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

2,4,5-涕  分析標準品Anti-CXCR5/CD185/FITC  熒光素標記表面趨化因子受體5抗體IgG雞球蛋白E Fc段受體I(FcεR I)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

化鑭,無水 99.9% (REO),10目Anti-CXCR6/FITC  熒光素標記表面趨化因子受體6抗體IgG雞半凝集素9(GAL9)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

氧化鋱 99.99% metals basisAnti-CXCR7/RDC1/FITC  熒光素標記表面趨化因子受體7抗體IgG雞載脂蛋白A4(ApoA4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

鹽硫 AR,99.0%Anti-CXorf36/FITC  熒光素標記脫羧酶蛋白體36抗體IgG雞絲裂原激活蛋白激酶激酶1(MAP2K1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

鹽硫 分析標準品Anti-CXorf36/FITC  熒光素標記脫羧酶蛋白體36抗體IgG雞Hedgehog相互作用蛋白(HHIP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

鹽硫 USPAnti-Cyclin A/FITC  熒光素標記周期素A抗體IgG雞B激活抗原B7-2(LAB7-2/CD86)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

鹽硫 和昆蟲培養(yǎng)級Anti-Cyclin B1/FITC  熒光素標記周期素B1抗體IgG雞對氧酶3(PON3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

鹽硫 植物培養(yǎng)級Anti-Phospho-Cyclin B1 (Ser147) /FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠化周期素B1抗體IgG雞粒巨噬集落激因子抗體(GM-CSF Ab)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

氟化氫銨 99.99% metals basisAnti-Phospho-Cyclin B1 (Ser133) /FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠化周期素B1抗體IgG雞氨端前心鈉肽(NT-ProANP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

鹽硫 AR,99.0%Anti-Cyclin C/FITC  熒光素標記周期素C抗體IgG雞突觸核蛋白α(SNCα)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

環(huán)己二氧硅烷 97%Anti-Cyclin D1/FITC  熒光素標記周期素D1蛋白抗體雞保護素(CD59)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

一二乙鋁 1.1M solution in tolueneAnti-Phospho-Cyclin D1 (Thr286) /FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠化cyclin D1抗體IgG雞巨噬炎性蛋白1α(MIP-1α)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
MDA-MB-231細胞纖維蛋白酶Elisa試劑盒因子信號傳導抑制蛋白3抗原IL-1 Alpha  白介素1α/IL-1α抗體

氨合成酶Elisa試劑盒超氧化物歧化酶1抗原IKZF3  鋅指蛋白Aiolos抗體

黃質(zhì)脫氫酶Elisa試劑盒超氧化物歧化酶2抗原IKKα(Phospho-Thr23)  化KB抑制蛋白激酶α抗體

酮脫氫酶Elisa試劑盒生長抑素抗原IKK gamma/IKBKG  KB抑制蛋白激酶γ抗體

蘋果脫氫酶Elisa試劑盒胚胎干關(guān)鍵蛋白IKK beta/IKB  KB抑制蛋白激酶β抗體

蘋果合酶Elisa試劑盒SP1轉(zhuǎn)錄生長因子抗原IKK alpha/IkappaB kinase  KB抑制蛋白激酶α抗體

乙脫氫酶Elisa試劑盒富含半胱氨的性蛋白抗原IKK alpha + IKK beta  KB抑制蛋白激酶α/β抗體

硫氨Elisa試劑盒血清應答因子抗原IKIP  IKK激酶相互作用蛋白抗體

G蛋白Elisa試劑盒固調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1抗原IKI3 family protein  擬南芥IKI3抗體
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。