產(chǎn)品名稱(chēng)：乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞；BT-549
形態(tài)特性：上皮樣

生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

特征特性：該細(xì)胞1978年由W.G.Coutinho和E.Y.Lasfargues建系，源自一位72歲患有乳腺導(dǎo)管癌的白人女性，來(lái)源組織包括及浸潤(rùn)導(dǎo)管。該細(xì)胞形態(tài)包括上皮樣細(xì)胞及多核巨細(xì)胞，可分泌一種粘性物質(zhì)。

培養(yǎng)條件：RPMI1640+10%FBS+0.023IU/mlinsulin

傳代方法：1：2傳代

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專(zhuān)門(mén)配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C。或者，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。 
實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)；

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

琥珀二酯 AR，99%Anti-A Raf/ARAF/FITC  熒光素標(biāo)記A-Raf抗體IgG雞紅藻氨離子型谷氨受體2(GRIK2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

二乙二丁醋酯 98%Anti-Phospho-A Raf (Ser299) /FITC  熒光素標(biāo)記化A-Raf抗體IgG雞酪氨激酶2(Tyk-2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

二異丁酮 異構(gòu)體混合物，97%Anti-Phospho-A Raf (Tyr301/302) /FITC  熒光素標(biāo)記化A-Raf抗體IgG雞載脂蛋白M(ApoM)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

正己烷 AR，97%Anti-JAM1/CD321/FITC  熒光素標(biāo)記連接粘附分子1抗體IgG雞泛素結(jié)合酶E2A(UBE2A)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

異丁異丁酯 98%Anti-cRaf/Raf1(c-raf 1) /FITC  熒光素標(biāo)記抗cRaf/Raf1抗體IgG雞嗜性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員1(EAR1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

環(huán)己烷 Standard for GC, ≥99.8% (GC)Anti-CREB-1/FITC  熒光素標(biāo)記環(huán)腺苷應(yīng)答元件結(jié)合蛋白抗體IgG雞核糖體蛋白L10(RPL10)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

環(huán)己烷 99%Anti-P-CREB-1/FITC  熒光素標(biāo)記化環(huán)腺苷應(yīng)答元件結(jié)合蛋白抗體IgG雞Preptin 蛋白(Preptin)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

環(huán)己烷 for HPLC,≥99%Anti-C-REL/FITC  熒光素標(biāo)記衍生C-型凝集素抗體IgG雞B瘤因子10(Bcl-10)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

環(huán)己烷  光譜級(jí),≥99%Anti-CRF/FITC  熒光素標(biāo)記促腎上腺皮質(zhì)釋放因子IgG雞骨成型蛋白2 (BMP-2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

異丁(MIBC)  99%Anti-CRF/CRH /FITC  熒光素標(biāo)記促腎上腺皮質(zhì)釋放因子抗體IgG雞松弛素/胰島素樣肽受體1(RXFP1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

異丁酰乙酯 98%Anti-CRHR1/CRFR1/FITC  熒光素標(biāo)記促腎上腺皮質(zhì)釋放受體1抗體IgG雞Persephin蛋白(PSPN)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

異丁酮  for HPLC, ≥99.5%Anti-CRHR2/CRFR2/FITC  熒光素標(biāo)記促腎上腺皮質(zhì)釋放受體2抗體IgG雞間隙連接蛋白40(CX40)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

異丁酮 ACS, ≥98.5%Anti-Cripto-1/FITC  熒光素標(biāo)記表皮生長(zhǎng)因子相關(guān)肽抗體IgG雞N-乙酰β-D-氨葡萄糖苷酶(NAGase)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

氨酯 99%Anti-Cripto-1/FITC  熒光素標(biāo)記畸胎瘤衍化生長(zhǎng)因子抗體(表皮生長(zhǎng)因子相關(guān)肽)C端IgG雞睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CNTF)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

異戊 ACS，98.5%Anti-CRLR/CALCRL/FITC  熒光素標(biāo)記降鈣素受體樣蛋白抗體IgG雞活化蛋白C(APC)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
BT-549細(xì)胞二氫類(lèi)黃酮還原酶Elisa試劑盒環(huán)指蛋白148抗原IL-19/NG.1  白介素-19抗體

過(guò)氧化還原酶5Elisa試劑盒Rho相關(guān)蛋白激酶1抗原IL-18R Beta/IL1R7/CD218b  白介素-18受體β鏈抗體

組蛋白Elisa試劑盒Rho相關(guān)蛋白激酶2抗原IL-18R alpha/CD218a  白介素-18受體α鏈抗體

ACC合成酶Elisa試劑盒核受體RXRα抗原IL18BP  白介素18結(jié)合蛋白抗體

ACC氧化酶Elisa試劑盒6-山梨脫氫酶抗原IL-18/IGIF  白介素-18/干擾素γ誘導(dǎo)因子抗體

β-葡萄糖苷酶Elisa試劑盒S100B蛋白抗原IL-17RD  白介素17受體D抗體

吲哚丁Elisa試劑盒S100B蛋白多肽IL-17RC/IL-17RL  白介素17受體C抗體

糖酶Elisa試劑盒鈣結(jié)合蛋白S100A1抗原IL-17RB  白介素-17B受體抗體

順式還原酮加雙氧酶1Elisa試劑盒核質(zhì)結(jié)合區(qū)結(jié)合蛋白1抗原IL-17R/IL-17RA/CD217  白介素17受體抗體